Portali mjekësor. Analizon. Sëmundjet. Kompleksi. Ngjyra dhe aroma

Pranimi dhe regjistrimi i biomaterialit në studimin PCR. Metodat për marrjen e biomaterialit për kërkime me PCR. Teknika PCR

aktuale

MU 4.2.2039-05

UDHËZIME METODOLOGJIKE

4.2. METODAT E KONTROLLIT. FAKTORËT BIOLOGJIK DHE MIKROBILOGJIK

Teknika për mbledhjen dhe transportimin e biomaterialeve në mikrobiologjike
laboratorët


Data e hyrjes 2006-07-01

2. REKOMANDUAR PËR MIRATIMIN nga Komisioni për Racionimin Sanitar dhe Higjienik Shtetëror pranë Shërbimit Federal për Mbikëqyrjen e Mbrojtjes së të Drejtave të Konsumatorit dhe Mirëqenies së Njeriut më 6 tetor 2005 (Procesverbali nr. 3).

3. MIRATUAR DHE PARAQITUR nga Shefi i Shërbimit Federal për Mbikëqyrjen e Mbrojtjes së të Drejtave të Konsumatorit dhe Mirëqenies së Njeriut, Kryemjeku Sanitar Shtetëror. Federata Ruse G.G. Onishchenko 23 dhjetor 2005

5. PARAQITET PER HERE TE PARE.

1 zonë përdorimi

1 zonë përdorimi

1.1. Udhëzimet përcaktojnë rregullat për mbledhjen dhe transportimin e materialeve biologjike në laboratorët mikrobiologjikë me qëllim përmirësimin e cilësisë së rezultateve të hulumtimit laboratorik dhe organizimin e masave anti-epidemike dhe parandaluese, si dhe parandalimin e infeksioneve spitalore midis personelit mjekësor dhe pacientëve.

1.2. Udhëzimet janë të destinuara për përdorim nga organet dhe organizatat e Shërbimit Federal për Mbikëqyrjen e Mbrojtjes së të Drejtave të Konsumatorit dhe Mirëqenies së Njeriut, dhe mund të përdoren gjithashtu nga autoritetet dhe organizatat shëndetësore.

2. Dispozitat e përgjithshme

2.1. Marrja e të dhënave të besueshme për identifikimin e burimeve të infeksionit është e nevojshme për organizimin në kohë dhe efektiv të masave anti-epidemike dhe parandaluese, duke vlerësuar nivelin e ndjeshmërisë së popullsisë gjatë mbikëqyrjes epidemiologjike.

2.2. Teknika e zhvilluar për mbledhjen dhe transportimin e materialeve biologjike në laboratorët mikrobiologjikë do të bëjë të mundur uljen e nivelit të gabimit paraanalitik dhe përmirësimin e cilësisë së punës së laboratorëve në objektivizimin e rezultateve.

2.4. Udhëzimet mund të përdoren gjatë kryerjes së mbikëqyrjes epidemiologjike të rezistencës antimikrobike të patogjenëve të izoluar dhe të identifikuar në laborator, duke optimizuar përdorimin e barnave antimikrobiale dhe masat në fushën e parandalimit, kontrollit dhe kontrollit të rezistencës në nivel lokal, rajonal dhe kombëtar.

3. Kërkesat e përgjithshme për mbledhjen e mostrave të materialit biologjik për kërkime mikrobiologjike

3.1. Për të parandaluar infektimin e personelit mjekësor dhe pacientëve gjatë mbledhjes së mostrave të biomaterialeve dhe dërgimit të tij në laborator, është e nevojshme:

mos e ndotni sipërfaqen e jashtme të enëve gjatë mbledhjes dhe dorëzimit të mostrave;

mos i ndotin dokumentet shoqëruese (referimet);

minimizoni kontaktin e drejtpërdrejtë të mostrës së biomaterialit me duart e punonjësit mjekësor që e mbledh dhe e dorëzon atë në laborator;

përdorni kontejnerë (kontejnerë) sterile të disponueshme ose të miratuara siç duhet për mbledhjen, ruajtjen dhe shpërndarjen e mostrave për këto qëllime;

transportoni mostrat në bartës ose pirgje me fole të veçanta;

vëzhgoni kushtet aseptike për të parandaluar infeksionin e pacientit në procesin e kryerjes së masave invazive;

grumbulloni mostra në enë sterile të disponueshme ose qelqi (të pa kontaminuara me biomaterial, të pa dëmtuar nga çarje, skaje të copëtuara dhe defekte të tjera)

3.2. Mostrat e biomaterialeve duhet të mblidhen si më poshtë:

para fillimit terapi me antibiotikë, në mungesë të një mundësie të tillë - menjëherë para ri-futjes (pritjes) të barnave;

në sasinë (peshën, vëllimin) e nevojshme për të kryer analizën, sepse sasia e pamjaftueshme e biomaterialit për kërkime çon në rezultate të rreme;

me ndotje minimale të materialit me mikroflora normale, tk. prania e tij çon në një interpretim të gabuar të rezultateve të marra, për shembull, në studimin e pështymës, mostrave nga hunda, faringu (faringu), organet gjenitale, etj.

3.3. Kur mbledhni një kampion, sigurohuni që kur hapni një enë me një biomaterial, një aerosol të mos formohet në laborator: mostrat e gjakut dhe lëngjeve të tjera të trupit transferohen me kujdes nga një shiringë pa shkumë në një të thatë dhe / ose të mbushur me medium ( antikoagulant) enët.

3.4. Në drejtimin e studimit tregoni: mbiemrin, emrin, patronimin e pacientit; viti i lindjes; dega në të cilën ndodhet; numri i historisë mjekësore (kartela ambulatore); diagnoza; materiali i dërguar për detyra kërkimore dhe kërkimore; data dhe ora e marrjes së materialit (orë); barna antibakteriale (imune), nëse mostra jepet në sfondin e antibiotikëve dhe / ose imunoterapisë; mbiemri, emri, patronimika e mjekut (konsulenti) që e dërgon kampionin për ekzaminim. Gjatë dërgimit të biomaterialeve të marra në autopsi, tregohet edhe departamenti në të cilin ka vdekur pacienti.

3.5. Para mbledhjes së mostrës, veçanërisht kur përdoren metoda invazive, merren probabiliteti i rrezikut për pacientin dhe përfitimi, si dhe rëndësia e këtij lloji të veçantë të biomaterialit për qëllime të objektivizimit të diagnozës klinike dhe vlerësimit të masave terapeutike të vazhdueshme ose të planifikuara. nepermjet llogarise.

4. Kërkesat e përgjithshme për dërgimin e mostrave të biomaterialeve në një laborator mikrobiologjik

4.1. Të gjitha mostrat e mbledhura dërgohen në laborator mikrobiologjik menjëherë pas marrjes, me përjashtim të rasteve të përdorimit të kontejnerëve me mjete transporti të miratuara për përdorim për këto qëllime në Federatën Ruse në mënyrën e përcaktuar.

Kjo është e nevojshme për:

ruajtja e qëndrueshmërisë së patogjenëve dhe mundësia e izolimit të mikroorganizmave që kërkojnë kushte të veçanta kultivimi (Haemophylus dhe të tjerë);

parandalimi i rritjes së tepërt të mikroorganizmave me rritje të shpejtë dhe aktive;

ruajtja e raportit të përqendrimeve fillestare të izolateve në prani të asociacioneve mikrobike në kampion;

zvogëlimi i kohës së kontaktit të kampionit me disa antiseptikë topikalë, të cilët mund të kenë aktivitet antibakterial;

objektivizimi i diagnozës klinike të një sëmundjeje infektive-inflamatore dhe vlerësimi i rezultateve të terapisë.

4.2. Lejohet përdorimi i metodave alternative për të rritur kohën e dorëzimit të biomaterialit në laborator.

Mostrat duhet të ruhen në frigorifer në temperaturën 2-8°C, përveç siç tregohet më poshtë.

4.2.1. Kur kampioni ruhet në një kontejner transporti të specializuar (sistemi transporti) i miratuar për përdorim në përputhje me procedurën e vendosur, i cili është një tub steril njëpërdorimësh me një agar ose mjet transporti të lëngshëm dhe një sondë shtupë e vendosur në tapë dhe sterile e paketuar me tub. Mostrat ruhen në kontejnerë të tillë në temperaturën e dhomës (18-20 °C). Mediat e transportit, të dendura të veçanta karboni i aktivizuar dhe pa të, lejojnë ruajtjen e qëndrueshmërisë së mikroorganizmave që kërkojnë kushte të veçanta kultivimi për 48-72 orë.

Për mostrat për anaerobet dhe për florën fekale, përdoren kontejnerë të posaçëm me një mjet transporti, epruveta me media për izolimin e Campylobacter dhe Helicobacter, të miratuara për përdorim në mënyrën e përcaktuar. Mjedise të tilla krijojnë një atmosferë anabiotike për mikroorganizmat, e cila ndihmon në reduktimin e metabolizmit të tyre, pengon rritjen dhe parandalon tharjen e tyre dhe grumbullimin e produkteve të mbeturinave.

Çdo mostër e mbledhur në një mjedis të lëngshëm përzihet tërësisht me mjedisin.

4.2.2. Kur gjaku kultivohet në lëng mishi, atëherë pas marrjes së mostrës ruhet në një termostat në temperaturën 35-37 °C.

Nëse mostrat mblidhen në kontejnerë të veçantë për studime të mëvonshme me një medium dyfazor, ato duhet të ruhen në temperaturën e dhomës (18-20 ° C).

4.2.3. Kur mund të jenë të pranishëm mikroorganizma të varur nga temperatura (Neisseria sp.), mostrat lihen në temperaturën e dhomës (18-20 °C).

4.3. Për transportin e mostrave të ekzaminuara për praninë e aerobeve dhe anaerobeve fakultative, përdorni:

epruveta të thata sterile të disponueshme me një sondë të integruar (zhardhokët) ose kontejnerë me një mjet transporti të miratuar për përdorim për këto qëllime në Federatën Ruse në mënyrën e përcaktuar; lejohet përdorimi i tubave qelqi steril të mbyllur me një tapë të përshkueshme nga gazi me një sondë të integruar të shtupës të përgatitur në laborator;

kontejnerë sterile të disponueshme me kapak vidhos (lejohen qelqi me mbyllës të përshkueshëm nga gazi) - për mbledhjen e mostrave të urinës, pështymës, feces, lavazh bronko-alveolar, biopsi (copë indi);

sterile e disponueshme me kapak vidë ose epruveta qelqi - për mbledhjen e lëngjeve sterile, lavazh bronko-alveolare, të ndara nga drenazhet ose gërvishtjet;

enët sterile Petri - për mbledhjen e mostrave të flokëve ose për transportimin e gërvishtjeve me shenja në fund të enës;

sonda speciale sterile me shtupë nazofaringeale dhe urogjenitale me një bosht alumini (diametri i boshtit - 0,9 mm) dhe një shtupë e vogël pambuku ose viskoze në majë (diametri tamponi - 2,5 mm) të montuar në një tapë që mbyll një tub qelqi steril të disponueshëm - për mostrat nga nazofaringu për B. pertusis dhe nga uretra tek meshkujt.

4.4. Për transportin e mostrave të ekzaminuara për praninë e anaerobeve, përdoren kontejnerë me mjete të posaçme transporti dhe epruveta me mjedis tioglikoli; epruveta me media për izolimin e Campylobacter dhe Helicobacter, të miratuara për përdorim për këto qëllime në Federatën Ruse në mënyrën e përcaktuar. Mostra e mbledhur në një mjedis të lëngshëm përzihet tërësisht me të. Për marrjen e mostrave rekomandohen metodat e mëposhtme:

shkarkimi nga drenazhet që përdoren për aspirimin aktiv të kaviteteve aspirohet me një shiringë sterile me një pistoni të ngushtë në një vëllim 2-4 ml; një gjilpërë sterile vendoset në shiringën e mbushur, e mbyllur me një shtupë pambuku steril, ajri i tepërt hiqet nga shiringa; një shtupë pambuku hidhet në një zgjidhje dezinfektuese; fundi i gjilpërës injektohet në një tapë gome sterile dhe në këtë formë shiringa me materialin dorëzohet në laborator;

përmbajtja e vatrave të infeksionit dhe kaviteteve, të marra nga shpimi i tyre, mblidhet në një vëllim prej 2-4 ml duke përdorur shiringa 2-, 5-, 10 ml me një pistoni të ngushtë; ajri i tepërt hiqet nga shiringa duke e mbuluar gjilpërën me një shtupë pambuku steril, e cila më pas hidhet në një zgjidhje dezinfektuese; gjilpëra dezinfektohet duke fshirë me një shtupë të lagur me alkool etilik 70%; për mbyllje, fundi i gjilpërës injektohet në një tapë gome sterile dhe në këtë formë shiringa me materialin dërgohet në laborator.

Kur grumbullohet një vëllim i madh materiali (3 ml ose më shumë), bakteret anaerobe mund të qëndrojnë të qëndrueshme për 24 orë në temperaturën e dhomës (18-20 °C).

Nëse shkarkimi është vetëm disa pika, ai transferohet nga shiringa në një enë të vogël ose në një epruvetë me mjetin transportues menjëherë pas marrjes (kontejneri me mjetin transportues merret në laborator një ditë më parë).

Pjesët e indeve (materiali i biopsisë) në rast të dyshimit të infeksionit anaerobik mblidhen në enë sterile të disponueshme me kapak vidhash (lejohet - në një enë qelqi me kapak të bluar) dhe dërgohen menjëherë në laborator.

4.5. Për transportin e mostrave të ekzaminuara për praninë e viruseve, përdoren kontejnerë të veçantë me një medium të lëngshëm për të ruajtur viruset.

5. Mostrat e llojeve të ndryshme të biomaterialeve dhe mjedisit që rrethon pacientin

Tabela 1

Enë qelqi që përdoren për dërgimin e mostrave në laborator

Burimi dhe lloji i materialit klinik

Produktet e përdorura për dërgimin e mostrave

Kontejnerë të posaçëm transporti me medium, me neutralizues dhe reagentë antibiotikë që shkatërrojnë qelizat e gjakut, ose pa to, të miratuar për përdorim për këto qëllime në Federatën Ruse në mënyrën e përcaktuar; medium bifazik në shishe

sistemi nervor qendror

pije alkoolike

Provë sterile njëpërdorimshme me kapak me vidë; tuba qelqi steril me një tapë celuloze ose garzë pambuku

Material për absceset e trurit dhe material biopsi për proceset inflamatore në sistemin nervor qendror

Një shiringë me një gjilpërë të futur në një tapë gome sterile; epruvetë me medium tioglikoli, e mbyllur me tapë gome sterile; kontejnerë transporti me medium për ruajtjen e anaerobeve

Më e ulët Rrugët e frymëmarrjes

Materiali i biopsisë së mushkërive dhe trakesë; sputum i kollitur dhe i nxitur natyrshëm; kruarje nga bronket

Enë sterile e disponueshme me kapak me vidë (për mbledhjen e pështymës); Enë qelqi sterile e përgatitur në laborator

Aspirat trakeal, lavazh bronko-alveolare, larje bronkiale

Enë sterile e disponueshme për grumbullimin e pështymës me kapak të vidhosur; shishkë qelqi steril e mbyllur mirë

Aspironi transtrakeal dhe mushkëri

Kontejnerë të veçantë transporti me medium për anaerobe; një shiringë me një gjilpërë të futur në një tapë gome sterile; enë me medium tioglikoli; enë plastike njëpërdorimshme sterile me kapak me vidë; shishkë e mbyllur mirë

traktit të sipërm respirator

Tamponët nga hunda, faringu, nazofaringu, veshi i jashtëm

Një sondë sterile njëpërdorimshe e montuar në një epruvetë sterile të thatë (tubezer) ose një kontejner transporti me një mjet të përshtatshëm; anije transportuese për viruse; enë qelqi sterile të montuara në laborator

Larja e hundës, aspirata e nazofagut

Enë sterile e disponueshme me kapak me vidë; anije transportuese për viruse

Lëngu nga timpanocenteza, aspirimi i sinusit nga aspirimi me gjilpërë

Shiringë me gjilpërë e dezinfektuar pas manipulimit me një shtupë të lagur me 70% alkool etilik, dhe mbërthyer në një tapë gome sterile; është e mundur të transferohet materiali nga shiringa në një epruvetë sterile të disponueshme ose qelqi ose në një enë speciale me një mjet për transportimin e anaerobeve.

Indi i marrë gjatë operimit të hundës, faringut, veshit

Enë sterile e disponueshme me kapak me vidë; një epruvetë me tioglikol ose mjet tjetër transportues, të mbyllur fort me një tapë gome sterile; shishkë plastike e disponueshme ose qelqi e mbyllur fort sterile

Gërvishtje nga konjuktiva e cepit të syrit

Njoftime në rrëshqitëse qelqi sterile pa yndyrë; material që merret në një enë të veçantë transporti me një medium ose inokulohet në një mjedis ushqyes

lëngu intraokular

Njoftime në rrëshqitëse qelqi sterile pa yndyrë; materiali që futet në një enë të posaçme transporti me medium për anaerobe ose një shiringë me një gjilpërë të dezinfektuar më parë me etanol 70%, të ngulitur në një tapë gome sterile

Shkarkimi i marrë me një shufër qelqi steril ose një shtupë pambuku steril nga mukoza e palosjes së poshtme kalimtare, nga buza e qepallave, me ulçerë - nga kornea (pas anestezisë), me konjuktivit këndor - nga qoshet e qepallat

Një tub steril njëpërdorimësh ose qelqi me lëng sheqeri, në të cilin është montuar një sondë shtupë ose një shufër qelqi sterile që përdoret për marrjen e mostrës; kontejner i posaçëm i transportit me medium për viruse

Sekreti nga qesja lacrimal

Sonda me shtupë sterile njëpërdorimshme e montuar në një epruvetë sterile të thatë (tubezer) ose në një tub qelqi

sistemi gjenitourinar

Pjesa mesatare e urinës që rrjedh lirshëm; nga kanali ileal i përdorur për të krijuar një artificiale Vezika urinare; kateteri në pacientët e kujdesit intensiv. Shpëlarje nga fshikëza. Mostra e marrë gjatë kateterizimit bilateral uretral

Enë sterile e disponueshme për grumbullimin e urinës me kapak vidë ose tub steril njëpërdorimësh me kapak; ose një tub të veçantë për grumbullimin e urinës. Kur përdorni një tub qelqi steril me një tapë celuloze ose garzë pambuku, kini kujdes që të mos njomni tapën me materialin (vëllimi i mostrës 10-20 ml)

Mostra e marrë gjatë aspirimit suprapubik

Një shiringë sterile pa gjilpërë, e mbyllur me një tapë gome sterile; një shiringë sterile me një gjilpërë e dezinfektuar më parë me 70% alkool etilik dhe e ngulur në një tapë gome

Material nga organet gjenitale femërore

Lëngjet: amniotike, tubat fallopiane, Bartolin

Enë speciale transporti me medium për anaerobe; një shiringë pa gjilpërë, e mbyllur me një tapë gome sterile; shiringë me një gjilpërë e trajtuar me 70% alkool dhe e futur në një tapë gome sterile (vëllimi i mostrës 1-2 ml)

Mostrat nga kanali i qafës së mitrës, uretrës, vaginës

Sonda me shtupë sterile njëpërdorimshme e montuar në një epruvetë të thatë sterile (zhardhok) ose në një kontejner transporti me një mjet të veçantë; një sondë shtupë e montuar në një tapë celuloze ose garzë pambuku të një tubi qelqi steril.
Slide mikroskopi me shtupë të përgatitur për ekzaminimin e infeksioneve dhe viruseve seksualisht të transmetueshme bakteriale.
Tub me mjet transporti me qymyr aktiv për të ruajtur gonokokët për 48 orë ose më shumë

Mostrat e materialit nga endometriumi

Enë sterile e disponueshme me kapak me vidë ose epruvetë, ose enë transporti me mjedis anaerobik; enë qelqi sterile

Materiali i organit gjenital të jashtëm

Një shiringë sterile pa gjilpërë, e mbyllur me një tapë gome sterile; një rrëshqitje xhami me një njollë të mbuluar me një rrëshqitje mbuluese për të përcaktuar T. pallidum; sonda me shtupë e montuar në një tub steril të disponueshëm (tubezer) ose qelqi; një tub transporti i posaçëm me mjedis me qymyr aktiv për të ruajtur gonokokët dhe kontejnerë transportues për viruset dhe klamidia; shtupa në rrëshqitës xhami për të zbuluar infeksione të tjera seksualisht të transmetueshme

Material nga organet riprodhuese mashkullore

strishone nga uretra

Tampon-sondë në një bosht alumini (sondë-tampon uretral), i montuar në epruveta sterile të disponueshme (tubezer) ose qelqi;
tub i posaçëm transporti me mjedis me qymyr aktiv për të ruajtur gonokokët dhe enët e transportit për viruset dhe klamidia; shtupa në rrëshqitës xhami për të zbuluar infeksione të tjera seksualisht të transmetueshme

ejakuloj, spermë

Enë sterile e disponueshme me kapak me vidë; tub ose tub steril, i disponueshëm ose xhami

Materiali i epididymis në epididymitis

Enë speciale transporti me medium për anaerobe ose enë me medium tioglikoli; enë sterile e disponueshme me një kapak me vidë ose një tub qelqi steril me një tapë celuloze ose garzë pambuku

Dëmtimi i penisit

Një shiringë pa gjilpërë, e mbyllur me një tapë gome sterile; një rrëshqitje xhami me një njollë në T. pallidum, e mbuluar me një rrëshqitje mbulese; sonda me shtupë e montuar në një tub steril të disponueshëm (tubezer) ose qelqi; kontejnerë transporti për viruse dhe klamidia; tamponët për të zbuluar agjentë të tjerë të infeksioneve seksualisht të transmetueshme

Material për gonorre të dyshuar

Tampon nga anusi, kanali i qafës së mitrës, uretra, vagina

Një sondë shtupë e montuar në një tub steril të disponueshëm (tubezer) ose qelqi; tub transporti special me medium me qymyr aktiv për të ruajtur gonokokët për 48 orë ose më shumë

Trakti gastrointestinal

Kaviteti oral

Një sondë shtupë e montuar në një tub steril të disponueshëm (tubezer) ose qelqi; Enë sterile e disponueshme ose qelqi për mbledhjen e larjes nga zgavrën e gojës

Lavazh gastrik ose lëngje lavazhi; aspirat duodenale; mostra e marrë gjatë sigmoidoskopisë; materiali i biopsisë së rektumit

Enë sterile e disponueshme me kapak me vidë; një enë e veçantë sterile për mbledhjen e pështymës;
enë qelqi sterile; aspirate - në një shiringë sterile me një gjilpërë të dezinfektuar më parë dhe të mbërthyer në një tapë gome sterile

Tampon rektal

Sonda me shtupë sterile njëpërdorimshme e montuar në një provëz sterile të thatë (zhardhok); ose një tub steril me një mjet transporti të veçantë; sonda shtupe e bërë nga materiali inox, e montuar në një tapë celuloze ose garzë pambuku të një tubi qelqi steril

Feces për praninë infeksionet e zorrëve("disgrupi"), Helicobacter, Campylobacter

Provë sterile me shtupë në kripë me glicerinë; enë transporti me medium për anaerobe në kampionet fekale, me media speciale me dhe pa karbon aktiv për izolimin e Campylobacter sp. dhe Helicobacter sp.; sondë me shtupë në një epruvetë të thatë sterile të disponueshme (tubezer); një tub qelqi steril i montuar me një sondë shtupë në një tel metalik të bërë nga titani, çeliku, alumini.

Nuk lejohet përdorimi i tamponit me bosht druri

Feçe për praninë e dysbakteriozës sipas përbërjes gjenerike dhe specieve të mikrobeve ("për florën")

Enë speciale transporti me medium për anaerobet në ekzemplarët fekale, me dhe pa media speciale me dhe pa qymyr aktiv, për izolimin e Campylobacter sp. dhe Helicobacter sp., të miratuara për përdorim për këto qëllime në Federatën Ruse në mënyrën e përcaktuar; sondë shtupë në një shishkë me kripë me glicerinë në një shishkë sterile të disponueshme ose qelqi; një enë e veçantë sterile e disponueshme me një kapak me vidë; enë qelqi e montuar në laborator

Feçe për praninë e dysbakteriozës me një llogari sasiore të mikrobeve të izoluara dhe të identifikuara ("për dysbakteriozë")

Kontejnerë të posaçëm njëpërdorimësh sterilë me kapak vidë dhe shpatull për mbledhjen e materialit dhe marrjen e mostrave për inokulim, me peshë standarde; Enë qelqi special sterile e montuar në laborator

Lëkura dhe indi nënlëkuror

Ulçera, nyje (trashje nodulare), plagë të cekëta, sipërfaqësore (purulente; djegie); plagë të thella ose abscese, kocka

Kontejnerë të posaçëm sterile të disponueshme me kapak vidhosje; epruveta sterile me tapa njëpërdorimshe ose qelqi me vëllim 5 ml; kontejnerë me media speciale për anaerobe

Eksudat i indeve nënlëkurore dhe të buta; aspirimi i indeve të buta

Një shiringë sterile pa gjilpërë, e mbyllur me një tapë gome sterile; një shiringë me një gjilpërë të dezinfektuar më parë me 70% alkool etilik dhe të ngulur në një tapë gome

Lëngje trupore sterile, duke përjashtuar gjakun, lëngun cerebrospinal, urinën (shih më lart)

Lëngjet

Pleurale, peritoneale, ascitike, artikulare, sinoviale

Enë sterile e disponueshme me kapak me vidë; një shiringë e mbyllur pa gjilpërë ose me një gjilpërë të dekontaminuar më parë me alkool etilik 70% dhe të mbërthyer në një tapë gome sterile

Biomaterial për diagnostikimin e PCR

gjaku; lëngje të tjera të trupit

Teste epruveta sterile të disponueshme me një mbyllës prej 1.5 ml me një antikoagulant. Tubi përmbyset 3-5 herë për të përzier kampionin me antikoagulantin. Dorëzimi në laborator - në një raft të bërë nga materiale për t'u sterilizuar në një autoklavë

Materiali për biopsi; gërvishtje; sputum dhe lloje të tjera të biomaterialeve

Tuba sterile të thata njëpërdorimshe të tipit "Eppendorf" dhe të tjera të ngjashme. Dorëzimi në laborator - në një raft të veçantë të bërë nga materiale për t'u sterilizuar në një autoklavë

Mostrat e mjedisit që rrethon pacientin

Ajri

Enët sterile Petri të disponueshme (=90 mm) ose qelqi (=100 mm) me lëndë ushqyese të dendura. Dorëzimi në laborator në kontejnerë të veçantë transportues

Larje nga objektet e mjedisit që rrethon pacientin

Mostrat për përcaktimin e sterilitetit

Gjaku dhe përbërësit e gjakut nga departamenti që i mbledh ato

Kontejnerët me material të përgatitur dorëzohen në laborator në kontejnerë të veçantë transportues.

Larje nga instrumentet mjekësore, zorrët e pajisjeve të përdorura në departamentet e reanimacionit dhe anestezisë, si dhe në dhomat e operacionit; duart e personelit mjekësor; të brendshme

Sonda sterile me shtupë të montuara në provëza transparente me një mjedis të lëngshëm transparent pa ngjyrë.
Mostrat dorëzohen në laborator në rafte të bëra nga materiale për t'u sterilizuar në një autoklave.

Materiali kirurgjik: tampona, peceta, turunda, shtupë pambuku në një bosht druri

Provë sterile transparente me tapa, me një mjedis të lëngshëm transparent pa ngjyrë me 3-5 rruaza qelqi sterile.
Mostrat dorëzohen në laborator në rafte të bëra nga materiale për t'u sterilizuar në një autoklave.

Materiali i qepjes: catgut i ruajtur në sallën e operacionit në një tretësirë ​​alkoolike të jodit

Provë sterile (shishe me tapë) me tretësirë ​​neutralizuese (hiposulfit natriumi)

Mëndafshi, kapron, fije sintetike monomerike të ruajtura në sallën e operacionit në një tretësirë ​​alkooli

Tub steril i mbyllur me ujë të distiluar steril si lëng shpëlarës.
Mostrat e materialit të qepjes dorëzohen në laborator në rafte për t'u sterilizuar në një autoklave.

Larje nga fusha operative e pacientit

Përpara përpunimit të fushës: në epruveta transparente të mbushura me një lëndë ushqyese të lëngshme transparente.
Pas përpunimit të fushës: një epruvetë sterile (shishe me tapë) me një tretësirë ​​neutralizuese (hiposulfit natriumi).
Dorëzimi i materialit në laborator kryhet në rafte për t'u sterilizuar në një autoklavë.

Mostrat për përcaktimin e faktorëve imunologjikë të sistemit të mbrojtjes antiinfektive
(sistemi i rezistencës anti-infektive të trupit - SAIR)

Gjaku dhe lëngjet e tjera të trupit për të përcaktuar faktorët mbrojtës humoralë

Shiringa njëpërdorimshe me epruvetë (vakutainer); epruveta sterile të disponueshme me kapak me vidë; tuba qelqi steril me kapëse gome sterile, celulozë ose garzë pambuku. Mostrat dorëzohen në laborator në një raft të posaçëm të bërë nga materiale për t'u sterilizuar në një autoklavë.
Kur përdorni epruveta qelqi me kapëse garzë pambuku - mos i lagni gjatë transportit

Gjaku dhe lëngjet e tjera të trupit për të përcaktuar faktorët mbrojtës qelizor

Provë sterile njëpërdorimshme me kapak me vidë; tuba qelqi steril të mbyllur fort me një tapë gome sterile. Testet e njëpërdorshme me antikoagulant për t'u centrifuguar. Dorëzimi në laborator kryhet në një raft të posaçëm të bërë nga materiale për t'u sterilizuar në një autoklavë.

Pap testet për antigjenet bakteriale dhe virale (për shembull, nëse dyshohet për infeksione seksualisht të transmetueshme)

Xhami steril pa yndyrë; për T. pallidum, rrëshqitja e xhamit duhet të mbulohet me një mbulesë. Dorëzimi në laborator kryhet në një enë të disponueshme ose enë sterile të disponueshme ose qelqi Petri në enë speciale.

Shënim. Mostrat e qelbit, lëngjeve dhe indeve duhet të dorëzohen në laborator në enë të posaçme sterile të disponueshme me kapak vidhash. Sondat me shtupë - thahen në epruveta sterile të disponueshme (zhardhokët) ose në kontejnerë me një mjet transporti, nëse materiali nuk mund të dorëzohet në laborator menjëherë pas marrjes së mostrës. Për këto qëllime, mund të përdorni mjete transporti, përfshirë. në epruveta të disponueshme të paketuara së bashku me një sondë sterile tampon, të miratuar për përdorim në Federatën Ruse në mënyrën e përcaktuar. Sonda-tamponët prodhohen (përgatiten) duke përdorur një sërë materialesh: për vetë tamponin (garzë pambuku, pambuk, fije mëndafshi, Dacron), për boshtin e sondës-tampon (dru, plastikë, metal inox - titan, çelik, alumini) dhe agar i dendur: me dhe pa karbon për anaerobet.


Shumë anaerobe klinikisht të rëndësishme, të tilla si Clostridium perfringens, Bacteroides fragilis, janë mjaftueshëm tolerantë ndaj pranisë së oksigjenit dhe ruhen mirë në një sasi të madhe qelb, mostra lëngu dhe inde trupore, si dhe në një sondë me shtupë në transport të veçantë ose tioglikoli. mediat.

Më të ndjeshme ndaj oksigjenit (për shembull, fusobakteret) janë gjithashtu të ruajtura mirë në një mostër të materialit biologjik, dhe nëse materiali mbillet brenda 2-3 orëve nga momenti i mbledhjes së tij, atëherë nuk kërkohet vëmendje e veçantë për mënyrën e shpërndarjes. . Anaerobet që kërkojnë kushte të veçanta kultivimi nuk mbijetojnë në një sondë me shtupë në një enë transporti me një mjedis që nuk është i destinuar për dërgimin e anaerobeve, me përjashtim të kontejnerëve me mjete transporti speciale ose tioglikol.

Në të njëjtën kohë, këta mikroorganizma rriten 5-7 ditë më shumë se koha gjatë së cilës shumica e laboratorëve praktik inkubojnë enët e inokuluara me material për izolimin dhe identifikimin e aerobeve dhe anaerobeve fakultative. Për këtë arsye, testimi rutinë për praninë e anaerobeve duke përdorur kontejnerë të posaçëm anaerobe transporti me media duket i papërshtatshëm në laboratorët e zakonshëm praktik dhe mund të kufizohet në epruveta me medium tioglikoli.

Për mbledhjen dhe transportin e mostrave, përdoren media, kontejnerë, mjete dhe materiale që janë miratuar për përdorim në Federatën Ruse në mënyrën e përcaktuar.

6. Rregullat dhe teknikat për marrjen e mostrave të llojeve të ndryshme të materialit biologjik për kërkime mikrobiologjike

Marrja e çdo kampioni nga një pacient që kërkon përdorimin e metodave invazive rekomandohet të bëhet nga mjeku (me përjashtim të mostrës së gjakut që mund të merret nga një infermiere procedurale).

Nëse është e nevojshme të mblidhet materiali duke përdorur një sondë tampon në një sipërfaqe të hapur operative ose në rast të ndërhyrjeve të tjera invazive, lejohet përdorimi i sondave të gatshme me shtupë me një nivel ndërkombëtar sigurie të paktën të klasës IIA, të miratuara për përdorim për këto qëllimet në Federatën Ruse në mënyrën e përcaktuar.

6.1. mostrat e gjakut

Mostrat për të përcaktuar praninë e agjentëve biologjikë në gjak (bakteremia, viremia etj.) merren me venipunkturë të venave periferike (shpesh vena e bërrylit), arterieve ose nga thembra te të porsalindurit.

Marrja e mostrave nga kateterët intravenoz ose intra-arterial lejohet vetëm në rastet e dyshimit për infeksion të lidhur me kateterin ose pamundësi për ta marrë atë me venipunkturë.

6.1.1. Në sepsën akute, meningjitin, osteomielitin, artritin, pneumoninë bakteriale akute të patrajtuar dhe pielonefritin, 2 mostra mblidhen nga dy enë ose dy seksione të një ene gjaku përpara se të fillohet terapia me antibiotikë.

6.1.2. Nëse dyshoni për praninë e endokarditit dhe sepsës së ngadaltë me një përqendrim të vogël (10-30 CFU / ml) të patogjenit në qarkullim:

në prani të një procesi akut, 2 mostra merren nga dy seksione të enëve (enë të ndryshme) gjatë 1-2 orëve të para të rritjes së temperaturës së trupit (jo në kulmin e temperaturës!) dhe para fillimit të terapisë. ;

në rrjedhën subakut ose të ngadaltë, 3 mostra mblidhen ditën e parë me një interval prej 15 minutash ose më shumë. Nëse të gjitha mostrat janë negative, në ditën e dytë pas mbjelljes, mblidhen edhe 3 të tjera;

në pacientët me endokardit që marrin antibiotikë, mblidhen 2 mostra të veçanta në secilën prej tre ditëve me një dinamikë pozitive klinike të terapisë;

për të konfirmuar diagnozën klinike të "endokarditit infektiv", nëse është e pamundur të merret numri i kërkuar i mostrave të gjakut nga pacienti për analiza mikrobiologjike ose nëse kulturat janë negative, mostrat e gjakut dërgohen për studimin e faktorëve imunologjikë të sistemit mbrojtës të trupit. (sistemi i rezistencës kundër infeksionit - SAIR); dorëzimi në laborator kryhet në xham steril ose epruveta të disponueshme me kapak (tapë), të marra një ditë më parë në laborator;

nëse një pacient vuan nga sëmundje kongjenitale të zemrës (CHD), duhet të mbahet mend se CHD është një prodromë e endokarditit infektiv dhe përcaktimi i faktorëve imunologjikë të CAD përfshihet në algoritmin e ekzaminimit për një pacient të tillë.

6.1.3. Te pacientët, terapia e të cilëve përfshin antibiotikë, mblidhen 6 mostra brenda 48 orëve; mostrat duhet të mblidhen menjëherë përpara se të administrohet (merret) doza tjetër e barit.

6.1.4. Nëse pacienti ka ethe me origjinë të panjohur, fillimisht merren 2 mostra nga enë të ndryshme gjaku (dy seksione të enës), pastaj pas 24-36 orësh, 2 mostra të tjera në sfondin e rritjes së temperaturës së trupit (jo në kulmi i temperaturës!).

6.1.5. Teknika për marrjen e mostrës së gjakut. Mbledhja e mostrave të gjakut për kulturë kryhet nga 2 persona pranë shtratit të pacientit ose në dhomën e trajtimit.

Për të marrë një mostër, bëni sa më poshtë:

dezinfektoni zonën e lëkurës mbi enën e zgjedhur për shpim: trajtojeni lëkurën me një shtupë të lagur me alkool etilik 70%, pastaj me një shtupë tjetër të lagur me tretësirë ​​jodi 1-2% ose një dezinfektues tjetër të miratuar për përdorim për këto qëllime në mënyrën e përcaktuar; me lëvizje rrethore, duke filluar nga qendra, brenda 30 s;

prisni derisa zona e trajtuar të thahet. Nuk lejohet palpimi i enës pas trajtimit të lëkurës përpara futjes së gjilpërës;

kur punoni me shishe me një medium të dyfishtë: me një shiringë sterile, mblidhni 10 ml gjak nga të rriturit, nga fëmijët - 5 ml; hapni shishkën mbi flakën e llambës shpirtërore; injektoni gjak në shishkë nga shiringa, pasi të keni hequr gjilpërën; djeg qafën dhe tapën e shishkës në flakën e një llambë alkooli, mbylleni shishkën me një tapë; me kujdes, në mënyrë që të mos njomni tapën e shishkës, përzieni përmbajtjen e tij me lëvizje rrethore.

Kur përdorni shishe të gatshme me një medium dhe reagentë që neutralizojnë antibiotikët dhe shkatërrojnë qelizat e gjakut, ose pa to, të miratuara për përdorim për këto qëllime në Federatën Ruse në mënyrën e përcaktuar, të rriturit marrin 10-30 ml gjak, fëmijët - 0,5 - 3,0 ml.

ku:

paralelisht me dezinfektimin e zonës së lëkurës për shpim, kapakët e shisheve trajtohen me alkool etilik 70% (tretësira e jodit nuk lejohet të përdoret për trajtimin e tapave kur punoni me shishe, për shembull, Bactec, Vital dhe të tjera të ngjashme të miratuara për përdorim për këto qëllime në Federatën Ruse në rendin e vendosur);

gjaku i marrë nga të rriturit, në vëllime të barabarta, gjatë shpimit të tapës së enës, futet në enët "aerobe" dhe "anaerobe"; gjaku i marrë nga fëmijët - në një shishe të veçantë "bebe", ndërsa shpohet tapa e enës.

6.1.6. Pas venipunkturës dhe kultivimit të gjakut në një enë me një medium për të parandaluar acarimin (djegien) e mundshme, mbetjet e jodit hiqen nga zona e lëkurës së pacientit me një shtupë të lagur me alkool etilik 70%.

6.2. Testet për proceset infektive dhe inflamatore të sistemit nervor qendror (CNS)

6.2.1. pije alkoolike. 4,0-5,5 ml lëng cerebrospinal i marrë me punksion lumbal nga hapësira subaraknoidale midis rruazave L3-L4, L4-L5 ose L5-S1, si dhe nga shpimi i barkusheve anësore të trurit, dërgohet për kërkime në laboratorin mikrobiologjik. .

Grumbullimi i mostrave kryhet duke mbushur ngadalë tre epruveta me tre pjesë të materialit për kërkime në laboratorë. Përdorni epruveta sterile me kapak të shtrënguar (të disponueshëm me tapë ose gotë me tapë gome sterile).

Nga tre tubat e shpimit lumbal, dërgoni gjithmonë tubin me përmbajtjen më të turbullt, zakonisht tubin e dytë në procesin e grumbullimit.

Pas marrjes së materialit me shpim të barkusheve anësore të trurit, lëngu cerebrospinal i sapo marrë nga shiringa, pasi ka hequr më parë gjilpërën, futet në një provëz sterile mbi flakën e një llambë alkooli, në qafën e epruvetës. dhe tapa digjen në flakën e një llambë alkooli (kur punoni me një provëz qelqi të mbyllur me garzë pambuku ose tapa gome), tub mbyllës.

Në të gjitha rastet e dyshuara për meningjit, përveç lëngut cerebrospinal, materiali mblidhet edhe nga vatra të supozuara të infeksionit: tamponët nga nazofaringu, veshi i mesëm, mostrat e gjakut dhe dërgohen në laborator bashkë me lëngun cerebrospinal. ne nje rruge te mire ruajtja afatgjatë (deri në 48 orë) e meningokokut është marrja e materialit me sondë-tampon njollosje dhe vendosja e tij në një provëz me një mjet transporti me ose pa qymyr aktiv.

Likueri për kërkime mikrobiologjike dërgohet menjëherë në laborator në një jastëk ngrohjeje për të mbajtur një temperaturë prej 35-37 °C. Nëse kjo nuk është e mundur, lëngu cerebrospinal mblidhet në një enë me një mjet transporti dhe lihet në frigorifer (në një temperaturë prej 4-8 ° C) deri në mëngjes, dhe më pas dorëzohet në laborator.

Nëse është e nevojshme të kryhen studime virologjike, mostrat e CSF vendosen në frigorifer në një temperaturë 2-8 ° C ose të ngrira, ose ruhen në temperaturën e dhomës duke përdorur enë me një medium të veçantë të lëngshëm.

6.2.2. Materiali nga absceset e trurit. Duke pasur parasysh se në 90% të rasteve anaerobet rriten në mostër, materiali aspirohet nga fokusi dhe dërgohet në laborator në kontejnerë me një mjedis anaerobik të miratuar për përdorim për këto qëllime në Federatën Ruse në mënyrën e përcaktuar, ose në një shiringë. me të cilën është mbledhur kampioni, pasi hiqet gjilpëra dhe mbyllet shiringa me një tapë gome sterile.

Mostra dorëzohet menjëherë pas marrjes.

6.2.3. materiali i biopsisë. Mostrat merren gjatë operimit, vendosen në një enë me një mjedis anaerobik ose në një provëz sterile me një mjedis tioglikoli, të mbyllur me një tapë gome sterile.

Materiali dërgohet menjëherë në laborator.

6.3. Testet për proceset infektive dhe inflamatore të syve

Shumica e mostrave të syve mblidhen nga një okulist. Këto mostra duhet të inokulohen në mjedise ushqyese në shtratin e pacientit ose në dhomën e trajtimit ose në zyrën e mjekut në momentin e pranimit, dhe materiali i inokuluar duhet të transferohet në laborator për kultivim, izolim, identifikim dhe përcaktim të ndjeshmërisë ndaj antibiotikëve. patogjene. Mostrat e marra duke përdorur metoda invazive dhe të tjera agresive mblidhen paralelisht me një shtupë konjuktivale, e cila në raste të tilla shërben si kontroll.

Një ditë më parë, për 6-8 orë (natë), anuloni të gjitha medikamentet dhe procedurat.

Në prani të manifestimeve klinike specifike të një procesi infektiv-inflamator ose dyshimeve që ka mjeku, është e domosdoshme që para anestezisë të përgatiten strisho për të përcaktuar klamidia dhe viruset dhe barnat të dërgohen në laborator. Për të ruajtur klamidia dhe viruset, materiali mblidhet në kontejnerë me mjete transporti.

Shkarkimi mblidhet me një shufër qelqi sterile ose një sondë-tampon steril: dy ose tre lëvizje kryhen përgjatë mukozës së palosjes së poshtme kalimtare, nga buza e qepallave; me një ulçerë - nga kornea (pas anestezisë), me "konjuktivit këndor" - nga qoshet e qepallave.

Sekreti nga qesja lacrimal mblidhet me një sondë sterile me shtupë pas masazhit të butë.

Materiali i marrë me shkop dhe/ose sondë me shtupë vendoset në një enë me një mjet transporti ose në një tub qelqi steril me një mjedis të lëngshëm dhe dorëzohet në laborator, duke u kujdesur që të mos njomet tapa me celulozë ose garzë pambuku të tub.

Kur përdorni sonda me shtupë, preferohet përdorimi i kontejnerëve njëpërdorimësh me një mjet transporti ose tuba qelqi steril me tapa garzë pambuku të mbushura me një mjedis steril.

Informacioni më i saktë në lidhje me agjentin shkaktar të procesit inflamator mund të merret nga analiza mikrobiologjike e gërvishtjeve.

6.3.1. Konjuktiviti dhe blefarokonjuktiviti. Një ditë më parë, për 6-8 orë (natë), të gjitha medikamentet dhe procedurat anulohen te pacientët në spital.

Mostrat nga konjuktiva mblidhen duke përdorur një tampon steril, të lagur paraprakisht me viskozë ose alginat kalciumi, të vendosur në një tub steril të disponueshëm ose tub qelqi. Mostrat nga secili sy mblidhen me tampone të veçanta me dy ose tre lëvizje rrethore mbi mukozën.

Zhardhokët me shtupë nga secili sy shënojnë përkatësisht "djathtas" dhe "majtas", dhe menjëherë dërguar në laborator.

Para gërvishtjes, injektohen 1-2 pika të një anestezi, për shembull, hidroklorur proparakaine ose një tjetër që është në dispozicion dhe miratuar për përdorim për këto qëllime në mënyrën e përcaktuar.

Me dy ose tre lëvizje të shkurtra të mprehta në një drejtim, gërvishtjet nga konjuktiva mblidhen duke përdorur një shpatull të veçantë sterile. Gjatë manipulimit, syri duhet të jetë i hapur.

Gjatë marrjes së mostrës duhet pasur kujdes që të mos preken qerpikët.

Përgatitni të paktën 2 njolla nga secili sy duke e aplikuar materialin në një rrëshqitje qelqi të pastër dhe të kulluar me lëvizje rrethore mbi një sipërfaqe prej 1 cm në diametër.

Njollat ​​fiksohen për 5 minuta në alkool metil 95%, i cili ndodhet në një enë të veçantë, të mbyllur fort.

Menjëherë epruvetat me sonda me shtupë dhe syzet me njolla transferohen në laborator.

6.3.2. keratiti bakterial. Një ditë më parë, për 6-8 orë (natë), të gjitha medikamentet dhe procedurat anulohen te pacientët në spital.

Merrni 2 mostra nga konjuktiva siç përshkruhet në 6.3.1, sepse rezultatet e kulturës mund të jenë të dobishme në përcaktimin e burimit të kontaminimit të kornesë (një mostër përdoret nëse dyshohet për një infeksion fungal).

Nëse dyshohet për një infeksion viral, eksudati konjuktival dhe materiali i përftuar me gërvishtje vendosen në një mjet të posaçëm transportues për viruset.

Anestezia kryhet, siç tregohet në pikën 6.3.1.

Mblidhni 3-5 gërvishtje me metodën e përshkruar në paragrafin 6.3.1.

Materiali i mbledhur vendoset në një tub të vogël (5 ml) steril njëpërdorimësh me kapak të vidhosur ose në një tub qelqi steril me tapë gome, të mbushur me medium.

Përgatitni 2-3 njolla në një rrëshqitës xhami dhe pas tharjes, rregulloni ato siç përshkruhet në paragrafin 6.3.1.

Menjëherë i gjithë materiali dërgohet në laborator.

6.3.3. Endoftalmiti bakterial. mostër e lëngshme trup qelqor(1-2 ml) mblidhet me aspirim me gjilpërë të imët dhe merret mostra gjatë vitrektomisë.

Tjetra, bëni sa më poshtë:

Pas heqjes së gjilpërës nga shiringa, përmbajtja vendoset në një enë sterile të disponueshme me kapak vidë ose një provëz të mbyllur fort me një tapë gome;

një mostër e materialit mund të lihet në shiringë, duke hequr ajrin dhe duke hequr gjilpërën, mbyllni shiringën me një tapë gome sterile;

të mbledhë një mostër nga konjuktiva, siç përshkruhet në paragrafin 6.3.1;

të gjitha materialet menjëherë dërguar në laborator.

6.3.4. Celuliti preseptal. Lëkura trajtohet me 70% alkool etilik dhe 1-2% tretësirë ​​jodi ose jodoform ose dezinfektues tjetër të disponueshëm të miratuar për përdorim në mënyrën e përcaktuar.

Në mungesë të një plage të hapur, qepalla e sipërme ose e poshtme shpohet për të mbledhur materialin.

Në prani të një plage të hapur, një mostër e materialit purulent mblidhet me një shiringë me një gjilpërë.

Përgatitni njollat ​​në një rrëshqitës xhami siç përshkruhet në paragrafin 6.3.1.

Materiali i mbledhur transferohet në një enë transporti me media për anaerobe ose duke e lënë në një shiringë, e cila pasi të hiqet ajri prej saj dhe të hiqet gjilpëra mbyllet me një tapë.

Materiali i mbledhur dhe njolla menjëherë dërguar në laborator.

6.3.5. Celuliti orbital. Mblidhni aspiratin nga zona sipas metodës së përshkruar më parë në paragrafin 6.3.2.

Mblidhni një mostër nga konjuktiva dhe përgatitni njolla në një rrëshqitës xhami, si në paragrafin 6.3.1.

Për dërgimin në laborator, përdorni materialet e përshkruara në pikën 6.3.3.

Mblidhni mostrat e gjakut nga pacienti sipas metodës së përshkruar në paragrafin 6.1. Mostrat e gjakut, i gjithë materiali i mbledhur transferohet në laborator.

6.3.6. Inflamacion i gjëndrës lacrimal (dacryadenitis).

Përmbajtja purulente mblidhet duke përdorur një sondë me shtupë, si në paragrafin 6.3.1.

Mos përdorni metodën e aspirimit me gjilpërë, në mënyrë që të mos prishni integritetin e gjëndrës lacrimal.

Sonda e shtupës dhe rrëshqitjet e xhamit me njolla transferohen në laborator.

6.3.7. Inflamacion i qeses lacrimal (dacryocystitis). Merrni një mostër nga konjuktiva, si në paragrafin 6.3.1.

Masazhoni dhe shtypni qesen lacrimal për të marrë një mostër eksudati për kultivimin dhe përgatitjen e njollave, ose, duke përdorur një metodë tjetër, mblidhni eksudatin me një shiringë dhe gjilpërë.

Vendoseni kampionin e mbledhur të eksudatit në kontejnerë transporti siç përshkruhet më parë dhe dorëzojeni në laborator.

6.3.8. Kanalikuliti. Shtypni pjesën e brendshme të qepallës për të marrë qelb.

Puna e mëtejshme kryhet sipas metodave të përshkruara më parë në këtë seksion.

Nëse ka një departament (klinik) të specializuar në organizatën mjekësore dhe parandaluese, të gjitha të korrat bëhen në shtratin e pacientit në media ushqyese të marra në laborator. Materiali i inokuluar së bashku me strishet e përgatitura transferohet në laborator.

6.4. Testet për proceset infektive dhe inflamatore të veshit

6.4.1. Në rast të dëmtimit të veshit të jashtëm, lëkura trajtohet me alkool 70% dhe më pas lahet me kripë sterile. Shkarkimet nga fokusi mblidhen në një shtupë sterile një sondë njëpërdorimshe të një zhardhok ose epruveta me një mjet transporti, ose në një shtupë të montuar në një tub qelqi steril, të mbyllur me një tapë, me ose pa një medium të veçantë. Tamponi vendoset në një epruvetë dhe dorëzohet në laborator.

6.4.2. Në rast të dëmtimit të veshit të mesëm dhe të brendshëm, mblidhen pikat e pikave dhe materiale të tjera të marra gjatë operacionit. Pikat e pikave dorëzohen në laborator në një shiringë të mbyllur me ajër të hequr më parë. Mostrat e indeve - në një enë transporti me medium anaerobik të miratuar për përdorim për këto qëllime në Federatën Ruse në përputhje me procedurën e vendosur, ose në një enë sterile të disponueshme me një kapak me vidë. Është e mundur të përdoret një tub qelqi steril i mbyllur me një tapë gome sterile.

6.4.3. Tympanocenteza e membranës timpanike kryhet për diagnozën mikrobiologjike të infeksioneve të veshit të mesëm vetëm në rastet kur pacienti nuk i përgjigjet terapisë së mëparshme ose me otitis katarral torpid edhe në mungesë të eksudatit në gjakun e dalë (mbjellja nga nazofaringu është pozitive në më pak se 90% të rasteve).

Për të marrë një mostër, kanali i jashtëm pastrohet me një shtupë të lagur me 70% etanol, e ndjekur nga trajtimi me solucion fiziologjik steril.

Me një shiringë, lëngu mblidhet nga zgavra timpanike. Mostra dorëzohet në laborator në një enë sterile të disponueshme me kapak me vidë ose në një shiringë të mbyllur me ajër të hequr më parë.

Nëse daullja e veshit është e dëmtuar, materiali mblidhet me një sondë me shtupë duke përdorur një pasqyrë. Tampona vendoset në një provëz sterile të disponueshme (zhardhok) ose në një enë me një mjet transporti (lejohet të përdoret një tub qelqi steril me ose pa medium) dhe dorëzohet në laborator në këtë formë.

6.5. Testet për proceset infektive dhe inflamatore të traktit respirator

6.5.1. traktit të sipërm respirator. Nëse një pacient dyshohet se ka difteri, kollë të mirë, klamidia, mikoplazmozë, legjionelozë, gonorre, punonjësit e laboratorit informohen para dorëzimit të mostrës në mënyrë që të përgatiten për analizën e këtij lloji të materialit.

6.5.1.1. Një mostër nga mukozat e pjesëve të përparme të zgavrës së hundës mblidhet me një sondë sterile me shtupë të montuar në një tub steril të disponueshëm (tubezer) ose të montuar posaçërisht në një tub qelqi steril:

hiqni tampon nga provëza, futeni në vrimën e djathtë të hundës dhe rrotulloni materialin nga krahët e hundës dhe këndi i sipërm i hapjes së hundës;

përsëritni manipulimin për hundën e majtë;

tamponi vendoset në një epruvetë dhe dorëzohet në laborator.

Mostrat e marra në këtë mënyrë janë të dobishme për përcaktimin e transportit të Staphylococcus aureus te punonjësit mjekësorë, praninë e patogjenëve të infeksionit spitalor, si dhe për karakterizimin e çrregullimeve disbiotike të mukozave të traktit të sipërm respirator gjatë një ekzaminimi gjithëpërfshirës klinik dhe imunomikrobiologjik të pacientëve. të kryera në laboratorë shkencorë dhe praktikë.

Nëse ka vatra inflamacioni ose ulçerimi në zgavrën e hundës, përdoret një shtupë e veçantë për të mbledhur materialin nga vatrat (vatrat).

6.5.1.2. Aspiratet nga nazofaringu mblidhen për të përcaktuar transportin e streptokokut piogjen, meningokokut, patogjenëve të difterisë dhe kollës së mirë, si dhe gjatë kryerjes së studimeve epidemiologjike të rezistencës antimikrobike të S. pneumoniae dhe H. influenzae:

material thithës nga nazofaringu;

transferojeni materialin në një enë sterile të disponueshme me kapak vidhash ose në një tub të posaçëm steril me një tapë celuloze të përshkueshme nga gazi ose garzë pambuku, duke pasur kujdes që të mos e njomni me një mostër të materialit klinik.

6.5.1.3. Një njollë nga nazofaringu. Materiali është mbledhur për të përcaktuar bartjen e meningokokut dhe diagnozën e kollës së mirë.

Me kujdes me lëvizje rrotulluese përgjatë pasazhit të poshtëm të hundës, një tampon sondë pambuku, viskoze ose alginate kalciumi futet në mënyrë alternative në nazofaringë në nazofaringë. Në të njëjtën kohë, krahët e hundës shtypen kundër shtupës dhe septumit të hundës për kontakt më të ngushtë me membranën mukoze.

Tamponi vendoset në një tub steril dhe dorëzohet në laborator.

6.5.1.4. Larja e hundës përdoret për të përcaktuar praninë jo vetëm të një infeksioni bakterial, por edhe të një infeksioni kryesisht viral.

Paralajmëroni pacientin që të mos gëlltisë gjatë procedurës.

Koka e pacientit vendoset në një pozicion lart në një kënd prej afërsisht 70°, 5 ml kripë sterile injektohet në secilën vrimë të hundës, pacienti duhet të jetë në këtë pozicion për 3-5 sekonda.

Për të mbledhur materialin, koka e pacientit ulet përpara në mënyrë që lëngu të derdhet nga vrimat e hundës në një enë sterile të disponueshme ose lëngu të aspirohet duke futur një drenazh gome në secilën vrimë të hundës.

Vendosni një vëllim të barabartë larjeje në një enë me mjet transporti virusi ose dorëzojeni këtë pjesë në një enë sterile të disponueshme.

6.5.1.5. Punksioni i sinusit. Duke përdorur një teknikë aspirimi me shiringë, një mjek me përvojë ose otolaringolog i trajnuar posaçërisht merr material nga sinuset ballore nofulla ose nga sinuset e tjera. Përmbajtja e shiringës vendoset në një enë me një mjet transporti për anaerobet ose në një tub steril me një medium tioglikoli. Mund ta lini materialin në shiringë dhe pasi ta mbyllni me një tapë gome sterile, ta dorëzoni në laborator.

6.5.1.6. Marrja e një kampioni nga mukoza e faringut (faringu).

Nuk lejohet mbledhja e materialit nga faringu (faringu) me epiglotis të përflakur, pasi procedura mund të çojë në obstruksion të rëndë të frymëmarrjes.

Kur merrni mostra nga mukoza e faringut (faringu), mos prekni faqet mukoze, gjuhën, mishrat, buzët me një shtupë dhe mos mblidhni pështymë, pasi ky material karakterizon mukozën e zgavrës me gojë, d.m.th. , traktin e sipërm gastrointestinal.

Një shtupë nga faringu (faringu) mblidhet në stomak bosh ose 3-4 orë pas ngrënies. Para marrjes së mostrës, pacienti duhet të shpëlajë gojën me ujë të ngrohtë të zier.

Për të marrë një mostër, përdoret një shpatull ose shtupë sterile: një shtupë viskoze hiqet nga një epruvetë sterile e disponueshme (tubezer) ose përdoret një shtupë e përgatitur në laborator, e montuar në një provëz qelqi steril. Preferohet përdorimi i sondës me shtupë me kokë viskoze sepse viskoza thith më pak material të lëngshëm dhe më shumë qelizor.

Me njërën dorë, gjuha e pacientit shtypet me një shpatull sterile.

Materiali mblidhet me dorën tjetër duke trajtuar në mënyrë alternative bajametin e djathtë, harkun e djathtë të palatinës, bajametin e majtë, harkun e majtë të palatinës, uvulën me tampon, në nivelin e uvulës preket muri i pasmë i faringut. një tampon.

Mostrat e marra në këtë mënyrë janë të dobishme për përcaktimin e pranisë së një agjenti shkaktar të infeksionit spitalor, si dhe për karakterizimin e çrregullimeve disbiotike të mukozave të traktit të sipërm respirator gjatë një ekzaminimi gjithëpërfshirës klinik dhe imunomikrobiologjik të pacientëve të kryer në laboratorë shkencorë dhe praktikë. .

Në prani të vatrave të inflamacionit ose ulçerimit në mukozë, ata janë veçanërisht të vëmendshëm ndaj mbledhjes së mostrave dhe gjithashtu mbledhin material nga vatrat (vatrat) me një shtupë të veçantë.

Tampona vendoset në një tub steril të disponueshëm ose qelqi dhe dorëzohet në laborator.

6.5.1.7. Nëse dyshohet për difterinë, informohen punonjësit e laboratorit, duke treguar diagnozën në referim.

Në rastet e një procesi patologjik respirator, materiali mblidhet njëkohësisht nga mukozat e nazofaringit dhe faringut sipas metodave të paraqitura më parë.

Nëse dyshohet për një formë kutane të difterisë, materiali mblidhet nga lëkura, si dhe nga mukozat e faringut (faringut) dhe nazofaringit, dhe të gjitha mostrat dërgohen në laborator.

6.5.2. traktit të poshtëm të frymëmarrjes. Diagnostifikimi mikrobiologjik proceset inflamatore në rrugët e poshtme të frymëmarrjes paraqet vështirësi serioze, tk. gjatë mbledhjes, kampioni mund të kontaminohet me mikroorganizma që kolonizojnë traktin e sipërm respirator. Kjo kamare ekologjike është mjaft e mbjellë me mikrobe oportuniste, veçanërisht në prani të disbakteriozës (cilësore - përbërja e specieve dhe / ose sasiore - përqendrimi i specieve të pranishme në CFU / ml në një kontigjent të dobësuar dhe / ose të imunizuar subjektesh).

Për këtë arsye, mostrat e materialit nga trakti i poshtëm i frymëmarrjes mblidhen veçanërisht me kujdes për të marrë informacion të saktë për agjentin (agjentët) etiologjik. Gjatë përdorimit të metodave invazive për mbledhjen e një kampioni (nëse nuk ndodh gjatë operacionit), instrumentet e përdorura kalojnë nëpër traktin e sipërm respirator dhe ekziston një mundësi reale e mbjelljes së lokacioneve më të thella me mikroorganizma - banorë të traktit të sipërm respirator.

6.5.2.1. Pështymë.

Pështymë e ndarë lirshëm (e ekspektuar).- Mundësisht në mëngjes.

Para marrjes së mostrës, pacienti, nëse është e mundur, duhet të lajë dhëmbët dhe të shpëlajë gojën dhe fytin me ujë të ngrohtë të zier, nëse pacienti nuk është në gjendje ta bëjë vetë këtë, atëherë tualeti i zgavrës së tij orale kryhet nga punonjësit mjekësorë. .

Paralajmëroni pacientin që të mos mbledhë pështymë ose rrjedhje nazofaringeale në enë.

Një mostër e pështymës e marrë si rezultat i një kollë të thellë mblidhet në një enë të posaçme sterile të disponueshme me një kapak vidhash ose në një kavanoz qelqi steril të përgatitur posaçërisht.

Mostra e pështymës dërgohet në laborator.

Pështymë e induktuar (rekomandohet kryesisht për Mycobacterium tuberculosis të dyshuar dhe Pneumocystis yiroveci)- Mundësisht në mëngjes.

Para marrjes së mostrës, pacienti, nëse është e mundur, duhet të lajë dhëmbët dhe të shpëlajë gojën dhe fytin me ujë të ngrohtë dhe të zier; nëse pacienti nuk është në gjendje ta bëjë vetë, atëherë tualeti i zgavrës së tij me gojë kryhet nga personeli mjekësor.

Para procedurës, lagni një të pastër furçë dhëmbësh ngrohni ujin e valuar dhe e kaloni në mukozën e të dy faqeve, gjuhës dhe mishrave të dhëmbëve.

Shpëlajeni në mënyrë aktive gojën e pacientit me ujë të ngrohtë të zier.

Duke përdorur një inhalator, jepini pacientit të gëlltisë 20-30 ml kripë sterile 3-10%.

Mblidhni sputumin e induktuar në një enë të posaçme sterile njëpërdorimshme me kapak me vidë ose në një kavanoz qelqi steril të përgatitur në mënyrë të përshtatshme.

Dërgoni mostrën në laborator.

Njëkohësisht me kampionin e pështymës, një mostër faringuale (faringeale) duhet të dërgohet në laborator, e mbledhur pas tualetit të zgavrës me gojë dhe menjëherë para mbledhjes së pështymës së ndara (ekspektoruar) lirisht ose të induktuar.

6.5.2.2. Trakeostomia dhe aspiratat endotrakeale. Trakeostomia kolonizohet nga mikroorganizmat qysh 24 orë pas intubimit të pacientit, si rezultat i së cilës rezultatet e studimit të kulturës janë të një rëndësie të ulët klinike. Nisur nga sa më sipër, rezultatet e kulturës nga pacientët e intubuar duhet të krahasohen vazhdimisht me gjetjet klinike (p.sh. ethe ose infiltrate me rreze X).

Mostrat e larjes bronkiale ose lavazhi bronkoalveolar mblidhen, nëse është e mundur, përpara se të merren mostrat e skrapimit ose biopsisë. Rregulli diktohet nga nevoja për të shmangur gjakun e tepërt në lëngun që rezulton, sepse. gjaku mund të ndryshojë përqendrimin e komponentëve qelizor dhe joqelizor të kampionit dhe të ndikojë në rezultatin e analizës mikrobiologjike.

Mostra e aspiratës mblidhet në një enë sterile të disponueshme me një kapak me vidë ose në një enë qelqi steril të montuar siç duhet, ose në një tub qelqi njëpërdorimshëm steril me një mbyllës, ose dorëzohet në laborator në një shiringë të mbyllur me ajrin e hequr.

6.5.2.3. Mostrat e marra duke përdorur një bronkoskop. Lavazhi bronkoalveolar (kampioni i zgjedhur), larjet bronkiale (ndjeshmëria e ulët në diagnostikimin e pneumonisë), gërvishtjet bronkiale (më domethënëse se larjet), mostrat e biopsisë transtrakeale merren duke futur një bronkoskop transnazal ose transoral në një pacient të pa intubuar ose përmes një tubi endotrake. në një pacient të intubuar.

Për të marrë një mostër të skuqjes bronkiale ose lavazh bronkoalveolar:

injektuar me një shiringë përmes kanalit të biopsisë së bronkoskopit në pjesë të veçanta të kripës sterile jo-bakteriostatike (zyrtare) (vëllimi i përgjithshëm nga 5-20 në 100 ml);

përpara se të futni pjesën tjetër të kripës, thitheni me kujdes me pjesën e futur të shiringës në një enë sterile të disponueshme me kapak vidhash ose në një tub steril të disponueshëm ose qelqi me një mbyllës, ose lëreni në një shiringë të mbyllur, pasi të keni hequr ajrin nga ajo (zakonisht 50-70% e kripës së injektuar është në lavazh);

çdo pjesë e thithur mblidhet në një tas të veçantë;

në fund të procedurës kombinohen mostrat e marra nga e njëjta zonë. Mostrat nga sajte të ndryshme (p.sh. djathtas lobi i sipërm mushkëritë dhe lobi i poshtëm i djathtë) duhet të lidhen së bashku vetëm pas konsultimit me mjekun që merr pjesë;

në drejtim tregojnë vëllimin e përgjithshëm të kripës së injektuar.

Për të marrë një mostër kruarje bronkiale:

përmes kanalit të biopsisë së bronkoskopit, futet një kateter i dyfishtë teleskopik me një fund distal të trajtuar me polietilen glikol (ose reagent tjetër të përshtatshëm) për të parandaluar kontaminimin e mostrës;

Mblidhni materialin në një enë sterile të disponueshme me kapak me vidë ose në një enë transporti me mjedis anaerobik ose në një tub steril me medium tioglikoli, të mbyllur fort me një tapë gome sterile;

dorëzojë materialin në laborator.

Për të marrë një biopsi transbronkiale, një mostër mblidhet përmes kanalit të biopsisë së bronkoskopit dhe, pasi e vendoset në një enë sterile të disponueshme me një kapak vidhash me një sasi të vogël (1-2 ml) kripur jo bakteriostatik (zyrtar). në një provëz me një medium tioglikoli të mbyllur fort me një tapë gome, transferohet në laboratorë

6.5.2.4. Mostrat e aspirimit të mushkërive. Për të mbledhur një mostër, një gjilpërë futet përmes sternumit në infiltratin e mushkërive nën kontrollin e një skaneri CT. Materiali aspirohet nga fokusi i inflamacionit. Nëse ka një infiltrat të madh ose ka disa, është e nevojshme të merren disa mostra nga vatrat përkatëse ose disa mostra nga një lezion i madh. Materiali transferohet në laborator në një enë transporti me medium për anaerobe ose në një tub qelqi me medium tioglikoli, ose në një enë me vidë të disponueshme.

6.5.2.5. Mostrat e biopsisë së mushkërive. Nëse është e mundur fitohen copa indi me përmasa 1-3 cm.Nëse lezioni është i madh ose ka disa, mblidhen disa mostra. Mostra vendoset në një enë sterile njëpërdorimshme me kapak me vidë ose në një enë transporti me mjedis anaerobik, ose në një enë (epruvetë) me mjedis tioglikoli, të mbyllur me një tapë gome sterile.

6.6. Testet për proceset infektive dhe inflamatore të sistemit gjenitourinar

6.6.1. Mostrat e urinës.

6.6.1.1. Rregullat e përgjithshme për marrjen e mostrave:

nuk lejohet mbledhja e urinës nga çarçafët e krevatit ose nga uturaku;

për analizën e urinës gjatë urinimit natyral, përdorni pjesën mesatare të mëngjesit;

Para marrjes së mostrës, është e nevojshme të lahen tërësisht organet gjenitale të jashtme dhe zona anusit ujë të ngrohtë të zier; vëmendje e veçantë duhet t'i kushtohet përpunimit të hapjes së uretrës tek burrat (vestibuli i vaginës - tek gratë) për të siguruar që gjatë procedurës mostra të mos kontaminohet më tej me mikrobe;

nuk lejohet përdorimi i dezinfektantëve për përpunim, sepse. nëse hyjnë në mostër, ato mund të pengojnë rritjen e mikroorganizmave;

mostra transferohet në laborator jo më vonë se 2 orë nga momenti i grumbullimit;

për mbledhjen dhe dërgimin e mostrave në laborator, përdoren enë sterile të disponueshme me kapak ose tuba (mund të përdoren tuba qelqi të montuar posaçërisht me një tapë qelqi të përshkueshme nga gazi ose garzë pambuku, por kujdes i veçantë nuk duhet të njom tapës);

dorëzimi në laborator i mostrave të aspiratave të marra duke përdorur teknikën e punksionit suprapubik të fshikëzës kryhet në një enë transporti me një medium të veçantë për anaerobet ose në një shiringë të mbyllur pa gjilpërë;

nëse dyshohet për një infeksion viral, mostrat dorëzohen në laborator në një enë sterile të disponueshme të vendosur mbi akull të shkrirë (akulli i thatë nuk lejohet!);

çdo procedurë për marrjen e mostrës duke përdorur një kateter (veçanërisht tek gratë) kryhet me respektim të kujdesshëm të rregullave të asepsis për të parandaluar ndotjen shtesë të pacientit gjatë futjes së kateterit;

për hulumtime mikrobiologjike nuk lejohet përdorimi i mostrës nga m. ditore

6.6.1.2. Mbledhja e mostrave të urinës nga gratë gjatë urinimit natyral.

Përdorni pjesën e mesme, sepse. kalimi i parë i urinës duhet të heqë commensals ndoshta në uretrës. Mostra e mbledhur në pasazhet e mëposhtme duhet të jetë pa kontaminim. Besueshmëria e rezultateve pozitive të një materiali të tillë është 80% kur mblidhen një mostër, 90% kur mblidhen dy mostra të njëpasnjëshme dhe 100% kur tre, nëse të gjitha mostrat japin të njëjtat rezultate.

Punonjësi shëndetësor që mbledh mostrën duhet të lajë duart me sapun dhe ujë, t'i shpëlajë me ujë dhe t'i thajë. Nëse mostra merret nga vetë pacienti, ai shpjegohet në detaje se si bëhet kjo, duke marrë parasysh përgatitjen e përshkruar më sipër dhe paralajmërohet se çfarë mund të ndodhë nëse ai shkel rregullat:

lani tërësisht hapjen e uretrës dhe zonën e hollit të vaginës, si dhe perineumin dhe anusin me ujë me sapun ose sapun të lëngshëm, shpëlajeni me ujë të ngrohtë të zier, thajeni me një leckë garzë sterile;

hapja e vaginës duhet të mbyllet me një shtupë pambuku steril;

mbani labitë e jashtme në një distancë nga njëra-tjetra gjatë urinimit;

zbrazni një sasi të vogël të urinës në një enë të veçantë për t'u hedhur pa ndalur urinimin;

Mblidhni një pjesë mesatare të urinës (10-20 ml) në një enë të posaçme njëpërdorimshme me një kapak vidë ose një enë qelqi steril të montuar posaçërisht në laborator.

6.6.1.3. Mbledhja e mostrave të urinës nga meshkujt gjatë urinimit natyral.

Tek meshkujt kërkohet një pjesë e urinës për ekzaminim mikrobiologjik, sepse. ato kanë shumë më pak gjasa të infektohen sesa gratë.

Personi që mbledh mostrën duhet të lajë duart me sapun, t'i shpëlajë me ujë dhe t'i thajë. Nëse pacienti mbledh vetë mostrat, ai duhet të shpjegohet në detaje se si bëhet kjo, duke marrë parasysh përgatitjen e mëposhtme dhe të paralajmërohet se çfarë mund të ndodhë nëse shkelen rregullat:
[email i mbrojtur], do ta kuptojmë.

Kryerja e studimeve PCR lejohet në bazë të laboratorëve ekzistues, subjekt i organizimit në laborator të zonave të pavarura ose të veçanta të punës si pjesë e ambienteve të tjera funksionale, që korrespondojnë me fazat e analizës PCR.

Laboratori PCR duhet të përfshijë grupin minimal të zonave të punës në vijim:

  • pranimi, regjistrimi, analiza dhe përpunimi parësor i materialit;
  • izolimi i ADN/ARN-së;
  • përgatitja e përzierjeve të reaksionit dhe PCR;
  • zbulimi i produkteve të amplifikimit me elektroforezë ose HyFA.

Është e rëndësishme të theksohet se në rastin e përdorimit të metodës, nuk ka nevojë të zbulohen produktet e amplifikimit me elektroforezë. Prandaj, zona e punës në laborator për elektroforezë nuk mund të ndahet.

Në laboratorët PCR, është gjithashtu e nevojshme të sigurohet prania e ambienteve ndihmëse: një arkiv (për dokumentet e kontabilitetit), një dhomë stafi, një zyrë menaxheri, dhoma zhveshjeje për punonjësit, një dhomë ngrënie, dhoma sanitare (tualet), dhomat e shërbimeve. (magazinë).

AT idealeështë e nevojshme të ketë një dhomë autoklavash për dekontaminimin e materialit testues. Mund të ndahet me departamente të tjera të institucionit, në varësi të kërkesave të biosigurisë.

Ambientet për kryerjen e punës në fazat e analizës PCR duhet të jenë të vendosura në kuti (kuti me parakuti). Në fushën e pranimit, regjistrimit, analizës dhe përpunimit parësor të materialit Kryerja e marrjes së materialit, përgatitja e mostrës (ndarja, shënjimi, centrifugimi, etj.), ruajtja dhe inaktivizimi primar i mbetjeve të biomaterialeve me dezinfektues. Hapësira për marrjen, regjistrimin, analizën dhe përpunimin parësor të materialit ndodhet në dhomën e pritjes së materialit ose në një dhomë të veçantë me kuti. Këtu mund të merrni dhe përpunoni gjithashtu mostra për kërkime me metoda të tjera (imunologji, për shembull), me kusht që të ndahet një vend pune i veçantë i pajisur për analizën PCR.

Zona e nxjerrjes së ADN/ARN-së vendosur në një dhomë të veçantë. Kur organizohet një laborator PCR në bazë të një laboratori ekzistues, lejohet të izolohet ADN / ARN në dhomat ku kryhen lloje të tjera kërkimesh, përveç punës së inxhinierisë gjenetike. Në këtë rast, në dhomë organizohet një zonë pune për nxjerrjen e ADN/ARN-së, në të cilën ndodhet një kuti PCR ose një kuti sigurie biologjike. Asnjë punë tjetër nuk lejohet në kutinë PCR për izolimin e ADN/ARN-së!

Në fushën e përgatitjes së përzierjeve të reaksionit dhe PCR përgatitni një përzierje PCR, shtoni preparate të izoluara ADN/ARN ose cDNA në një tub PCR, transkriptimin e kundërt të ARN-së dhe amplifikimin e ADN-së ose cDNA-së. Dhoma për përgatitjen e përzierjeve të reaksionit dhe PCR duhet të jetë e ndarë. Përgatitja e përzierjeve të PCR-së reaksionale kryhet në një kuti PCR.

Nëse është e nevojshme, faza e izolimit të ADN/ARN-së mund të kombinohet në të njëjtën dhomë me fazën e përgatitjes së përzierjeve të reaksionit dhe PCR, nëse ka kuti të veçanta PCR - për përgatitjen e përzierjeve të PCR-së reaksionale dhe për izolimin e ADN/ARN-së.

Zona për zbulimin e produkteve të amplifikimit vendoset në një dhomë të veçantë, nëse është e mundur e pajisur me kuti PCR. Nëse është e nevojshme të përdoret njëkohësisht metoda e elektroforezës dhe metoda e analizës së hibridizimit për zbulimin e produkteve të amplifikimit, duhet të ndahet një zonë e veçantë pune në dhomën e zbulimit për analizën e hibridizimit. Në këtë rast, pajisjet dhe aksesorët për çdo lloj zbulimi janë të shënuara për secilën zonë. Nuk lejohet përdorimi i pipetave dhe enëve të destinuara për elektroforezë për analizën e hibridizimit.

Vendimet e planifikimit dhe vendosja e pajisjeve duhet të sigurojnë rrjedhën e lëvizjes së materialit në studim. Shkëmbimi i ajrit midis dhomës për zbulimin e produkteve të amplifikimit dhe dhomave të tjera duhet të përjashtohet plotësisht.

Laboratori PCR do të jetë i pajisur me hidraulik, kanalizim, energji elektrike dhe ngrohje. Të gjitha dhomat e laboratorit PCR janë të pajisura me ndriçim të mjaftueshëm natyror dhe artificial.

Gjatë ndërtimit të laboratorëve të rinj ose rikonstruksionit të laboratorëve ekzistues PCR, ambientet pajisen me furnizim dhe ventilim të shkarkimit ose të shkarkimit. Diferenca në presionin e ajrit në ambientet e laboratorit PCR arrihet për shkak të dallimeve në kursin e këmbimit të ajrit në to. Kursi i këmbimit të ajrit duhet të korrespondojë me vlerat e dhëna në tabelë:

Nëse është e nevojshme, kondicionerët mund të instalohen në laboratorin PCR.

Dekorimi i brendshëm i ambienteve kryhet në përputhje me qëllimin e tyre funksional. Sipërfaqet e mureve, dyshemeve dhe tavaneve në dhomat e laboratorit duhet të jenë të lëmuara, pa çarje, lehtësisht të përpunuara, rezistente ndaj detergjenteve dhe dezinfektuesit. Dyshemetë nuk duhet të jenë të rrëshqitshme. Mobiljet e laboratorit duhet të kenë një shtresë që është rezistente ndaj detergjenteve dhe dezinfektuesve. Sipërfaqja e tavolinave nuk duhet të ketë të çara dhe qepje. Ambientet e laboratorit duhet të jenë të papërshkueshme nga brejtësit dhe insektet. Laboratori PCR është i pajisur me pajisje për shuarjen e zjarrit.

KLAMIDIOZA UROGJENITALE

Material për kërkime Skrapje nga uretra ose kanali i qafës së mitrës, sekretimi i prostatës, sedimenti i urinës. Tek të porsalindurit, gërvishtjet nga konjuktiva e syve dhe muri i pasmë i faringut përdoren si material për hulumtim. Tek vajzat, një gërvishtje nga vulva përdoret si material për kërkime, tek djemtë - urina.

Përgatitja e pacientit, marrja e materialit biologjik dhe kushtet për transportin e tij 10 ditë para marrjes së materialit për hulumtim, është e nevojshme të ndërpritet marrja e barnave të kimioterapisë. procedurat e shërimit.

Karakteristikat e marrjes së materialit nga uretra

  • para marrjes së materialit, pacientit këshillohet të përmbahet nga urinimi për 1,5-2 orë;
  • menjëherë para marrjes së materialit, hapja e jashtme e uretrës duhet të trajtohet me një shtupë të lagur me kripë sterile;
  • në prani të sekrecioneve purulente, gërvishtjet rekomandohen të merren 15-20 minuta pas urinimit; në mungesë të sekrecioneve, është e nevojshme të masazhoni uretrën duke përdorur një sondë për të marrë materialin;
  • te femrat, para futjes së sondës në uretrën, masazhohet në nyjen pubike;
  • në uretrën tek gratë, sonda futet në një thellësi prej 1,0-1,5 cm, tek burrat - 3-4 cm, dhe më pas bëhen disa lëvizje rrotulluese; tek fëmijët, materiali për hulumtim merret vetëm nga hapja e jashtme e uretrës;

Karakteristikat e marrjes së materialit nga kanali i qafës së mitrës

  • para marrjes së materialit, është e nevojshme të hiqni mukozën me një shtupë pambuku dhe më pas të trajtoni qafën e mitrës me kripë sterile;
  • sonda futet në kanalin e qafës së mitrës në një thellësi prej 0,5-1,5 cm;
  • në prani të erozioneve të kanalit të qafës së mitrës, ato duhet të trajtohen me kripë sterile dhe materiali duhet të merret në kufirin e indeve të shëndetshme dhe të ndryshuara;
  • kur hiqni sondën, është e nevojshme të përjashtoni plotësisht kontaktin e saj me muret e vaginës;

Pas marrjes së materialit, sonda ulet në provëz me mjetin transportues DNA-EXPRESS. Pasi sonda futet në mediumin e transportit, ajo rrotullohet disa herë dhe më pas hiqet nga tubi. Shishja është e mbyllur dhe etiketuar. Nëse koha e transportit të materialit biologjik nga momenti i marrjes deri në momentin e dorëzimit të tij në laborator është më shumë se 2 orë, atëherë tubi duhet të ngrihet në -20 0 C. Transporti i materialit biologjik duhet të kryhet vetëm në një çantë më e ftohtë. Materiali biologjik i ngrirë mund të ruhet jo më shumë se 2 javë.

Karakteristikat e marrjes së sekretit të gjëndrës së prostatës

Para marrjes së sekretit të prostatës, penisi i glansit trajtohet me një shtupë pambuku steril të lagur me kripë. Sekreti i prostatës merret pas një masazhi paraprak të prostatës përmes rektumit. Mjeku kryen një masazh me presion me disa lëvizje të fuqishme nga baza deri në majë. Pastaj sekreti i prostatës shtrydhet nga pjesa kavernoze. Transporti i materialit biologjik duhet të kryhet vetëm në një qese frigoriferike.

Veçoritë e marrjes (mbledhjes) së urinës

Urina mblidhet në mëngjes në stomak bosh pas gjumit ose jo më herët se 2-3 orë pas urinimit të fundit. Urina e mëngjesit vendoset për 1 orë, pastaj bashkohet me kujdes, duke lënë vetëm pjesën e poshtme - rreth 10 ml. Kjo mbetje derdhet në një tub centrifuge dhe centrifugohet. Pastaj supernatanti drenohet përsëri dhe precipitati (pa lëng) transferohet me një sondë në një tub PCR.

Urina nuk duhet të ngrihet në frigorifer ose të ngrihet derisa të merret një sediment.

Karakteristikat e marrjes së materialit nga muri i pasmë i faringut

Një sondë e disponueshme futet pas qiellzës së butë në nazofaringë dhe kalon përgjatë murit të pasmë të faringut. Pas marrjes së materialit, sonda ulet në provëz me mjetin transportues DNA-EXPRESS. Pasi sonda futet në mediumin e transportit, ajo rrotullohet disa herë dhe më pas hiqet nga tubi. Shishja është e mbyllur dhe etiketuar. Nëse koha e transportit të materialit biologjik nga momenti i marrjes deri në momentin e dorëzimit të tij në laborator është më shumë se 2 orë, atëherë tubi duhet të ngrihet në -200C. Transporti i materialit biologjik duhet të kryhet vetëm në një qese frigoriferike. Materiali biologjik i ngrirë mund të ruhet jo më shumë se 2 javë.

Karakteristikat e marrjes së materialit nga konjuktiva e syve

Në prani të shkarkimit të bollshëm purulent, ai hiqet me një shtupë pambuku steril të lagur me kripë. Një kruarje merret nga sipërfaqja e brendshme e qepallës së poshtme duke lëvizur drejt kantusit të brendshëm të syrit. Kur merrni një kruarje, është e nevojshme të mbani qepallën me duar në mënyrë që kur vezulloni, qerpikët të mos prekin sondën.

Pas marrjes së materialit, sonda ulet në provëz me mjetin transportues DNA-EXPRESS. Pasi sonda futet në mediumin e transportit, ajo rrotullohet disa herë dhe më pas hiqet nga tubi. Shishja është e mbyllur fort. Nëse koha e transportit të materialit biologjik nga momenti i marrjes deri në momentin e dorëzimit të tij në laborator është më shumë se 2 orë, atëherë tubi duhet të ngrihet në -200C. Transporti i materialit biologjik duhet të kryhet vetëm në një qese frigoriferike. Materiali biologjik i ngrirë mund të ruhet jo më shumë se 2 javë.

MIKOPLAZMOZA UROGJENITALE

Material për hulumtim Uretra e shkëputshme, vagina, kanali i qafës së mitrës, urina (centrifugimi i pjesëve të para dhe të mesme të mëngjesit), sekretimi i prostatës, sperma.

Karakteristikat e marrjes së materialit nga vagina

Materiali duhet të merret përpara ekzaminimit manual. Para manipulimit, pasqyra mund të laget me ujë të nxehtë; përdorimi i antiseptikëve për trajtimin e pasqyrës është kundërindikuar. Shkarkimet vaginale mblidhen me një sondë sterile të disponueshme nga forniksi i poshtëm i pasmë ose nga zona të ndryshuara patologjikisht të mukozës dhe vendosen në një epruvetë me mjetin transportues ADN-EXTPESS. Tek vajzat, materiali merret nga mukoza e vestibulës së vaginës, dhe në disa raste - nga forniksi i pasmë i vaginës përmes unazave himenale. Pasi sonda futet në mediumin e transportit, ajo rrotullohet disa herë dhe më pas hiqet nga tubi. Shishja është e mbyllur dhe etiketuar. Nëse koha e transportit të materialit biologjik nga momenti i marrjes deri në momentin e dorëzimit të tij në laborator është më shumë se 2 orë, atëherë tubi duhet të ngrihet në -200C. Transporti i materialit biologjik duhet të kryhet vetëm në një qese frigoriferike. Materiali biologjik i ngrirë mund të ruhet jo më shumë se 2 javë.

GONORREA

Material për hulumtim Uretra e shkëputshme, kanali i qafës së mitrës, sekretimi i prostatës, sedimenti i urinës.

Përgatitja e pacientit, marrja e materialit biologjik dhe kushtet për transportin e tij Shih klamidia urogjenitale.

10 ditë para marrjes së materialit për studim, është e nevojshme të ndërpritet marrja e barnave të kimioterapisë dhe procedurave mjekësore. Materiali për hulumtime tek gratë duhet të merret para menstruacioneve ose 1-2 ditë pas përfundimit të saj. Para marrjes së materialit, është e nevojshme të përmbaheni nga urinimi për 3-4 orë dhe marrëdhëniet seksuale. Gratë në prag të ekzaminimit nuk duhet të kryejnë tualetin e organeve gjenitale të jashtme dhe dush. Materiali i testimit duhet të jetë pa papastërti gjaku. Shkarkimi i uretrës që rrjedh lirshëm nuk duhet të merret për hulumtim. Sekreti i prostatës duhet marrë vetëm pas përfundimit të manifestimeve akute të prostatitit. Me gonorre të ngadaltë dhe kronike, një provokim është i nevojshëm përpara studimit.

Metodat e provokimit të gonorresë:

  • biologjike: futja e gonovaksinës (500 milion trupa mikrobikë) për të rriturit një herë, në mënyrë intramuskulare, për fëmijët mbi 3 vjeç - 100-200 milion trupa mikrobikë; për fëmijët nën 3 vjeç, futja e gonovacinës nuk rekomandohet;
  • termike: aplikim për 3 ditë diatermi me rregullim abdominal-vaginal-sakrale të elektrodave për 30, 40, 50 minuta ose induktotermi për 10, 15, 20 minuta; është mirë të merret materiali nga uretra, kanali i qafës së mitrës 1 orë pas çdo ngrohjeje;
  • mekanike: vendosja e një kapaku metalik në qafën e mitrës së grave për 4 orë, masazhimi i uretrës tek burrat në bougie për 10 minuta;
  • ushqimore: konsumimi i ushqimit të kripur, pikant dhe alkoolit 24 orë para studimit.

Materiali merret pas provokimit dhe pas 24-48-72 orësh.

Për të marrë rezultatet më të besueshme, është e nevojshme të kryhen studime të përsëritura.

TRIKOMONIAZA

Materiali për kërkime I shkëputur nga uretra (tek meshkujt), vagina, sekretimi i prostatës.

Përgatitja e pacientit, marrja e materialit biologjik dhe kushtet për transportin e tij Shih klamidia urogjenitale, mikoplazmoza urogjenitale.

TUBERKULOZI (vendet ekstrapulmonare)

Materiali për hulumtim Urina, shtupa nga kanali i qafës së mitrës, uretra.

Përgatitja e pacientit, marrja e materialit biologjik dhe kushtet për transportin e tij 10 ditë para marrjes së materialit për kërkime, është e nevojshme të ndërpritet marrja e barnave të kimioterapisë dhe procedurave mjekësore. Shih klamidia urogjenitale.

SËMUNDJET E FRYMËMARRJES TË LIDHUR ME Mycoplasma pneumoniae

Materiali për ekzaminim Tampon nazofaringeal.

Karakteristikat e marrjes së një tamponi nga nazofaringu Një shtupë merret me stomakun bosh ose jo më herët se 2-4 orë pas ngrënies. Gjatë marrjes së materialit është i nevojshëm ndriçimi i mirë, pacienti ulet kundër burimit të dritës, rrënja e gjuhës shtypet poshtë me një shpatull, materiali merret me sondë sterile, pa prekur gjuhën, mukozën bukale dhe dhëmbët, dhe ulet në një epruvetë me mjetin transportues DNA-EXPRESS. Pas marrjes së materialit, sonda ulet në provëz me mjetin transportues DNA-EXPRESS. Pas futjes së sondës në mediumin e transportit, ajo rrotullohet disa herë dhe më pas hiqet nga tubi. Tubi është i mbyllur. Nëse koha e transportit të materialit biologjik nga momenti i marrjes deri në momentin e dorëzimit të tij në laborator është më shumë se 2 orë, atëherë tubi duhet të ngrihet në -200C. Transporti i materialit biologjik duhet të kryhet vetëm në një qese frigoriferike. Materiali biologjik i ngrirë mund të ruhet jo më shumë se 2 javë.

SËMUNDJET GASTRODUODENAL (gastriti, ulçera peptike stomak ose duodenum) I LIDHUR ME Helicobacter pylori

Material për hulumtim Biopsi të antrumit të stomakut, biopsi të duodenit, biopsi të mishrave të dhëmbëve, njolla nga xhepi periodontal.

Karakteristikat e marrjes së materialit për biopsi

Materiali i biopsisë merret gjatë një ekzaminimi endoskopik. Para fillimit të terapisë me H. pylori, merret një mostër biopsie nga antrumi i stomakut. Gjatë monitorimit të trajtimit, një mostër biopsie merret jo më herët se 4 javë pas terapisë anti-Helicobacter nga trupi i stomakut. Mostra e marrë nga biopsia ulet në një provëz sterile të thatë (eppendorf) dhe dërgohet menjëherë në laborator. Për ruajtje më të gjatë, është e mundur të ngrini materialin e marrë të biopsisë në një temperaturë prej -20 0 C.

Karakteristikat e marrjes së mostrave të biopsisë së mishrave të dhëmbëve, njollave nga xhepi periodontal dhe pështyma

Materiali i biopsisë nga mishrat e dhëmbëve, njollat ​​nga xhepi periodontal dhe pështyma merren nga pacientët me histori të patologjisë gastroduodenale në prani të gingivitit dhe sëmundjes periodontale.

Mostra e marrë nga biopsia ulet në një provëz sterile të thatë (eppendorf) dhe dërgohet menjëherë në laborator. Për ruajtje më të gjatë, është e mundur të ngrini materialin e marrë të biopsisë në një temperaturë prej -20 0 C.

Njollat ​​nga xhepi periodontal mblidhen në një provëz sterile (eppendorf) me fiziologjik. Në këtë rast, epruvetat mund të ruhen në frigorifer (+4 0 C - +6 0 C) jo më shumë se 12 orë, dhe ato transportohen në një qese frigoriferike.

INFEKSIONET VIRALE

Herpes simplex virus II; Citomegalovirus; H. papiloma virus 16, 18

Materiali i hetuar - njollat

infeksion herpetik gërvishtjet merren më së miri nga lezionet gjenitale (vezikulat, plagët). Në mungesë të lezioneve gjenitale, bëhet një scraping nga kanali i qafës së mitrës. Gjatë diagnostikimit të infeksionit citomegalovirus, një njollë nga muri i pasmë i faringut, gërvishtjet nga vagina, uretra dhe kanali i qafës së mitrës, pështyma dhe lëngu cerebrospinal mund të përdoren për kërkime. Gjatë diagnostikimit të infeksionit të papillomavirusit të njeriut, një shtupë nga nazofaringu, nga konjuktiva e syrit, kruarje nga kanali i qafës së mitrës, qafa e mitrës, d.m.th. membranat mukoze (epiteli i pakeratinizuar).

Marrja e materialit biologjik Marrja e materialit biologjik, nëse është e mundur, duhet të bëhet gjatë periudhës së përkeqësimit të infeksionit. Shih klamidia urogjenitale, mikoplazmoza urogjenitale.

Herpes simplex virus I; Herpes simplex virus II; Virusi herpes simplex VI
Citomegalovirus; Virusi Epstein Barr

Materiali i hetuar Gjaku amtare.

Përgatitja e pacientit, marrja e materialit biologjik dhe kushtet për transportin e tij Këshillohet marrja e gjakut për kërkime në stomak bosh.

Gjaku venoz në sasinë 1-1,5 ml merret në një provëz sterile (eppendorf) me vëllim 1,5 ml me tretësirë ​​EDTA. Një epruvetë me gjak mund të ruhet në frigorifer (+4 0 C - +6 0 C) jo më shumë se 24 orë. Mos e ngrini tubin. Studimi do të kryhet nga plazma dhe qelizat e gjakut.

HBV-ADN; Përcaktimi i përqendrimit të HBV-ADN me PCR konkurruese
HCV-ARN (vlerësim gjysëm sasior) + anti-HCV; HCV-ARN me gjenotipizimin e HCV+ anti-HCV; Hepatiti G; TTV-ADN

Materiali i hetuar Serum gjaku.

Përgatitja e pacientit, grumbullimi i materialit biologjik dhe kushtet për transportin e tij Për mbledhjen e gjakut venoz dhe përgatitjen e serumit, shihni seksionin për përcaktimin e përqendrimit të homoneve me ELISA. Serumi që nuk përmban papastërti të eritrociteve është subjekt i hulumtimit. Nëse është e nevojshme të ruhet mostra e gjakut të testuar për një kohë të gjatë (vetëm për hepatitin B, C, G), është e nevojshme të merret 1 ml serum ose plazma gjaku dhe të ruhet në një temperaturë prej -20 0 C për jo. më shumë se 2 javë.

STUDIM GJITHËPËRFSHIRËS PËR VAGINOZËN BAKTERIALE

Materiali i hetuar Njoftime nga forniksi i poshtëm i pasmë i vaginës.

Për një diagnozë komplekse vaginoza bakteriale nevojshme:
Merrni një gërvishtje të qelizave epiteliale nga forniksi i pasmë ose anësor i vaginës në një rrëshqitës xhami të veçantë të disponueshme, firmosni dhe thani atë. Ruani gotën në temperaturën e dhomës.
Hiqni mukozën dhe merrni një gërvishtje të qelizave epiteliale nga forniksi i pasmë ose anësor i vaginës me një sondë njëpërdorimshe me furçë të qafës së mitrës në një tub PCR me reagentin ADN-EXPRESS. Ruajeni epruvetën në frigorifer në temperaturë minus 20°C deri në 10 ditë.
Dërgojeni rrëshqitjen e xhamit dhe tubin PCR në laboratorin "Litekh" me drejtim të mbushur plotësisht.

Mbledhja e materialit biologjik dhe kushtet për transportin e tij

Shihni veçoritë e marrjes së materialit nga vagina për studime citologjike dhe PCR.



Koha optimale për një test gjaku është në intervalin nga 1 deri në 4 orë pas marrjes.Në intervalin nga 5 deri në 30 minuta, ka një përshtatje të përkohshme të trombociteve me antikoagulantin dhe grumbullimin e tyre, gjë që mund të çojë në një ulje të rreme të tyre. mostrën e gjakut.

Është e padëshirueshme të ekzaminohet gjaku më vonë se 8 orë pas marrjes, sepse. disa karakteristika të qelizave ndryshojnë: vëllimi i leukociteve zvogëlohet, vëllimi i eritrociteve rritet, gjë që përfundimisht çon në rezultate të gabuara të matjes dhe interpretim të gabuar të rezultateve. Vetëm përqendrimi i hemoglobinës dhe numri i trombociteve mbeten të qëndrueshme gjatë ditës së ruajtjes së gjakut.

Gjaku nuk mund të ngrihet. Gjaku kapilar me K 2 EDTA duhet të ruhet në temperaturën e dhomës dhe të analizohet brenda 4 orëve nga mbledhja.

Për të siguruar një rezultat cilësor të hulumtimit, është e nevojshme të kontrollohet rreptësisht koha dhe kushtet e ruajtjes së mostrave përpara analizës.

Nëse është e nevojshme të kryhet një analizë e vonuar (transportimi në distanca të gjata, mosfunksionimi teknik i pajisjes, etj.), mostrat e gjakut ruhen në frigorifer (4 o - 8 o C) dhe ekzaminohen brenda 24 orëve. Megjithatë, duhet pasur parasysh që qelizat fryhen dhe parametrat që lidhen me vëllimin e tyre ndryshojnë. Praktikisht njerëz të shëndetshëm këto ndryshime nuk janë kritike dhe nuk ndikojnë në parametrat sasiorë, por në prani të qelizave patologjike, këto të fundit mund të ndryshojnë apo edhe të shemben brenda pak orësh nga momenti i marrjes së mostrës së gjakut.

Menjëherë para studimit, gjaku duhet të përzihet plotësisht për disa minuta për të holluar antikoagulantin dhe për të shpërndarë në mënyrë të barabartë elementët e formuar në plazmë. Përzierja konstante afatgjatë e mostrave deri në momentin e hulumtimit të tyre nuk rekomandohet për shkak të dëmtimit të mundshëm dhe prishjes së qelizave patologjike.

Një test gjaku në një analizues automatik kryhet në temperaturën e dhomës. Gjaku i ruajtur në frigorifer duhet fillimisht të ngrohet në temperaturën e dhomës, pasi viskoziteti i gjakut rritet në temperatura të ulëta dhe qelizat e gjakut priren të ngjiten së bashku, gjë që çon në përzierjen e dëmtuar dhe lizën jo të plotë. Studimi i gjakut të ftohtë mund të shkaktojë shfaqjen e "sinjaleve të alarmit" për shkak të kompresimit të histogramit të leukociteve.

Gjatë kryerjes së studimeve hematologjike në një distancë të konsiderueshme nga vendi i marrjes së mostrave të gjakut, në mënyrë të pashmangshme lindin probleme që lidhen me kushtet e pafavorshme të transportit. Ndikimi i faktorëve mekanikë (lëkundje, dridhje, përzierje, etj.), kushtet e temperaturës, gjasat e derdhjes dhe kontaminimit të mostrave mund të ndikojnë në cilësinë e analizave. Për të eleminuar këto arsye, gjatë transportit të tubave të gjakut, rekomandohet përdorimi i tubave plastikë të mbyllur hermetikisht dhe kontejnerëve të veçantë transportues izotermikë. Gjatë transportit nuk lejohet kontakti i kampionit (me materialin vendas) dhe formularit të referimit, në përputhje me rregullat e sigurisë biologjike.

^ 4.3. Marrja dhe regjistrimi i materialit biologjik

Tubat me mostrat e gjakut venoz dorëzohen në laborator në ditën e marrjes së tyre në rafte në thasë të veçantë për dërgimin e materialit biologjik, në të cilin tubat duhet të jenë në pozicion vertikal, dhe kur transportohen në një distancë të largët - në kontejnerë të veçantë. .

Punonjësi i laboratorit që merr materialin duhet të kontrollojë:

Korrektësia e referimit: formulari i referimit tregon të dhënat e subjektit (mbiemri, emri dhe patronimika, mosha, historia e rastit ose numri i kartës së pacientit, departamenti, diagnoza, terapia);

Etiketimi i epruvetave me mostra gjaku (duhet të shënohen me kodin ose mbiemrin e pacientit, identik me kodin dhe mbiemrin në formularin e dërgimit të materialit për studim). Laboratori duhet të regjistrojë materialin e dorëzuar, të shënojë numrin e epruvetave.

^ 4.4 Llogaritja e përbërjes qelizore të gjakut në një analizues hematologjik

Llogaritja e përbërjes qelizore të gjakut në një analizues hematologjik duhet të kryhet në përputhje të rreptë me udhëzimet për pajisjen.

Kur punoni në një analizues hematologjik, duhet:

Përdorni gjak të stabilizuar me K-2 EDTA në proporcionin e rekomanduar për kripën specifike dhe tubat hematologjike të disponueshme (të thjeshta ose me vakum);

Përpara analizës, përzieni me kujdes, por tërësisht tubin me gjak (rekomandohet përdorimi i një pajisjeje për përzierjen e mostrave të gjakut - rotomix për këtë qëllim);

Përdorni reagentë të regjistruar në mënyrën e përcaktuar; kur ndryshoni reagentët në produkte nga një prodhues tjetër, kontrolloni dhe vendosni kalibrimin e instrumentit;

Nisni pajisjen, duke respektuar të gjitha fazat e shpëlarjes, duke arritur vlera zero (sfondi) të treguesve për të gjitha kanalet;

Kushtojini vëmendje mesazheve të instrumenteve për gabime të mundshme sistematike: mbani mend se rritja e MCHC është më e lartë vlerat normale, zakonisht rezultat i një gabimi në matje;

Nëse zbulohet një gabim, është e domosdoshme të eliminoni shkakun, mos punoni në një pajisje të dëmtuar;

Kryeni procedurën e kontrollit të cilësisë sipas programit përkatës. me një vlerësim të rezultatit;

Punoni me kuptim, duke krahasuar rezultatet e marra me karakteristikat klinike të mostrave të pacientit;

Pas përfundimit të matjeve, shpëlajeni tërësisht analizuesin;

Kur e ndaloni pajisjen për një kohë të gjatë, është e domosdoshme të kryhen të gjitha procedurat e ruajtjes (nëse është e mundur, së bashku me një inxhinier shërbimi);

Në rast të problemeve teknike, duhet të përdorni ndihmën e një inxhinieri shërbimi nga një kompani që ka licencë për mirëmbajtje; Mos ia besoni punën personelit të patrajnuar.

Kur filloni të punoni në një analizues hematologjik, duhet të merren parasysh kufijtë e linearitetit të matjes së parametrave të analizuar. Vlerësimi i mostrave me vlera të parametrave të analizuar që tejkalojnë kufirin e linearitetit të matjes mund të çojë në rezultate të gabuara. Në shumicën e rasteve, kur analizohen mostrat me hipercitozë, analizuesi shfaq një "D" (holluar) në vend të vlerës së parametrit të matur, që tregon nevojën për të holluar kampionin dhe për të rimatur. Hollimi duhet të kryhet derisa të merren rezultate të ngjashme përfundimtare në dy hollimet e ardhshme.

^ PRI me R ─ Analiza e një kampioni të një pacienti me hiperleukocitozë në tre analizues të ndryshëm hematologjik është paraqitur në tabelë.

Tabela 3

¦ Rezultatet e numërimit të hiperleukocitozës të kryera në tre analizues të ndryshëm hematologjik


^ Analizues hematologjik

Shkalla e hollimit të mostrës

Vlera përfundimtare

^ Gjak i plotë

1:1

1:3

1:4

WBC

1

D

274,5

274,5

143,1

715,5

2

322,6

253,2

177,7

141,8

709,0

3

D

D

168,3

139,1

695,5

Tabela tregon se gjatë analizimit të gjakut të plotë, vetëm një analizues (i 2-ti) dha një vlerë dixhitale për numrin e leukociteve, dy të tjerët treguan nevojën për të holluar mostrën. Matja e mëvonshme hap pas hapi e kampionit në tre hollime bëri të mundur arritjen e rezultateve përfundimtare të afërta në të gjitha pajisjet vetëm në një hollim 1:3 dhe 1:4. Kështu, numri i përgjithshëm i leukociteve ishte 700,0 - 710,0 x 10 9 / l, që është më shumë se 2 herë më e lartë se vlera fillestare e marrë në gjakun e plotë në analizuesin e dytë dhe 1,5 - në një hollim 1:1 në datën 1 dhe Analizuesit e dytë.

  1. ^ Kalibrimi i analizatorëve hematologjikë
Kalibrimi i referohet procedurës për rregullimin e analizatorit, si rezultat

I cili arrin barazinë me zero të komponentit sistematik të gabimit (zero paragjykim) ose konfirmon se paragjykimi është zero, duke marrë parasysh gabimin e kalibrimit. Kalibrimi i analizatorëve hematologjik mund të kryhet në dy mënyra kryesore:

Për gjakun e plotë;

Bazuar në mostrat e stabilizuara të gjakut me vlera të certifikuara.

^ 5.1 Kalibrimi i gjakut të plotë

Kalibrimi i gjakut të plotë mund të kryhet duke krahasuar me një analizues referencë, kalibrimi i të cilit është verifikuar dhe mund të merret si origjinal.

Për kalibrimin në krahasim me analizuesin referencë, përdoren 20 mostra të gjakut venoz të pacientit, të përzgjedhura rastësisht nga programi ditor i kërkimit të laboratorit që ka analizuesin referencë. Gjaku duhet të merret në tuba vakum me antikoagulant K 2 EDTA. Pas analizës në analizuesin e referencës, tubat e gjakut dërgohen në laborator për analiza në pajisjen që po kalibrohet. Koha ndërmjet matjeve në analizuesin referencë dhe të kalibruar nuk duhet të kalojë 4 orë. Analiza e mostrave të kalibrimit në instrumentin që do të kalibrohet duhet të kryhet në të njëjtën mënyrë si analiza e mostrave të pacientëve. Rezultatet e përftuara futen në një tabelë në formën e dhënë në shtojcën 1. Këto rezultate përdoren për të përcaktuar faktorët përkatës të kalibrimit, të cilët numerikisht janë të barabartë me koeficientët e pjerrësisë së drejtëzave të kalibrimit që kalojnë nga origjina në grafik.

Faktorët e kalibrimit llogariten në një kompjuter duke përdorur programin EXCEL të përfshirë në paketën Microsoft OFFICE të çdo versioni. Për të llogaritur faktorët e kalibrimit në këtë program, ndërtohet një grafik shpërndarjeje, ku vlerat e matura vizatohen përgjatë boshtit X, vlerat e referencës vizatohen përgjatë boshtit Y dhe vendoset një vijë regresioni përmes origjinës. Programi vizaton një vijë kalibrimi dhe përcakton pjerrësinë e saj, e cila është faktori i dëshiruar i kalibrimit. Nëse zbulohen gabime të mëdha - pika që janë të ndara ndjeshëm nga vija e kalibrimit në grafik, ato duhet të hiqen nga llogaritja (fshini të gjithë rreshtin në tabelën EXCEL). Faktori i kalibrimit që rezulton futet në tabelën e Shtojcës 1 dhe përdoret për të rregulluar manualisht kalibrimin e pajisjes në përputhje me udhëzimet e saj të funksionimit.


    1. ^ Kalibrimi ndaj mostrave të stabilizuara të gjakut me vlera të certifikuara
Kjo metodë kalibrimi bazohet në materialet komerciale të kalibrimit dhe kontrollit, të cilat janë një përzierje artificiale e eritrociteve të stabilizuara të njeriut dhe qelizave të fiksuara njerëzore ose shtazore që imitojnë leukocitet dhe trombocitet. Për shkak të ndryshimit domethënës në vetitë biologjike të përbërësve të këtyre materialeve nga gjaku natyral, vlerat e certifikuara të parametrave hematologjikë varen nga lloji specifik i analizuesit.

Kurdoherë që është e mundur, duhet të përdoren kalibrat e projektuar posaçërisht nga prodhuesi për të kalibruar një lloj të veçantë analizuesi. Gabimet e pikës së caktuar në kalibratorët modernë të hematologjisë në përgjithësi plotësojnë kërkesat mjekësore. Megjithatë, jo të gjitha llojet e analizuesve kanë kalibratorë të tillë. Përveç kësaj, për shkak të afatit të kufizuar të ruajtjes (zakonisht jo më shumë se 45 ditë), nuk është gjithmonë e mundur të merren mostra që nuk kanë skaduar.

Materialet e kontrollit nuk janë të destinuara nga prodhuesi për qëllime kalibrimi: tolerancat për vlerat janë shumë më të gjera, metodat e verifikimit dhe kontrollit të prodhimit nuk janë aq të rrepta sa për kalibratorët. Gjatë kalibrimit, materialet e kontrollit mund të përdoren vetëm si një nga burimet e informacionit në lidhje me vetitë metrologjike të pajisjes.

Sidoqoftë, duhet të kihet parasysh se kur përdoren si materialet e kontrollit ashtu edhe kalibrat për qëllime kalibrimi, tiparet e përgatitjes së mostrës dhe funksionimit të analizatorëve kanë një ndikim të rëndësishëm në përbërësit e gabimit sistematik. Këta faktorë ndikues nuk mund të merren parasysh gjatë kalibrimit me materiale komerciale. Për rrjedhojë, në të gjitha rastet, kalibrimi i kryer duhet të verifikohet duke analizuar statistikat e rezultateve të marra në mostrat e pacientëve (indekset e eritrociteve, intervalet e vlerave normale).

5.2.1 Intervalet e kalibrimit për analizuesit hematologjikë

Kërkesat për intervalin e kalibrimit zakonisht gjenden në manualin e udhëzimeve të analizuesit. Si rregull, kalibrimi kërkohet pas një riparimi ose kur zbulohet një zhvendosje e konsiderueshme në procedurat e kontrollit të cilësisë brenda shtëpisë.

5.2.2 Procedura e kalibrimit

Procedura e kalibrimit kryhet në përputhje me manualin e udhëzimeve të analizuesit.

5.2.3 Kontrollimi i rezultatit të kalibrimit

Ky kontroll konsiston në analizën e kampionit të kalibrimit menjëherë pas kalibrimit. Kalibrimi i kryer pranohet nëse rezultatet e analizës korrespondojnë me vlerat e kalibrimit, duke marrë parasysh variacionin analitik të analizuesit.

5.2.4 Verifikimi i kalibrimit duke përdorur indekset e RBC

Kjo metodë e verifikimit dhe rafinimit të kalibrimit përdor faktin se vlerat mesatare të indekseve të eritrociteve - MCHC, MCH dhe MCV për pacientët kanë një variacion mjaft të vogël dhe për këtë arsye mund të përdoren në mënyrë efektive për kontrollin e kalibrimit dhe kontrollin e mëtejshëm të cilësisë. Numri i rekomanduar i mostrave për mesataren është 20. Çdo mostër pacienti mund të përdoret për të përcaktuar mesataren e MCHC, ndërsa pacientët me anemi duhet të përjashtohen nga MCHC dhe MCV mesatare.

Shumë analizues hematologjikë modernë kanë programe të integruara për llogaritjen e mesatareve aktuale, gjë që thjeshton shumë përpunimin e të dhënave.

Vlerat e synuara të indekseve të eritrociteve, mesatarisht mbi 20 mostra të pacientëve të moshës 18 deri në 60 vjeç, pavarësisht nga gjinia, janë paraqitur në Tabelën 4.

Tabela 4

Vlerat e synuara të indekseve të eritrociteve

Nëse vlerat mesatare të marra janë jashtë tolerancës së kontrollit, atëherë kjo do të thotë që kalibrimi MCV ose Hgb ose RBC duhet të korrigjohet.

Kur përcaktohen arsyet e një kalibrimi të pakënaqshëm nga studimi i parametrave të eritrociteve kur përdoren materiale komerciale të kalibrimit / kontrollit, duhet të merret parasysh vlerësimi i mëposhtëm i besueshmërisë së vlerave të certifikuara të materialeve:

Parametri më i saktë dhe më i qëndrueshëm në kohë është përqendrimi i eritrociteve;

Hgb është një parametër i qëndrueshëm, por mund të varet nga reagentët e përdorur (për shembull, cianid ose pa cianide);

Parametri më i paqëndrueshëm është MCV. Vlera MCV tenton të ndryshojë gjatë gjithë jetëgjatësisë së materialit në një gamë mjaft të gjerë vlerash. Gjatë rafinimit të kalibrimit MCV, të dhënat e marra nga analiza e mesatareve të indekseve të eritrociteve kanë përparësi ndaj vlerave të certifikuara në mostrat e stabilizuara të gjakut.

Duke supozuar se kalibrimi i RBC është i saktë, Tabela 5 tregon arsyet e mundshme dalja e vlerave mesatare të indekseve përtej tolerancës së kontrollit.

Tabela 5

Arsyet për të shkuar përtej vlerave mesatare të indekseve të eritrociteve


Indekset e eritrociteve

Vlera mesatare e indeksit

Vlera mesatare e indeksit

Vlera mesatare e indeksit

Vlera mesatare e indeksit

MCHC

Poshtë kufirit

Mbi kufi

Mbi kufi

Poshtë kufirit

MCH

brenda tolerancës

brenda tolerancës

Mbi kufi

Poshtë kufirit

MCV

Mbi kufi

Poshtë kufirit

brenda tolerancës

brenda tolerancës

Shkak

MCV e mbiçmuar

nënvlerësuar MCV

Hgb e lartë

Hgb e ulët

Rregullat për marrjen, ruajtjen dhe transportin e biomaterialit

Për zbulimin e patogjenëve me PCR

1.1.1. Biomateriali merret nga habitati i pritur i mikroorganizmave dhe zhvillimi i infeksionit.

1.1.2. Sasia e materialit të mbledhur duhet të jetë e vogël. Shkarkimi i tepërt, mukusi dhe qelbi ndikojnë negativisht në cilësinë e nxjerrjes së ADN-së dhe kontribuojnë në degradimin e ADN-së gjatë ruajtjes dhe transportit.

1.1.3. Kur futni një biomaterial të marrë nga një pacient me një sondë me një shtupë pambuku ose furçë në një tub Eppendorf me një zgjidhje tampon, është e nevojshme:

Vëzhgoni sterilitetin;

Përpara se të zhytni biomaterialin e mbledhur në tampon (furçë) në tretësirë, lyeni atë në murin e thatë të epruvetës, më pas lagni tamponin (furçën) në tretësirë ​​dhe, duke rrotulluar sondën, lani tërësisht të gjithë materialin nga muri i epruvetës dhe tamponit (brushës);

Nëse është e mundur, shtrydheni tampon në murin e epruvetës, hiqni sondën me shtupë (brushë) dhe mbylleni epruvetën.

Metodat për marrjen e biomaterialit për kërkime me PCR

1.2.1. Gërvishtjet. Për gërvishtjet, përdoren sonda sterile të disponueshme që kanë një shtupë pambuku me përthithje të shtuar ose "furça", më rrallë lugë Volkmann, lugë të vogla veshi ose instrumente të ngjashme me skaje pak të hapura. Lëvizjet e kruarjes për të mbledhur materialin. Materiali i testimit duhet të përmbajë sa më shumë qeliza epiteliale dhe një sasi minimale të mukusit, gjakut dhe papastërtive të eksudatit. Transferoni materialin në një tub steril Eppendorf me tretësirë ​​tampon (shih seksionin 1.1.).

Kërcim nga kanali i qafës së mitrës: para se të merrni një kruarje, është e nevojshme të hiqni mukozën e tepërt me një shtupë pambuku steril, të trajtoni qafën e mitrës me kripë sterile. Futeni sondën në kanalin e qafës së mitrës në një thellësi 0,5-1,5 cm, duke shmangur kontaktin me muret e vaginës dhe mblidhni materialin me një lëvizje gërvishtëse (jo në gjak). Një numër i vogël i qelizave të kuqe të gjakut në mostër nuk ndikon në rezultatin e analizës. Në prani të erozionit të qafës së mitrës, materiali merret nga kufiri i indit të shëndetshëm dhe të ndryshuar.

Kërcim nga uretra: futni sondën në uretër (te meshkujt - në një thellësi prej 2-4 cm) dhe mblidhni materialin me disa lëvizje rrotulluese. Në prag para marrjes së materialit, lejohet një provokim (ushqim pikant, alkool, etj.). Rekomandohet të përmbaheni nga urinimi për 1-2 orë para marrjes së mostrës. Në prani të sekrecioneve të bollshme purulente, kruarjet duhet të merren jo më vonë se 15 minuta pas urinimit.

Kërcim nga konjuktiva merrni, pasi të keni anestezuar më parë syrin me një solucion 0,5% të dikainës. Duke e kthyer qepallën, përdorni një sondë me një shtupë pambuku (ose bisturi sysh) për të mbledhur qeliza epiteliale nga konjuktiva.

Kërcitja nga rektumi: futni sondën në anus në një thellësi 3-4 cm dhe mblidhni materialin me një lëvizje rrotulluese.

1.2.2. Goditjet. Duke përdorur një sondë sterile të disponueshme me një shtupë pambuku ose furçë, merrni një sasi të vogël shkarkimi (nga vagina, nga faringu, nazofaringu, etj.) dhe transferojeni atë në një tub steril Eppendorf me një zgjidhje tampon (shih seksionin 1.1.).

1.2.3. Gjak. Për testimin PCR, gjaku duhet të jetë amtare(jo përkulur).

Mblidhni gjakun në mënyrë aseptike, me venipunkturë - në një provëz të markës (2-3 ml) me antikoagulant EDTA ( Heparina nuk duhet përdorur si antikoagulant!), përzieni butësisht duke e përmbysur butësisht tubin.

Gjaku me EDTA është një biomaterial për grupet e mëposhtme kërkimore:

- kërkime gjenetike(Momenti i marrjes së mostrave të gjakut nuk ka rëndësi).

- zbulimi i agjentëve infektivë(më informative janë mostrat e marra gjatë të ftohtit, temperaturë e ngritur, pra me sa duket gjatë viremisë ose bakteremisë).

1.2.4. Urina. Në një enë sterile të zbrazët me kapak të shtrënguar me vidë, mblidhni pjesën e parë ose të mesme të urinës në mëngjes në një sasi prej të paktën 10 ml. Nëse kampionimi i urinës kryhet gjatë ditës, atëherë para kësaj pacienti nuk duhet të urinojë për 1,5-3 orë.

1.2.5. Pështymë. Në mëngjes, dezinfektoni gojën dhe fytin (shpëlajeni me një tretësirë ​​sode buke). Mblidhni sputum në një shishkë të zbrazët sterile me grykë të gjerë.

1.2.6. Biopsi. Materiali duhet të merret nga zona e vendndodhjes së pretenduar të agjentit infektiv, nga indi i dëmtuar ose zona në kufi me dëmtimin. Vendoseni biopsinë në një tub steril Eppendorf me tretësirë ​​tampon.

1.2.7. Pështyma, lëngu gastrik, lëngu cerebrospinal, lëngu sinovial. Pështymë (1-5 ml), lëng gastrik (1-5 ml), lëng cerebrospinal (1-1,5 ml) - vendoseni në një epruvetë sterile bosh (enë).

1.2.8. Lëngu i prostatës. Pas masazhit të prostatës, lëngu mblidhet në një sasi prej 0,5-1 ml në një epruvetë (enë) sterile bosh. Nëse është e pamundur të merrni lëng, menjëherë pas masazhit, pjesa e parë e urinës mblidhet në një sasi jo më shumë se 10 ml (kjo porcion përmban lëng prostate).

1.2.9. Larje, lavazh bronkoalveolar (BAL). Me një shtupë pambuku steril dhe 5-7 ml kripë, bëhet një larje, për shembull, nga maja e një endoskopi ose bronkoskopi dhe 0,5-5 ml larje vendoset në një tub steril bosh (enë).

1.2.10. Feces. Një sondë me një shtupë pambuku vendoset brenda jashtëqitjes dhe rrotullohet pak, duke kapur një sasi të vogël materiali. Pastaj materiali vendoset në një tub steril Eppendorf me një tretësirë ​​tampon.



Postime të ngjashme