Çfarë është një test peshku për kancerin e gjirit? Çfarë tregon? Analiza e peshkut në kancerin e gjirit Metoda e peshkut dhe aplikimi i tij në mjekësi

Në të gjitha rastet, pa përjashtim, formimi dhe rritja shoqërohet me aktivitetin e gjenit të tipit HER2. Është ai që është përgjegjës për sa proteina do t'i ndahet trupit të femrës për zhvillimin e indeve të gjirit. Kur qelizat e para të shëndetshme transformohen në malinje, receptorët e gjeneve marrin informacion se kërkohet ndarje shtesë e materialit qelizor.

Gjeni fillon një program për të ndërtuar inde shtesë brenda gjirit, megjithëse në realitet ky material qelizor do të përdoret nga tumori për rritjen dhe zhvillimin e tij. Pra, karcinoma, në fakt, mashtron trupin, dhe e detyron atë të ushqejë kancerin në kurriz të burimeve të veta.

Detyra e analizës së peshkut në kancerin e gjirit është pikërisht identifikimi i mosfunksionimit të gjenit HER2 dhe marrja e masave të duhura të reagimit në drejtim të përshkrimit të trajtimit adekuat mjekësor.

Nëse një test peshku nuk kryhet në kohën e duhur për kancerin e gjirit, atëherë edhe nëse përdoren barna të caktuara në procesin e trajtimit, kjo mund të çojë në faktin se tumori do të vazhdojë të zhvillohet në mënyrë agresive, duke mbuluar të gjitha indet e reja të gjirit. Këto janë të ashtuquajturat pasoja të terapisë së përshkruar gabimisht për shkak të mungesës së të dhënave objektive për funksionimin e gjenit HER2.

Në procesin e kalimit të analizës së peshkut, mjeku fut në gjakun e pacientit substanca të veçanta që përmbajnë elemente ngjyrosëse që mund të vizualizojnë pamjen e çrregullimeve kromozomale. Kështu, mjeku është në gjendje të shohë vizualisht, dhe në të ardhmen të studiojë anomalitë gjenetike në gjenomën e gruas që çoi në zhvillimin e kancerit të gjirit.

Nëse konfirmohen anomalitë në punën e gjenit HER2, atëherë përshkruhet trajtimi i duhur. Nëse jo, atëherë mjeku, duke përdorur teste të tjera, përcakton një arsye tjetër për zhvillimin e kancerit të gjirit.

Një avantazh tjetër i rëndësishëm i analizës së peshkut është se brenda dy ditësh pacienti merr një raport gjithëpërfshirës mbi predispozitën gjenetike për zhvillimin e një kanceri të veçantë. Me ndihmën e këtij testimi mjekësor, është e mundur që njëkohësisht të diagnostikohet patologjia jo vetëm e gjëndrës së qumështit, por edhe e të gjitha organeve të barkut.

Video informuese

Metodat invazive të diagnozës prenatale lejojnë jo vetëm të shikojmë në të ardhmen dhe të parashikojmë me besueshmëri nëse foshnja e palindur ende pret sëmundje të shoqëruara me keqformime intrauterine, por edhe për të zbuluar natyrën dhe shkaqet e patologjive kongjenitale.

Megjithatë, çdo informacion është i vlefshëm vetëm kur është në kohë. Kur bëhet fjalë për gjendjen e zhvillimit të fetusit, shpejtësia e marrjes së rezultateve të testit është e një rëndësie jetike.

Prandaj, metoda FISH, e cila bën të mundur vlerësimin e pranisë së anomalive më të zakonshme të zhvillimit në embrion në kohën më të shkurtër të mundshme, është shumë e kërkuar në diagnostikimin gjenetik.

FISH është një shkurtim që deshifron thelbin e teknologjisë për zbulimin e anomalive kromozomale - hibridizimi fluoreshent in situ - hibridizimi fluoreshent në një mjedis "shtëpia".

Kjo teknikë, e propozuar në fund të viteve 70 të shekullit të kaluar nga J. Goll dhe M.-L. Pardew bazohet në mundësinë e rivendosjes së sekuencës së fragmenteve të acidit nukleik (ADN ose ARN) pas denatyrimit të tyre.

Autorët kanë zhvilluar një metodë që lejon, duke përdorur hibridizimin in situ të sondave (sondave) të etiketuara të ADN-së të krijuar artificialisht dhe materialit citogjenetik të marrë për analizë, për të identifikuar devijimet sasiore dhe cilësore të kromozomeve me interes.

Në fund të shekullit të kaluar, pas përdorimit të suksesshëm të ngjyrave fluoreshente për ngjyrosjen e sondave të ADN-së, metoda FISH mori emrin e saj dhe që nga ajo kohë është përmirësuar dhe larmishme intensivisht.

Metodat moderne të analizës së FISH-it përpiqen të ofrojnë mundësinë e marrjes së informacionit më të plotë për analizën e materialit gjenetik të mbledhur në një procedurë të vetme hibridizimi.

Fakti është se vetëm një numër i kufizuar kromozomesh të të njëjtit material citogjenetik mund të vlerësohet një herë pas hibridizimit. Aftësia për të ri-hibridizuar zinxhirët e ADN-së zvogëlohet herë pas here.

Prandaj, në ky moment në diagnostikimin gjenetik, hibridizimi in situ përdoret më shpesh për t'iu përgjigjur shpejt pyetjeve në lidhje me aneuploidinë më të zakonshme në kromozomet 21, 13, 18, si dhe në kromozomet seksuale X, Y.

Çdo mostër indi ose qelize është e përshtatshme për analizën e FISH.

Në diagnozën prenatale, këto mund të jenë mostra gjaku, derdhje ose.

Shpejtësia e marrjes së rezultateve sigurohet nga fakti se qelizat e marra nga materiali i marrë për analizë nuk kanë nevojë të kultivohen në mjedise ushqyese, duke arritur ndarjen e tyre në numrin e kërkuar, si në metodën klasike të kariotipizimit.

Materiali i përzgjedhur përgatitet posaçërisht për të marrë një suspension qelizor të pastër të koncentruar. Më pas kryhet procesi i denatyrimit të sondës së ADN-së dhe ADN-së vendase të kampionit të provës në një gjendje njëvargëshe dhe procesi i hibridizimit, gjatë të cilit sondat e ADN-së së ngjyrosur inkubohen me ADN-në e kampionit.

Kështu vizualizohen kromozomet e dëshiruara (të ngjyrosura) në qelizë, vlerësohet numri i tyre, struktura e strukturave gjenetike etj. Okuli i një mikroskopi të veçantë fluoreshent ju lejon të merrni parasysh zinxhirët e ADN-së që shkëlqen.

Aktualisht, metoda FISH përdoret gjerësisht për qëllime diagnostikuese për zbulimin e sëmundjeve gjenetike, aberacioneve kromozomale në mjekësinë riprodhuese, onkologji, hematologji, dozimetri biologjike etj.

Si përdoret FISH-diagnoza e fetusit?

Në fushën e mjekësisë riprodhuese, metoda FISH, si një nga metodat e citos molekulare diagnoza gjenetike, përdoret në të gjitha fazat.

• çift.

Për të përcaktuar kariotipin e prindërve të ardhshëm, ai kryhet një herë, pasi gjenomi i njeriut është i pandryshuar gjatë gjithë jetës.

Kariotipi i një çifti para konceptimit të një fëmije do të ndihmojë për të identifikuar nëse prindërit janë bartës të patologjive gjenetike të trashëguara, përfshirë ato të fshehura. Si dhe gjendja e përgjithshme e gjenomit të nënave dhe baballarëve të ardhshëm, e cila mund të ndikojë në suksesin e ngjizjes së një fëmije dhe mbajtjes së shtatzënisë.

Në këtë rast, diagnostikimi i FISH shpesh vepron si një ekzaminim shtesë ndaj kariotipizimit klasik, kur zbulohen patologji kromozomale në materialin e testimit (gjaku venoz i prindërve), nëse dyshohet për mozaicizëm.

Një ekzaminim shtesë me metodën FISH do të konfirmojë ose hedh poshtë me siguri praninë e një anomalie të dyshuar në qelizat e prindit të ardhshëm.

• Studimi i ejakulimit.

Tregohet për vështirësi në riprodhim në çift për shkak të "faktorit mashkullor". Analiza e spermës me metodën FISH do t'ju lejojë të vlerësoni nivelin e spermatozoideve jonormale për sa i përket grupit të kromozomeve, si dhe të përcaktoni nëse një mashkull është bartës i sëmundjeve gjenetike të lidhura me seksin.

Nëse çifti më vonë i drejtohet ngjizjes përmes IVF, analiza e FISH e ejakulatit do t'ju lejojë të zgjidhni spermën më cilësore për fekondimin e vezëve.

• Me IVF.

Për diagnozën gjenetike para implantimit (PGD). Sipas rezultateve të studimeve të kariotipit të prindërve, përcaktohen devijimet e mundshme kromozomale dhe gjenetike që mund të transferohen në embrion.

Falë aftësive të diagnostikimit të FISH, studimi i shëndetit gjenetik të embrioneve që rezultojnë mund të kryhet brenda disa orësh përpara transferimit në zgavrën e mitrës për të siguruar fillimin e shtatzënisë me një fetus të njohur të shëndetshëm.

Përveç kësaj, mundësitë e PGD-së bëjnë të mundur përcaktimin e seksit të embrioneve dhe, për rrjedhojë, "urdhërimin" e seksit të fëmijës së palindur, nëse është e nevojshme.

• Gjatë periudhës së shtatzënisë.

Në diagnozën prenatale: analiza FISH e qelizave fetale të marra nga biopsia e vileve korionike, amniocenteza ose kordocenteza. qendrat mjekësore zakonisht ofrohet krahas studimit gjenetik klasik të qelizave fetale (kariotipizimi).

Kjo metodë është e domosdoshme kur është e nevojshme të merret shpejt një përgjigje për praninë e defekteve kromozomale më të zakonshme në fetus: trisomia në kromozomet 21, 18, 13, devijime në kromozomet X dhe Y, ndonjëherë edhe aneuploidi në kromozomet 14 (ose 17), 15, 16.

Përparësitë e analizës së FISH

Kryerja e analizës gjenetike me metodën FISH, megjithëse sot mbetet një metodë ndihmëse për diagnostikimin e patologjive kromozomale, megjithatë, përshtatshmëria e zbatimit të saj përcakton avantazhet e pamohueshme:

• shpejtësia e marrjes së rezultateve në lidhje me kromozomet e testuar - brenda pak orësh - jo më shumë se 72.

Kjo mund të jetë e rëndësishme nëse fati i shtatzënisë varet nga diagnoza e gjenetistëve;

• ndjeshmëri dhe besueshmëri e lartë e metodës FISH - analiza e suksesshme është e mundur në një sasi të papërfillshme të biomaterialit - mjafton një qelizë, gabimi i rezultateve nuk është më shumë se 0.5%.

Kjo mund të jetë e rëndësishme kur numri i qelizave në kampionin fillestar është i kufizuar, për shembull, kur ndarja e tyre është e dobët.

• mundësia e diagnostikimit të FISH në çdo fazë të shtatzënisë (nga java e 7-të) dhe në çdo kampion biologjik: fragmente korioni, lëngu amniotik, gjak fetusi etj.

Ku mund të marr një diagnostikim FISH?

Në Moskë, metoda FISH për diagnozën prenatale të anomalive kromozomale të fetusit përdoret në qendrat e mëposhtme mjekësore:

Si rregull, klinikat ofrojnë shërbimin e diagnostikimit FISH si pjesë e kariotipizimit të plotë të fetusit me ndërhyrje invazive me një tarifë shtesë. Dhe, si rregull, prindërit e ardhshëm pranojnë të paguajnë ekstra, sepse falë metodës FISH, brenda dy ditësh mund të zbuloni gjënë më të rëndësishme për fëmijën tuaj.

Teknika FISH, hibridizimi fluoreshent in situ, u zhvillua në mesin e viteve 1980 dhe përdoret për të zbuluar praninë ose mungesën e sekuencave specifike të ADN-së në kromozome, si dhe satelitit alfa të ADN-së të vendosur në centromerin e kromozomit 6, CEP6 ( 6p11.1-q11. një).

Kjo ka bërë një ndryshim të rëndësishëm në diagnozë. sëmundjet onkologjike Origjina melanocitare ka ndodhur në lidhje me zbulimin e antigjeneve tumorale. Në sfondin e malinjitetit, përcaktohet një mutacion në tre antigjene: CDK2NA (9p21), CDK4 (12q14) dhe CMM1 (1p). Në këtë drejtim, mundësia e një objektivi diagnoza diferenciale, bazuar në përcaktimin e karakteristikave gjenetike të tumoreve melanocitare të lëkurës, ka një rëndësi të madhe në diagnostikimin e hershëm të melanomës dhe pararendësve të saj.Në bërthamën me një grup gjenesh normale në studim dhe kromozomin 6, dy gjene RREB1 të ngjyrosura me të kuqe, dy Gjenet MYB u ngjyrosën me të verdhë, dy gjene CCND1, të theksuara në të gjelbër dhe dy centromeret e kromozomit 6 të paraqitur me blu. Për qëllime diagnostikuese, përdoren mostra fluoreshente.

Vlerësimi i rezultateve të reaksionit: numërohet numri i sinjaleve të kuqe, të verdha, jeshile dhe blu në 30 bërthama të çdo kampioni, identifikohen katër parametra të varianteve të ndryshme të çrregullimeve gjenetike, në të cilat kampioni është gjenetikisht në përputhje me melanomën. Për shembull, një mostër korrespondon me melanomën nëse numri mesatar i gjenit CCND1 për bërthamë është ≥2.5. Numri i kopjeve të gjeneve të tjera vlerësohet sipas të njëjtit parim. Një medikament konsiderohet FISH-pozitiv nëse plotësohet të paktën një nga katër kushtet. Mostrat në të cilat të katër parametrat janë nën pikat e ndërprerjes konsiderohen FISH-negative.

Përcaktimi i sekuencave specifike të ADN-së në kromozome kryhet në seksione të mostrave të biopsisë ose materialit kirurgjik. Në zbatim praktik, reagimi i FISH është si më poshtë: materiali i provës që përmban ADN në bërthamat e melanociteve përpunohet për të shkatërruar pjesërisht molekulën e tij në mënyrë që të thyejë strukturën me dy fije dhe në këtë mënyrë të lehtësojë aksesin në rajonin e dëshiruar të gjenit. Mostrat klasifikohen sipas vendit të lidhjes me molekulën e ADN-së. Materiali për reaksionin e peshqve në praktika klinike janë seksione të indeve parafine, njolla dhe stampa.

Reagimi FISH ju lejon të gjeni ndryshimet që kanë ndodhur në molekulën e ADN-së si rezultat i rritjes së numrit të kopjeve të një gjeni, humbjes së një gjeni, një ndryshimi në numrin e kromozomeve dhe ndryshimeve cilësore - lëvizjes së gjenit loci në të njëjtin kromozom dhe midis dy kromozomeve.

Për të përpunuar të dhënat e marra duke përdorur reaksionin FISH dhe për të studiuar lidhjen midis numrit të kopjeve të gjeneve të tre grupeve të studiuara, përdoret koeficienti i korrelacionit Spearman.

Melanoma karakterizohet nga një rritje në numrin e kopjeve në krahasim me nevusin dhe nevusin displastik.

Një nevus i thjeshtë, krahasuar me një nevus displastik, ka më pak anomali të numrit të kopjeve (d.m.th., më shumë kopje normale).

Për të ndërtuar rregullat e vendimmarrjes për të parashikuar nëse një mostër i përket një klase të caktuar (diagnoza diferenciale e nevive të thjeshta dhe displazike), përdoret aparati matematikor i "pemëve vendimtare". Kjo qasje e ka provuar veten në praktikë dhe rezultatet e aplikimit të kësaj metode (ndryshe nga shumë metoda të tjera, si rrjetet nervore) mund të interpretohen qartë për të ndërtuar rregulla vendimi për diferencimin e nevive të thjeshta, displazike dhe melanomës. Të dhënat fillestare në të gjitha rastet ishin numrat e kopjeve të katër gjeneve.

Detyra e ndërtimit të një rregulli vendimi për diagnostikimin diferencial ndahet në disa faza. Në fazën e parë, melanoma dhe nevusi diferencohen, pa marrë parasysh llojin e nevusit. Në fazën tjetër, ndërtohet një rregull vendimi për të ndarë nevitë e thjeshta dhe displazike. Së fundi, në fazën e fundit, është e mundur të ndërtohet një "pemë vendimi" për të përcaktuar shkallën e displazisë displazike të nevusit.

Një ndarje e tillë e detyrës së klasifikimit të nevi në nën-detyra bën të mundur arritjen e saktësisë së lartë të parashikimeve në secilën prej fazave. Të dhënat hyrëse për ndërtimin e pemës së vendimit janë të dhëna për numrin e kopjes së katër gjeneve për pacientët e diagnostikuar me melanoma dhe pacientët e diagnostikuar me jo-melanoma (pacientët me lloje të ndryshme të nevusit - të thjeshtë dhe displastik). Për çdo pacient, numrat e kopjeve të gjeneve janë të disponueshme për 30 qeliza.

Kështu, ndarja e detyrës së parashikimit të një diagnoze në disa faza na lejon të ndërtojmë rregulla vendimmarrjeje me precizion të lartë jo vetëm për dallimin midis melanomës dhe nevi-ve, por edhe për përcaktimin e llojit të nevit dhe parashikimin e shkallës së displazisë për një nevus displastik. "Pemët e vendimit" të ndërtuara janë një mënyrë e qartë për të parashikuar një diagnozë bazuar në numrat e kopjeve të gjeneve dhe mund të përdoren lehtësisht në praktikën klinike për të dalluar tumoret beninje, premalinje dhe malinje melanocitare të lëkurës. Metoda shtesë e propozuar e diagnozës diferenciale është veçanërisht e rëndësishme në heqjen e nevive gjigante të pigmentuara kongjenitale dhe nevive displastike te pacientët. fëmijërinë, sepse kur pacientë të tillë shkojnë në institucionet mjekësore, ka një përqindje të lartë të gabimeve diagnostikuese. Rezultatet e përdorimit të metodës së përshkruar janë shumë efektive, këshillohet përdorimi i saj në diagnostikimin e tumoreve të pigmentuara të lëkurës, veçanërisht në pacientët me sindromën FAMM.

Përcaktimi i statusit të tumorit HER-2 me metodën FISH- Studimi i predispozicionit për zhvillimin e tumorit dhe përzgjedhja e trajtimit adekuat në kohë për kancerin e gjirit (BC) ose kancerin e stomakut (GC).

HER-2 (HER-2/neu)- Receptori-2 i faktorit të rritjes së epidermës njerëzore është një proteinë që mund të ndikojë në rritjen e qelizave kancerogjene. Ai krijohet nga një gjen i veçantë i quajtur gjen HER-2/neu. HER-2 është receptori për një faktor specifik rritjeje të quajtur faktori i rritjes së epidermës njerëzore që ndodh natyrshëm te njerëzit. Kur faktori i rritjes epidermale të njeriut lidhet me receptorët HER-2 në qelizat e kancerit të gjirit, ai mund të stimulojë rritjen dhe ndarjen e këtyre qelizave. Në indet e shëndetshme, HER-2 transmeton sinjale që rregullojnë proliferimin dhe mbijetesën e qelizave, por mbishprehja e HER-2 mund të çojë në transformim qelizor malinj.

Hipershprehja e HER-2 në disa nëntipe të kancerit të gjirit çon në rritjen e proliferimit dhe angiogjenezës, disrregullimin e apoptozës (vetë-shkatërrim i programuar gjenetikisht i qelizave). Është treguar se mbishprehja e këtij receptori në indet tumorale në kancerin e gjirit shoqërohet me një ecuri më agresive të sëmundjes, një rritje të potencialit metastatik të tumorit dhe një prognozë më pak të favorshme. Zbulimi i lidhjes së mbishprehjes së HER-2 me një prognozë të dobët të kancerit të gjirit ka çuar në kërkimin e qasjeve të tilla trajtimi që synojnë në mënyrë specifike bllokimin e onkogjenit HER-2/neu (terapi e synuar anti-HER2).

Kanceri i gjirit (BC)- një tumor malinj i indit të gjëndrave të gjirit. RZhM zë vendin e parë në mesin e të gjitha sëmundjeve malinje tek gratë.

Në varësi të pranisë së shënuesve biologjikë të tumorit - shprehja e receptorëve të hormoneve (estrogjenit dhe / ose progesteronit), shprehja e HER-2 - kanceri i gjirit i receptorit hormonal, HER-2-pozitiv dhe i trefishtë negativ është i izoluar.

Llojet HER-2/neu-pozitive (HER-2+) të kancerit të gjirit karakterizohen nga shprehje e lartë e proteinës HER-2/neu.
Llojet HER=2/neu-negative (HER-2-) të kancerit të gjirit karakterizohen nga shprehje e ulët ose mungesë e proteinës HER-2/neu.
Është vlerësuar se një në pesë gra me kancer gjiri është HER-2 pozitive. Shumica e kancereve të gjirit janë të varur nga hormonet: estrogjenet dhe progesteroni kanë një efekt stimulues mbi to (proliferativ dhe neoplazik). Në kancerin e gjirit HER-2 pozitiv, një tepricë e receptorëve HER-2 është e pranishme në sipërfaqen e qelizave tumorale. Ky fenomen quhet “status pozitiv HER-2” dhe diagnostikohet në 15-20% të grave me kancer gjiri.

HER-2- Receptori i faktorit të rritjes epidermale të njeriut tip 2, i cili është i pranishëm në inde dhe normalisht, merr pjesë në rregullimin e ndarjes dhe diferencimit të qelizave. Teprica e saj në sipërfaqen e qelizave tumorale (hiperekspresioni) përcakton rritjen e shpejtë të pakontrolluar të neoplazmës, rrezikun e lartë të metastazave dhe efektivitetin e ulët të disa llojeve të trajtimit. Kanceri i gjirit HER-2 pozitiv është një formë veçanërisht agresive e sëmundjes, kështu që përcaktim i saktë Statusi HER-2 është i një rëndësie kyçe për zgjedhjen e taktikave të trajtimit.

Kanceri i stomakut (SC)- një tumor malinj me origjinë nga epiteli i mukozës gastrike.

Kanceri i stomakut renditet i 4-ti në strukturën e sëmundshmërisë onkologjike dhe i dyti në strukturën e vdekshmërisë onkologjike në botë. Incidenca e kancerit të stomakut tek meshkujt është 2 herë më e lartë se tek femrat. Rusia i përket rajoneve me një incidencë të lartë të kancerit të stomakut dhe vdekshmëri nga kjo sëmundje. Diagnoza e gastroezofageale fazat e hershme e vështirë për shkak të ecurisë së gjatë asimptomatike të sëmundjes. Shpesh kanceri i stomakut zbulohet në fazat e vona, kur shkalla e mbijetesës 5-vjeçare nuk kalon 5-10%, dhe kimioterapia mbetet i vetmi trajtim.

Metoda kryesore e trajtimit të kancerit të stomakut është kirurgjikale. Megjithatë, në shumicën e pacientëve, në momentin e diagnostikimit, përcaktohet një proces i përhapur tumoral, i cili e bën të pamundur kryerjen operacion radikal dhe kërkon terapi sistemike medikamentoze. Kryerja e kimioterapisë rrit ndjeshëm statistikisht mbijetesën e përgjithshme të pacientëve me kancer gastrik metastatik, duke përmirësuar cilësinë e jetës së tyre.

Onkogjeni HER-2 (erbB-2) fillimisht u identifikua në tumoret e gjirit. Amplifikimi dhe mbishprehja e këtij gjeni është një ngjarje relativisht specifike për karcinomat e gjirit dhe praktikisht nuk ndodh në tumore të lokalizimeve të tjera. Kanceri i stomakut duket të jetë një nga përjashtimet e pakta: aktivizimi i HER-2 vihet re në afërsisht 10-15% të rasteve. neoplazite malinje të këtij organi dhe lidhet me ecurinë agresive të sëmundjes.

Shprehja e tepërt e HER-2 është një faktor i dobët prognostik. Sipas studimeve të ndryshme, amplifikimi i gjenit HER-2 në pacientët me kancer gastrik lidhet me normat e ulëta të mbijetesës së përgjithshme.

Metoda FISH përdoret për të vlerësuar statusin e HER-2 në GC dhe BC.

PESHK- hulumtimi ju lejon të përcaktoni ndryshimet cilësore dhe sasiore në kromozome për diagnostikimin e sëmundjeve malinje të gjakut dhe tumoreve të ngurta.

Sot, studimet e FISH janë përdorur gjerësisht në të gjithë botën.

Metoda FISH (hibridizimi fluoreshent in situ) - studimi i numrit të gjeneve HER-2/neu brenda qelizave kancerogjene.

Indikacionet:

• kanceri i gjirit - për qëllime të prognozës dhe zgjedhjes së terapisë;
• kanceri i stomakut - për qëllime të prognozës dhe zgjedhjes së terapisë.

Kërkohet protokolli histologjik dhe protokolli imunohistokimik, xhami IHC.

Interpretimi i rezultateve
Rezultatet e testit FISH shprehen si më poshtë:

1. Pozitiv (përmbajtja e shtuar, ka përforcim të gjenit HER-2):

• Kanceri i gjirit HER-2 pozitiv;

• Kanceri i gjirit HER-2 negativ.

Një metodë moderne e analizës citogjenetike që lejon përcaktimin e ndryshimeve cilësore dhe sasiore në kromozome (përfshirë zhvendosjet dhe mikrodelecionet) dhe përdoret për diagnozën diferenciale të sëmundjeve malinje të gjakut dhe tumoreve të ngurta.

Sinonime ruse

Hibridizimi fluoreshent in situ

Analiza e peshqve

Sinonimet e anglishtes

Fluoreshenca në vend hibridizimi

Metoda e hulumtimit

Hibridizimi fluoreshent in situ.

Çfarë biomaterial mund të përdoret për kërkime?

Mostra e indit, mostra e indit në bllok parafine.

Si të përgatitemi siç duhet për kërkime?

Nuk kërkohet përgatitje.

Informacione të përgjithshme rreth studimit

Hibridizimi fluoreshent në vend (FISH) në- situ hibridizimi) është një nga më metodat moderne diagnoza e anomalive kromozomale. Ai bazohet në përdorimin e sondave të ADN-së të etiketuara me një etiketë fluoreshente. Sondat e ADN-së janë fragmente të ADN-së të sintetizuara posaçërisht, sekuenca e të cilave është plotësuese me sekuencën e ADN-së të kromozomeve aberrante të studiuara. Kështu, mostrat e ADN-së ndryshojnë në përbërje: mostra të ndryshme, specifike të ADN-së përdoren për të përcaktuar anomalitë e ndryshme kromozomale. Sondat e ADN-së gjithashtu ndryshojnë në madhësi: disa mund të drejtohen në një kromozom të tërë, të tjerët në një vend specifik.

Gjatë procesit të hibridizimit, nëse në kampionin e provës ka kromozome aberrante, ato lidhen me sondën e ADN-së, e cila, kur ekzaminohet me mikroskop fluoreshent, përcaktohet si sinjal fluoreshent (rezultat pozitiv i testit FISH). Në mungesë të kromozomeve aberrante, mostrat e palidhura të ADN-së "lahen" gjatë reaksionit, i cili, kur ekzaminohet duke përdorur një mikroskop fluoreshent, përkufizohet si mungesë e një sinjali fluoreshent (rezultati negativ i testit FISH). Metoda bën të mundur vlerësimin jo vetëm të pranisë së një sinjali fluoreshent, por edhe të intensitetit dhe lokalizimit të tij. Pra, testi FISH nuk është vetëm një metodë cilësore, por edhe sasiore.

Testi FISH ka një sërë avantazhesh ndaj metodave të tjera citogjenetike. Para së gjithash, studimi FISH mund të zbatohet si për bërthamat metafazore ashtu edhe për ato ndërfazore, domethënë për qelizat që nuk ndahen. Ky është avantazhi kryesor i FISH ndaj metodave klasike të kariotipizimit (p.sh. ngjyrosja e kromozomeve Romanowsky-Giemsa), të cilat aplikohen vetëm në bërthamat metafazë. Kjo e bën studimin FISH një metodë më të saktë për zbulimin e anomalive kromozomale në indet me aktivitet të ulët proliferativ, duke përfshirë tumoret e ngurta.

Meqenëse testi FISH përdor ADN të qëndrueshme të bërthamave ndërfazore, një shumëllojshmëri biomaterialesh mund të përdoren për kërkime - aspirata biopsie me aspirim me kënd të imët, njolla, aspirata të palcës kockore, ekzemplarë biopsie dhe, më e rëndësishmja, fragmente të indeve të ruajtura, siç janë blloqet histologjike. Kështu, për shembull, një test FISH mund të kryhet me sukses në përgatitjet e përsëritura të marra nga një bllok histologjik i një ekzemplar të biopsisë së gjirit kur konfirmohet diagnoza e "adenokarcinomës së gjirit" dhe nevoja për të përcaktuar statusin HER2/neu të tumorit. Duhet theksuar se për momentin studimi FISH rekomandohet si test konfirmues kur merret një rezultat i papërcaktuar i studimit imunohistokimik të tumorit për markerin tumoral HER2/neu (IHC 2+).

Një avantazh tjetër i FISH është aftësia e tij për të zbuluar mikrodelecione që nuk zbulohen me kariotipizimin klasik ose PCR. Kjo është e një rëndësie të veçantë në rastet e sindromës së dyshuar DiGeorge dhe sindromës velokardiofaciale.

Testi FISH përdoret gjerësisht në diagnostikimin diferencial të sëmundjeve malinje, kryesisht në onkohematologji. Anomalitë kromozomale të shoqëruara me foto klinike dhe të dhënat e studimeve imunohistokimike janë bazë për klasifikimin, përcaktimin e taktikave të trajtimit dhe prognozën e sëmundjeve limfo- dhe mieloproliferative. Shembuj klasikë janë leucemia mieloide kronike - t (9;22), akute leucemia promielocitare– t (15;17), leucemia limfocitare kronike- trisomia 12 dhe të tjera. Përsa i përket tumoreve të ngurta, studimi FISH më i përdorur është në diagnostikimin e kancerit të gjirit. Vezika urinare, zorrës së trashë, neuroblastoma, retinoblastoma dhe të tjera.

Studimi FISH mund të përdoret gjithashtu në diagnozën prenatale dhe para implantimit.

Testi FISH shpesh kryhet në kombinim me metoda të tjera të diagnostikimit molekular dhe citogjenetik. Rezultati i këtij studimi vlerësohet në lidhje me rezultatet e të dhënave shtesë laboratorike dhe instrumentale.

Për çfarë përdoret hulumtimi?

• Për diagnozën diferenciale të sëmundjeve malinje (gjak dhe organe të forta).

Kur është planifikuar studimi?

• Nëse dyshoni për praninë e një sëmundjeje malinje të gjakut ose tumoreve të ngurta, taktikat e trajtimit dhe prognoza e të cilave varet nga përbërja kromozomale e klonit të tumorit.

Çfarë nënkuptojnë rezultatet?

Rezultati pozitiv:

• Prania e kromozomeve aberrante në mostrën e provës.

Rezultati negativ:

• Mungesa e kromozomeve aberrante në mostrën e provës.

Çfarë mund të ndikojë në rezultatin?

• Numri i kromozomeve aberrante.

• Studimi imunohistokimik i materialit klinik (duke përdorur 1 antitrup)
• Studimi imunohistokimik i materialit klinik (duke përdorur 4 ose më shumë antitrupa)
• Përcaktimi i statusit të tumorit HER2 nga FISH
• Përcaktimi i statusit të tumorit HER2 me metodën CISH

Kush e urdhëron studimin?

Onkolog, pediatër, obstetër-gjinekolog, gjenetist.

Letërsia

• Wan TS, Ma ES. Citogjenetika molekulare: një mjet i domosdoshëm për diagnostikimin e kancerit. Antikancer Res. 2005 korrik-gusht; 25 (4): 2979-83.
• Kolialexi A, Tsangaris GT, Kitsiou S, Kanavakis E, Mavrou A. Ndikimi i studimeve citogjenetike dhe molekulare citogjenetike mbi malinje hematologjike. Chang Gung Med J. 2012 Mars-Prill;35(2):96-110.
• Mühlmann M. Citogjenetika molekulare në qelizat metafazë dhe ndërfazore për kancerin dhe kërkimin gjenetik, diagnozën dhe prognozën. Aplikimi në seksionet e indeve dhe pezullimet e qelizave. Genet Mol Res. 2002 30 qershor; 1 (2): 117-27.