रीफ अनुसंधान विधि। इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया। तंत्र, घटक, अनुप्रयोग। सीरोलॉजिकल अध्ययन के परिणामों की व्याख्या कैसे करें

यह विधि ल्यूमिनेसेंस की घटना का उपयोग करती है।

ल्यूमिनेसेंस की घटना का सार इस तथ्य में निहित है कि अवशोषण पर विभिन्न प्रकारकुछ पदार्थों के अणुओं द्वारा ऊर्जा (प्रकाश, विद्युत, आदि), उनके परमाणु उत्तेजित अवस्था में चले जाते हैं, और फिर, अपनी मूल स्थिति में लौटकर, वे अवशोषित ऊर्जा को प्रकाश विकिरण के रूप में छोड़ते हैं।

आरआईएफ में, ल्यूमिनेसिसेंस खुद को प्रतिदीप्ति के रूप में प्रकट करता है - यह एक चमक है जो विकिरण के क्षण में रोमांचक प्रकाश के साथ होती है और समाप्त होने के तुरंत बाद बंद हो जाती है।

कई पदार्थों और जीवित सूक्ष्मजीवों की अपनी प्रतिदीप्ति (तथाकथित प्राथमिक) होती है, लेकिन इसकी तीव्रता बहुत कम होती है। वे पदार्थ जिनमें तीव्र प्राथमिक प्रतिदीप्ति होती है और जिनका उपयोग गैर-फ्लोरोसेंट पदार्थों को फ्लोरोसेंट गुण प्रदान करने के लिए किया जाता है, फ्लोरोक्रोम कहलाते हैं। इस तरह के प्रेरित प्रतिदीप्ति को द्वितीयक कहा जाता है।

फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी में प्रतिदीप्ति को उत्तेजित करने के लिए, स्पेक्ट्रम के पराबैंगनी या नीले-बैंगनी भाग (तरंग दैर्ध्य 300-460 एनएम) का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है। इन उद्देश्यों के लिए, प्रयोगशालाओं में विभिन्न मॉडलों के ल्यूमिनसेंट माइक्रोस्कोप हैं - एमएल-1-एमएल -4, "लुमम"।

वायरोलॉजिकल अभ्यास में, फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी के दो मुख्य तरीकों का उपयोग किया जाता है: फ्लोरोक्रोमाइजेशन और फ्लोरोसेंट एंटीबॉडी (या आरआईएफ)।

फ्लोरोक्रोमाइजेशन- यह उनके ल्यूमिनेसिसेंस की ताकत और कंट्रास्ट को बढ़ाने के लिए फ्लोरोक्रोम के साथ तैयारी का उपचार है। सबसे बड़ी रुचि फ्लोरोक्रोम एक्रिडीन नारंगी है, जो न्यूक्लिक एसिड के पॉलीक्रोमैटिक फ्लोरोसेंस का कारण बनती है। इसलिए, जब इस फ्लोरोक्रोम के साथ तैयारी का इलाज किया जाता है, तो डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिक एसिड चमकीले हरे रंग में, और राइबोन्यूक्लिक एसिड - रूबी लाल।

आरआईएफ विधि में यह तथ्य शामिल है कि फ्लोरोक्रोम से जुड़े एंटीबॉडी एक समरूप प्रतिजन के साथ एक विशिष्ट संबंध में प्रवेश करने की क्षमता बनाए रखते हैं। परिणामी एंटीजन + एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स, इसमें फ्लोरोक्रोम की उपस्थिति के कारण, एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप के तहत एक विशिष्ट चमक द्वारा पता लगाया जाता है।

एंटीबॉडी प्राप्त करने के लिए, अत्यधिक सक्रिय हाइपरइम्यून सीरा का उपयोग किया जाता है, जिसमें से एंटीबॉडी को अलग किया जाता है और फ्लोरोक्रोम के साथ लेबल किया जाता है। सबसे अधिक इस्तेमाल किए जाने वाले फ्लोरोक्रोम एफआईटीसी-फ्लोरेसिन आइसोथियोसाइनेट (हरी बत्ती) और पीसीएक्स-रोडामाइन सल्फोक्लोराइड (लाल बत्ती) हैं। फ्लोरोक्रोम के साथ लेबल किए गए एंटीबॉडी को संयुग्म कहा जाता है।

तैयारी की तैयारी और धुंधला करने की विधि इस प्रकार है:

• स्मीयर तैयार करें, अंगों से या कवर स्लिप पर प्रिंट - कांच की स्लाइड पर एक संक्रमित सेल संस्कृति; हिस्टोसेक्शन का भी इस्तेमाल किया जा सकता है;
• तैयारियों को हवा में सुखाया जाता है और ठंडे एसीटोन में कमरे के तापमान पर या शून्य से 15 डिग्री सेल्सियस (15 मिनट से 4-16 घंटे तक) पर तय किया जाता है;
• प्रत्यक्ष या अप्रत्यक्ष तरीके से दागदार; क्रॉस में अनुमानित चमक की तीव्रता के अनुसार एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप के तहत रिकॉर्ड रखें।

समानांतर में, एक स्वस्थ जानवर से तैयारी तैयार करें और दाग दें - नियंत्रण।

फ्लोरोसेंट एंटीबॉडी लगाने के दो मुख्य तरीके हैं: प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष।

प्रत्यक्ष विधि (एकल चरण). एक संयुग्म (संदिग्ध वायरस के लिए फ्लोरोसेंट सीरम) को एक नम कक्ष में 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 30 मिनट के लिए ऊष्मायन निश्चित तैयारी पर लागू किया जाता है। फिर दवा को अनबाउंड संयुग्म से खारा (पीएच 7.2 - 7.5) से धोया जाता है, हवा में सुखाया जाता है, गैर-फ्लोरोसेंट तेल लगाया जाता है और माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है।

प्रत्यक्ष विधि एंटीजन की पहचान और पहचान की अनुमति देती है। ऐसा करने के लिए, आपके पास प्रत्येक वायरस के लिए एक फ्लोरोसेंट सीरम होना चाहिए।

अप्रत्यक्ष विधि (दो चरण). संदिग्ध वायरस के प्रति एंटीबॉडी युक्त एक लेबल रहित सीरम को निर्धारित तैयारी पर लगाया जाता है, 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए इनक्यूबेट किया जाता है, अनबाउंड एंटीबॉडी को धोया जाता है। तैयारी के लिए एक फ्लोरोसेंट एंटी-प्रजाति सीरम लागू किया जाता है, जो उस प्रकार के जानवर के अनुरूप होता है जो समरूप एंटीवायरल एंटीबॉडी का उत्पादन करता है, और 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए ऊष्मायन किया जाता है। फिर दवा को अनबाउंड लेबल वाले एंटीबॉडी से धोया जाता है, हवा में सुखाया जाता है, गैर-फ्लोरोसेंट तेल लगाया जाता है और एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है।

एंटी-प्रजाति सीरा जानवरों को उन प्रजातियों के ग्लोब्युलिन से प्रतिरक्षित करके प्राप्त किया जाता है जो एंटी-वायरल एंटीबॉडी के उत्पादक के रूप में काम करते हैं। इसलिए, यदि खरगोशों पर एंटीवायरल एंटीबॉडी प्राप्त की जाती हैं, तो फ्लोरोसेंट एंटी-खरगोश सीरम का उपयोग किया जाता है।

अप्रत्यक्ष विधि न केवल एंटीजन का पता लगाने और पहचानने की अनुमति देती है, बल्कि एंटीबॉडी टिटर का पता लगाने और निर्धारित करने की भी अनुमति देती है। इसके अलावा, यह विधि एकल लेबल वाले सीरा के साथ विभिन्न विषाणुओं के प्रतिजनों का पता लगा सकती है, क्योंकि यह प्रजाति-विरोधी सीरा के उपयोग पर आधारित है। गिनी पिग ग्लोब्युलिन के खिलाफ एंटी-खरगोश, एंटी-बोवाइन, एंटी-हॉर्स सेरा और सेरा का अधिक सामान्यतः उपयोग किया जाता है।

अप्रत्यक्ष पद्धति के कई संशोधन विकसित किए गए हैं। पूरक का उपयोग करने वाली विधि सबसे अधिक ध्यान देने योग्य है। विधि में निष्क्रिय गैर-फ्लोरोसेंट विशिष्ट सीरम और गिनी पिग पूरक को निर्धारित तैयारी के लिए लागू करना, इसे 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए रखना, इसे धोना, और प्रतिजन + एंटीबॉडी + पूरक परिसर का पता लगाना, फ्लोरोसेंट विरोधी पूरक सीरम लागू करना शामिल है। 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए रखकर, धोया, हवा में सुखाया और एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप के तहत जांच की गई।

आरआईएफ लाभ: उच्च विशिष्टता और संवेदनशीलता; तकनीक स्थापित करने में आसानी; घटकों की न्यूनतम संख्या की आवश्यकता है। यह एक एक्सप्रेस डायग्नोस्टिक पद्धति है, क्योंकि आप कुछ ही घंटों में उत्तर प्राप्त कर सकते हैं। नुकसान में ल्यूमिनेसेंस की तीव्रता का आकलन करने में व्यक्तिपरकता शामिल है और दुर्भाग्य से, कभी-कभी फ्लोरोसेंट सेरा खराब गुणवत्ता के होते हैं। वर्तमान में, वायरल पशु रोगों के निदान में आरआईएफ का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

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इम्यूनोफ्लोरेसेंस टेस्ट (आईएफ) एक सीरोलॉजिकल टेस्ट है जो ज्ञात एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाता है। विधि में सना हुआ स्मीयरों की माइक्रोस्कोपी शामिल है।

इस प्रतिक्रिया का उपयोग इम्यूनोलॉजी, वायरोलॉजी और माइक्रोबायोलॉजी में किया जाता है। यह आपको वायरस, बैक्टीरिया, कवक, प्रोटोजोआ और आईसीसी की उपस्थिति निर्धारित करने की अनुमति देता है। संक्रामक सामग्री में वायरल और बैक्टीरियल एंटीजन का पता लगाने के लिए नैदानिक ​​अभ्यास में आरआईएफ का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। यह विधि फ्लोरोक्रोम की क्षमता पर आधारित है कि वह प्रोटीन को उनकी प्रतिरक्षात्मक विशिष्टता का उल्लंघन किए बिना बांध सके। यह मुख्य रूप से मूत्र पथ के संक्रमण के निदान में प्रयोग किया जाता है।

इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया को अंजाम देने के निम्नलिखित तरीके हैं: प्रत्यक्ष, अप्रत्यक्ष, पूरक के साथ। प्रत्यक्ष विधि में फ्लोरोक्रोम के साथ सामग्री को धुंधला करना शामिल है। एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप की यूवी किरणों में रोगाणुओं या ऊतकों के एंटीजन की चमकने की क्षमता के कारण, उन्हें चमकीले रंग की हरी सीमा वाली कोशिकाओं के रूप में परिभाषित किया जाता है।

अप्रत्यक्ष विधि में एंटीजन + एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स का निर्धारण होता है। ऐसा करने के लिए, प्रायोगिक सामग्री का निदान के लिए लक्षित रोगाणुरोधी खरगोश सीरम के एंटीबॉडी के साथ इलाज किया जाता है। एंटीबॉडी के रोगाणुओं से बंधे होने के बाद, उन्हें उन लोगों से अलग किया जाता है जो बाध्य नहीं होते हैं और फ्लोरोक्रोम के साथ लेबल किए गए एंटी-खरगोश सीरम के साथ इलाज किया जाता है। उसके बाद, जटिल सूक्ष्म जीव + रोगाणुरोधी एंटीबॉडी + एंटी-खरगोश एंटीबॉडी को एक पराबैंगनी माइक्रोस्कोप का उपयोग करके उसी तरह निर्धारित किया जाता है जैसे प्रत्यक्ष विधि में होता है।

उपदंश के निदान में इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया अपरिहार्य है। फ्लोरोक्रोम के प्रभाव में, उपदंश के प्रेरक एजेंट को एक पीले-हरे रंग की सीमा वाली कोशिका के रूप में निर्धारित किया जाता है। चमक की अनुपस्थिति का अर्थ है कि रोगी उपदंश से संक्रमित नहीं है। यह विश्लेषण अक्सर एक सकारात्मक वासरमैन प्रतिक्रिया के साथ निर्धारित किया जाता है। यह विधि निदान में बहुत प्रभावी है, क्योंकि यह आपको रोगज़नक़ की पहचान करने की अनुमति देती है प्रारंभिक चरणबीमारी।

इस तथ्य के अलावा कि आरआईएफ आपको सिफलिस का निदान करने की अनुमति देता है, इसका उपयोग क्लैमाइडिया, माइकोप्लाज्मा, ट्राइकोमोनास जैसे रोगजनकों के साथ-साथ गोनोरिया और जननांग दाद के रोगजनकों की उपस्थिति को निर्धारित करने के लिए भी किया जाता है।

विश्लेषण के लिए, स्मीयर या शिरापरक रक्त का उपयोग किया जाता है। स्मीयर लेने की प्रक्रिया पूरी तरह से दर्द रहित होती है और इससे कोई खतरा नहीं होता है। इस विश्लेषण की तैयारी करें। इसके बारह घंटे पहले, स्वच्छता उत्पादों, जैसे कि थोड़ा या जैल का उपयोग करने की अनुशंसा नहीं की जाती है। साथ ही, कभी-कभी, डॉक्टर की गवाही के अनुसार, उकसावे को अंजाम दिया जाता है। ऐसा करने के लिए, वे मसालेदार भोजन या शराब लेने की सलाह देते हैं, या एक उत्तेजक पदार्थ का इंजेक्शन, जैसे कि गोनोवाक्सिन या पाइरोजेनल, किया जाता है। इसके अलावा, के बीच का अंतराल जीवाणुरोधी दवाएंऔर विश्लेषण का वितरण कम से कम चौदह दिन का होना चाहिए।

परिणामों का मूल्यांकन करते समय, किसी को इस तथ्य को ध्यान में रखना चाहिए कि न केवल जीवित जीवाणुओं में, बल्कि मृत लोगों में भी, विशेष रूप से क्लैमाइडिया के लिए ल्यूमिनेसिसेंस मनाया जाता है। एंटीबायोटिक्स के एक कोर्स के बाद, मृत क्लैमाइडिया कोशिकाएं भी चमकती हैं।

रोगी की उचित तैयारी और स्मीयर लेने की तकनीक के पालन के साथ, यह विश्लेषण आपको प्रारंभिक अवस्था में रोगों की पहचान करने की अनुमति देता है, जो कि बहुत महत्वपूर्ण है समय पर इलाज. इस पद्धति के सकारात्मक पहलू परिणाम प्राप्त करने के लिए कम समय, कार्यान्वयन में आसानी और विश्लेषण की कम लागत हैं।

नुकसान में यह तथ्य शामिल है कि विश्लेषण के लिए अध्ययन के तहत पर्याप्त मात्रा में सामग्री की आवश्यकता होती है। इसके अलावा, केवल एक अनुभवी विशेषज्ञ ही परिणामों का मूल्यांकन कर सकता है।

1942 में कून्स द्वारा खोजा गया, इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया एक नई शोध पद्धति नहीं है। हालांकि, हाइब्रिडोमा प्रौद्योगिकियों का आगमन, जिसने मोनोक्लोनल एंटीबॉडी प्राप्त करना संभव बना दिया, ने इस प्रतिक्रिया को "दूसरा जीवन" दिया, क्योंकि उनके उपयोग ने इस प्रतिक्रिया की संवेदनशीलता और इसकी विशिष्टता को कई गुना बढ़ाना संभव बना दिया।

और आज हम आपको गर्भावस्था के दौरान वयस्क पुरुषों और महिलाओं के लिए कून्स डायग्नोस्टिक पद्धति के रूप में प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस (आरआईएफ) की प्रतिक्रिया के बारे में विस्तार से बताएंगे।

एक इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया क्या है

एक सटीक निदान प्राप्त करने के लिए एक उत्कृष्ट अवसर का प्रतिनिधित्व करते हुए, इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया आपको रोग संबंधी सामग्री में प्रेरक एजेंट की उपस्थिति निर्धारित करने की अनुमति देती है। इसके लिए, एक ऐसी सामग्री से स्मीयर का उपयोग किया जाता है जिसे विशेष रूप से लेबल FITC (फ्लोरेसिन आइसोथियोसाइनेट) के साथ संसाधित किया जाता है और एक विषम विश्लेषण के रूप में अध्ययन किया जाता है।

परिणाम प्राप्त करने के लिए, एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप का उपयोग किया जाता है, इसके ऑप्टिकल सिस्टम में एक दिए गए तरंग दैर्ध्य वाले नीले-बैंगनी या पराबैंगनी प्रकाश के साथ तैयारी प्रदान करने के लिए प्रकाश फिल्टर का एक सेट होता है। यह स्थिति फ़्लोरोक्रोम को एक निश्चित सीमा पर चमकने देती है। शोधकर्ता चमक के गुणों, उसकी प्रकृति, वस्तुओं के आकार और उनकी सापेक्ष स्थिति का मूल्यांकन करता है।

यह किसे सौंपा गया है

कई वायरल रोगों के निदान में एक इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया का संचालन निर्धारित किया जा सकता है। विशेष रूप से, यह निम्नलिखित कारकों की पहचान करने के लिए एक व्यापक परीक्षा के लिए निर्धारित है:

• शरीर में एक वायरस की उपस्थिति;
• साल्मोनेला संक्रमण;
• शरीर में कुछ एंटीजन का अस्तित्व;
• क्लैमाइडिया, माइकोप्लाज्मा और अन्य सूक्ष्मजीवों के साथ शरीर के संक्रमण की संभावना का पता चलता है जो मानव वायरल रोगों को शुरू करने की क्षमता रखते हैं;
• पशुओं में वायरल रोगों का निदान।

सूचीबद्ध संकेत मनुष्यों और जानवरों में पाए जाने पर इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया के उपयोग की अनुमति देते हैं। वायरल रोगअलग प्रकृति।

के उद्देश्य

चूंकि इस निदान पद्धति के कई फायदे हैं, जिसमें इसकी उच्च दक्षता, संचालन की गति और परिणाम प्राप्त करने के साथ-साथ बड़ी संख्या में contraindications की अनुपस्थिति शामिल है, इसका उपयोग शरीर में उपस्थिति को निर्धारित करने के लिए किया जाता है। विषाणु संक्रमण. इसलिए, इस विश्लेषण को निदान करने और स्पष्ट करने के लिए निर्धारित किया जा सकता है, जिसके आधार पर एक उपचार आहार निर्धारित किया जाता है।

प्रक्रिया का कारण नहीं है असहजता, इसके लिए विश्लेषण के लिए सामग्री प्राप्त करना आवश्यक है, जो किसी भी शरीर के तरल पदार्थ से लिया जाता है: लार, थूक, श्लेष्म झिल्ली की सतह से स्क्रैपिंग। विश्लेषण के लिए रक्त भी लिया जा सकता है। इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया की आवृत्ति उपस्थित चिकित्सक द्वारा निर्धारित की जाती है, जिसे शरीर में होने वाली प्रक्रियाओं की गतिशीलता पर डेटा प्राप्त करने की आवश्यकता होती है।

चूंकि यह विश्लेषण किसी व्यक्ति के शरीर और सामान्य कल्याण दोनों को नुकसान नहीं पहुंचाता है, इसलिए यदि आवश्यक हो तो इसे निर्धारित किया जा सकता है।

ऐसी प्रक्रिया के प्रकार

आज, इस विश्लेषण की कई किस्मों का उपयोग किया जाता है, जिनमें से प्रत्येक में कई विशिष्ट विशेषताएं हैं और आपको शरीर में होने वाली प्रक्रियाओं की सबसे विस्तृत तस्वीर प्राप्त करने की अनुमति मिलती है।

इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रियाओं के प्रकारों में शामिल हैं:

1. - सबसे तेजी से विकसित होने वाले निदानों में से एक, यह विश्लेषण सीरियल dilutions के उपयोग के बिना मात्रात्मक डेटा प्राप्त करना संभव बनाता है। तरल के ऑप्टिकल घनत्व के प्राप्त मापों का उपयोग करके, वांछित घटक के एकाग्रता स्तर को सटीक रूप से निर्धारित करना संभव है। इस प्रकार के विश्लेषण की व्यापक संभावनाओं का उपयोग तब किया जाता है जब इसके कार्यान्वयन के लिए मोनोक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग किया जाता है, जिससे संक्रामक प्रक्रिया के चरण, इसकी गंभीरता को निर्धारित करना संभव हो जाता है;
2. डीएनए निदान- यह विधि न्यूक्लियोटाइड के पूरक बंधन पर आधारित है, जिसके लिए तरल पदार्थ जैसे लार, रक्त, मस्तिष्कमेरु द्रव, मूत्र, थूक, बायोप्सी नमूने और रक्त का उपयोग किया जा सकता है। यह विधि शरीर में पेपिलोमावायरस की उपस्थिति का सबसे प्रभावी ढंग से पता लगाती है, हालांकि, कई आधुनिक परीक्षण प्रणालियां कभी-कभी गलत सकारात्मक और गलत नकारात्मक परिणाम दे सकती हैं। उनका कारण विशिष्ट डीएनए के विश्लेषण के लिए द्रव के नमूनों का दूषित होना हो सकता है, जिसकी उपस्थिति में नेस्टेड या कुल चरित्र हो सकता है;
3. इम्यूनोक्रोमैटोग्राफी- शरीर में पैथोलॉजिकल वातावरण और वायरस की उपस्थिति का निर्धारण करने के लिए इस पद्धति की विशिष्टता प्रतिक्रिया के दौरान लेबल एंटीबॉडी का उपयोग है। इस निदान पद्धति का उपयोग समूह ए स्ट्रेप्टोकोकी के साथ-साथ निम्न प्रकार के क्लैमाइडिया के साथ संक्रमण की प्रक्रिया की गतिविधि की पहचान और डिग्री के लिए किया जाता है: क्लैमिकिट आर इनोटेक इंटरनेशनल, ऑक्सॉइड से क्लियरव्यू टीएम क्लैमाइडिया। इस शोध पद्धति पर आधारित उच्चतम संवेदनशीलता, परीक्षण प्रणाली को ध्यान में रखते हुए। आमतौर पर एक अभिविन्यास परीक्षण के रूप में उपयोग किया जाता है।

सूचीबद्ध किस्मों में आचरण की विशेषताएं और परिणामों की विशिष्ट विशेषताएं हैं, हालांकि, उन सभी का उद्देश्य शरीर में रोग संबंधी सूक्ष्मजीवों और वायरस की उपस्थिति के साथ-साथ उनके प्रजनन और गतिविधि की डिग्री पर डेटा प्राप्त करना है।

करने के लिए संकेत

शरीर में किसी भी प्रकार के पैथोलॉजिकल वातावरण का पता लगाने के लिए एक इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया निर्धारित की जा सकती है।

क्लैमाइडिया, ट्राइकोमोनैड्स, गोनोकोकी और, साथ ही सभी प्रकार के लैम्ब्लिया, इस प्रकार के निदान के दौरान निर्धारित किए जाते हैं। और, और अन्य बीमारियों के लिए भी आरआईएफ की आवश्यकता होती है। इसके क्रियान्वयन के लिए चिकित्सक की नियुक्ति अनिवार्य है।

धारण करने के लिए मतभेद

चूंकि इस प्रतिक्रिया के लिए परीक्षण सामग्री के रूप में किसी भी प्रकार के शरीर के तरल पदार्थ की आवश्यकता होती है, इसलिए उन्हें लेना आमतौर पर मुश्किल नहीं होता है और इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया करने के लिए कोई मतभेद नहीं होता है। हालांकि, गर्भावस्था के दौरान और 6 महीने से कम उम्र के बच्चों में, शोध के लिए सैंपलिंग अत्यंत सावधानी के साथ की जाती है।

contraindications की अनुपस्थिति इस प्रकार के निदान की अनुमति देती है जब एक डॉक्टर सभी रोगियों को निर्धारित करता है। इसकी सुरक्षा की गारंटी एक कीटाणुरहित उपकरण और डिस्पोजेबल सीरिंज के उपयोग से है।

प्रक्रिया की तैयारी

इस विश्लेषण के लिए सामग्री लेने की कोई विशेषता नहीं है। उसके लिए खून खाली पेट लिया जाता है, ताकि उसमें पदार्थ की कोई उच्च सामग्री न हो जो सच्ची गवाही को बदल सके और झूठी तस्वीर दे सके।

कैसी है सैंपलिंग

चूंकि विश्लेषण के लिए किसी विशेष तैयारी की आवश्यकता नहीं होती है, केवल 12 घंटे पहले इसे खाने से बाहर रखा जाता है और उपयोग की कमी होती है दवाईविश्लेषण के लिए शरीर के तरल पदार्थ को लेने के लिए परीक्षण सामग्री को एक सामान्य प्रक्रिया के रूप में लिया जाता है।

प्रक्रिया के दौरान व्यक्तिपरक संवेदनाएं संवेदनशीलता के आधार पर भिन्न हो सकती हैं।

परिणामों को समझना

आधुनिक परीक्षण प्रणालियों का उपयोग आपको सबसे सटीक विश्लेषण परिणाम प्राप्त करने की अनुमति देता है। परिणाम को समझने के लिए निम्नलिखित डेटा का उपयोग किया जाता है:

• प्रतिदीप्ति तीव्रता की डिग्री;
• प्रतिदीप्ति छाया;
• वस्तु के चमकने की प्रक्रिया की परिधीय प्रकृति;
• आकृति विज्ञान की विशेषताएं, परीक्षण सामग्री और उसके आयामों के लिए गए स्मीयर में रोगज़नक़ का स्थान।

बड़ी वस्तुओं के अध्ययन के दौरान (उदाहरण के लिए, माली, ट्राइकोमोनास, कोशिकाएं जो पहले से ही वायरस से प्रभावित हैं), ऊपर सूचीबद्ध मानदंड सबसे विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करना संभव बनाते हैं। हालांकि, माइकोप्लाज्मा और क्लैमाइडिया के प्राथमिक निकायों में आकार होते हैं जो एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप के संकल्प की सीमा पर स्थित होते हैं, जिससे यह मुश्किल हो जाता है

सटीक परिणाम प्राप्त करना मुश्किल बनाता है, क्योंकि परिधीय चमक अपनी कुछ तीव्रता खो देती है। शेष मानदंड अब अध्ययन किए गए सूक्ष्मजीवों की सटीक पहचान के लिए पर्याप्त नहीं हैं। इस कारण से, इस प्रकार के शोध करने वाले विशेषज्ञों पर विशेष आवश्यकताएं लगाई जाती हैं: उपलब्ध आंकड़ों के साथ काम करने के लिए उनकी योग्यता का स्तर पर्याप्त होना चाहिए।

इस कारण से, केवल उचित स्तर की योग्यता वाला डॉक्टर ही प्राप्त विश्लेषण के डिकोडिंग से निपट सकता है। नीचे आरआईएफ अनुसंधान की कीमत के बारे में पढ़ें।

औसत लागत

एक इम्यूनोफ्लोरेसेंस परीक्षण की कीमत परीक्षण के स्थान और स्तर पर निर्भर करती है। चिकित्सा संस्थान, औरसाथ ही विश्लेषण करने वाले व्यक्ति की योग्यता। आज, लागत 1280 से 2160 रूबल तक है।

नीचे दिया गया वीडियो आपको प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रियाओं के बारे में अधिक बताएगा:

इम्यूनोफ्लोरेसेंट विधि (आरआईएफ, इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया, कुन प्रतिक्रिया) फ्लोरोक्रोम के साथ संयुग्मित एंटीबॉडी का उपयोग करके विशिष्ट एंटीजन का पता लगाने की एक विधि है। इसमें उच्च संवेदनशीलता और विशिष्टता है।

एक्सप्रेस डायग्नोस्टिक्स के लिए प्रयुक्त संक्रामक रोग(परीक्षण सामग्री में रोगज़नक़ की पहचान), साथ ही एंटीबॉडी और सतह रिसेप्टर्स और ल्यूकोसाइट्स (इम्यूनोफेनोटाइपिंग) और अन्य कोशिकाओं के मार्करों के निर्धारण के लिए।

फ्लोरोसेंट एंटीबॉडी (सीरा) का उपयोग करके संक्रामक सामग्री, पशु ऊतकों और सेल संस्कृतियों में बैक्टीरिया और वायरल एंटीजन का पता लगाने से प्राप्त हुआ है विस्तृत आवेदननैदानिक ​​अभ्यास में। फ्लोरोसेंट सेरा की तैयारी कुछ फ़्लोरोक्रोमेस (उदाहरण के लिए, फ़्लोरेसिन आइसोथियोसाइनेट) की क्षमता पर आधारित होती है, जो उनकी प्रतिरक्षात्मक विशिष्टता का उल्लंघन किए बिना सीरम प्रोटीन के साथ एक रासायनिक बंधन में प्रवेश करती है।

तीन प्रकार की विधियाँ हैं: प्रत्यक्ष, अप्रत्यक्ष, पूरक के साथ। प्रत्यक्ष आरआईएफ विधि इस तथ्य पर आधारित है कि फ्लोरोक्रोम के साथ लेबल किए गए एंटीबॉडी के साथ प्रतिरक्षा सीरा के साथ इलाज किए गए ऊतक प्रतिजन या रोगाणु एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप की यूवी किरणों में चमकने में सक्षम हैं। इस तरह के एक ल्यूमिनसेंट सीरम के साथ इलाज किए गए स्मीयर में बैक्टीरिया, हरे रंग की सीमा के रूप में कोशिका की परिधि के साथ चमकते हैं।

अप्रत्यक्ष आरआईएफ विधि में फ्लोरोक्रोम के साथ लेबल किए गए एंटीग्लोबुलिन (एंटी-एंटीबॉडी) सीरम का उपयोग करके एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स की पहचान करना शामिल है। ऐसा करने के लिए, रोगाणुओं के निलंबन से स्मीयर का इलाज रोगाणुरोधी खरगोश के एंटीबॉडी के साथ किया जाता है नैदानिक ​​सीरम. फिर एंटीबॉडी जो माइक्रोबियल एंटीजन से बंधे नहीं होते हैं, उन्हें धोया जाता है, और रोगाणुओं पर शेष एंटीबॉडी का पता फ़्लोरोक्रोम के साथ लेबल किए गए एंटीग्लोबुलिन (एंटी-खरगोश) सीरम के साथ स्मीयर का इलाज करके लगाया जाता है। नतीजतन, एक जटिल सूक्ष्म जीव + रोगाणुरोधी खरगोश एंटीबॉडी + फ्लोरोक्रोम के साथ लेबल किए गए एंटी-खरगोश एंटीबॉडी का निर्माण होता है। यह परिसर एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप में देखा जाता है, जैसा कि प्रत्यक्ष विधि में होता है।

तंत्र। एक कांच की स्लाइड पर, परीक्षण सामग्री से एक धब्बा तैयार किया जाता है, एक लौ पर लगाया जाता है और रोगज़नक़ प्रतिजनों के खिलाफ एंटीबॉडी युक्त प्रतिरक्षा खरगोश सीरम के साथ इलाज किया जाता है। एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनाने के लिए, तैयारी को एक आर्द्र कक्ष में रखा जाता है और 15 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है, जिसके बाद एंटीजन से बंधे एंटीबॉडी को हटाने के लिए इसे आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान से अच्छी तरह से धोया जाता है। फिर, खरगोश ग्लोब्युलिन के खिलाफ एक फ्लोरोसेंट एंटीग्लोबुलिन सीरम तैयारी के लिए लागू किया जाता है, 37 डिग्री सेल्सियस पर 15 मिनट के लिए ऊष्मायन किया जाता है, और फिर तैयारी को आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान से अच्छी तरह से धोया जाता है। प्रतिजन पर तय विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ फ्लोरोसेंट एंटीग्लोबुलिन सीरम के बंधन के परिणामस्वरूप, चमकदार एंटीजन-एंटीबॉडी परिसरों का निर्माण होता है, जो फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी द्वारा पता लगाया जाता है।

22. एंजाइम इम्यूनोएसे- गुणात्मक की प्रयोगशाला प्रतिरक्षाविज्ञानी विधि or मात्रा का ठहरावविभिन्न यौगिक, मैक्रोमोलेक्यूल्स, वायरस आदि, जो एक विशिष्ट एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया पर आधारित होते हैं। सिग्नल पंजीकरण के लिए एक लेबल के रूप में एंजाइम का उपयोग करके गठित परिसर का पता लगाया जाता है।

वर्गीकरण:

प्रतिस्पर्धी (विश्लेषण किए गए यौगिक और इसके एनालॉग एक साथ सिस्टम में मौजूद हैं)

गैर-प्रतिस्पर्धी (यदि केवल विश्लेषण किए गए यौगिक और उसके संबंधित बाध्यकारी साइट (एंटीजन और विशिष्ट एंटीबॉडी) सिस्टम में मौजूद हैं)

प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष

1. सीरम जिसमें am का मिश्रण होता है, एक ठोस सब्सट्रेट पर लगाए गए एंटी के साथ इनक्यूबेट किया जाता है।

2.at जो बार-बार धोने से एजी को बांधता नहीं है उसे हटा दिया जाता है।

3. एंटीजन को बांधने वाले एंटीबॉडी में एंजाइम-लेबल एंटीसेरम जोड़ें

4. पर से बंधे मार्कर एंजाइम की मात्रा निर्धारित करें

अप्रत्यक्ष:

सकारात्मक सीरम

1. अध्ययन के तहत सीरम में विशिष्ट एंटीबॉडी एक ठोस सब्सट्रेट पर तय एंटीजन को बांधते हैं

2. एंजाइम के साथ लेबल किए गए विशिष्ट एंटीबॉडी बाध्य एजी के साथ बातचीत नहीं करते हैं - सब्सट्रेट में मार्कर की सामग्री कम है

एब-नेगेटिव सीरम

1. परीक्षण सीरम में गैर-विशिष्ट एंटीबॉडी एक ठोस सब्सट्रेट पर तय एंटीजन को बांधते नहीं हैं

2. एंजाइम के साथ लेबल किए गए विशिष्ट एंटीबॉडी निश्चित एजी के साथ बातचीत करते हैं - मार्कर की सामग्री अधिक होती है

सबसे आम ठोस-चरण आईएफए है, जिसमें प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया (एंटीजन या एंटीबॉडी) के घटकों में से एक ठोस वाहक पर अवशोषित होता है। Polystyrene micropanels एक ठोस वाहक के रूप में उपयोग किया जाता है। एंटीबॉडी का निर्धारण करते समय, एंजाइम-लेबल वाले रक्त सीरम और एंजाइम और क्रोमोजेन के समाधान के मिश्रण को क्रमिक रूप से adsorbed एंटीजन के साथ कुओं में जोड़ा जाता है। हर बार अगले घटक को जोड़ने के बाद, अनबाउंड अभिकर्मकों को पूरी तरह से धोकर कुओं से हटा दिया जाता है। सकारात्मक परिणाम के साथ, क्रोमोजेन समाधान का रंग बदल जाता है।

एक ठोस-चरण वाहक को न केवल एक प्रतिजन के साथ, बल्कि एक एंटीबॉडी के साथ भी संवेदनशील बनाया जा सकता है। फिर, वांछित एंटीजन को सोखने वाले एंटीबॉडी के साथ कुओं में पेश किया जाता है, एंजाइम के साथ लेबल किए गए एंटीजन के खिलाफ प्रतिरक्षा सीरम जोड़ा जाता है, और फिर एंजाइम और क्रोमोजेन के लिए सब्सट्रेट समाधान का मिश्रण जोड़ा जाता है।

आवेदन पत्र:वायरल और बैक्टीरियल रोगजनकों के कारण होने वाले रोगों के निदान के लिए।

23. सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया- एक प्रतिक्रिया जिसके द्वारा रक्त सीरम एंटीबॉडी के साथ एक एंटीजन (सूक्ष्म जीव, वायरस, विदेशी प्रोटीन) की प्रतिक्रिया की जांच की जाती है।

सीरोलॉजिकल अध्ययन- ये प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं के आधार पर रोगियों के रक्त सीरम में कुछ एंटीबॉडी या एंटीजन का अध्ययन करने के तरीके हैं। उनकी मदद से रोगाणुओं या ऊतकों के प्रतिजनों का भी पता लगाया जाता है ताकि उनकी पहचान की जा सके।

रोगी के रक्त सीरम में संक्रमण के प्रेरक एजेंट या संबंधित प्रतिजन के एंटीबॉडी का पता लगाने से रोग के कारण को स्थापित करना संभव हो जाता है।

रक्त समूहों के प्रतिजनों, ऊतक प्रतिजनों और हास्य प्रतिरक्षा के स्तर को निर्धारित करने के लिए सीरोलॉजिकल अध्ययनों का भी उपयोग किया जाता है।

सीरोलॉजिकल अध्ययनों में विभिन्न सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं शामिल हैं:

1. एग्लूटिनेशन रिएक्शन।

2. वर्षा प्रतिक्रिया।

3. तटस्थकरण प्रतिक्रिया।

4. पूरक शामिल प्रतिक्रिया।

5. लेबल एंटीबॉडी या एंटीजन का उपयोग कर प्रतिक्रिया।

इम्यूनोफ्लोरेसेंट विधि (आरआईएफ, इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया, कुन प्रतिक्रिया) फ्लोरोक्रोम के साथ संयुग्मित एंटीबॉडी का उपयोग करके विशिष्ट एंटीजन का पता लगाने की एक विधि है। इसमें उच्च संवेदनशीलता और विशिष्टता है।

इसका उपयोग संक्रामक रोगों (परीक्षण सामग्री में रोगज़नक़ की पहचान) के साथ-साथ एंटीबॉडी और सतह रिसेप्टर्स और ल्यूकोसाइट्स (इम्यूनोफेनोटाइपिंग) और अन्य कोशिकाओं के मार्करों के निर्धारण के लिए किया जाता है।

फ्लोरोसेंट एंटीबॉडी (सीरा) का उपयोग करके संक्रामक सामग्री, जानवरों के ऊतकों और सेल संस्कृतियों में बैक्टीरिया और वायरल एंटीजन का पता लगाने का व्यापक रूप से नैदानिक ​​अभ्यास में उपयोग किया जाता है। फ्लोरोसेंट सेरा की तैयारी कुछ फ़्लोरोक्रोमेस (उदाहरण के लिए, फ़्लोरेसिन आइसोथियोसाइनेट) की क्षमता पर आधारित होती है, जो उनकी प्रतिरक्षात्मक विशिष्टता का उल्लंघन किए बिना सीरम प्रोटीन के साथ एक रासायनिक बंधन में प्रवेश करती है।

तीन प्रकार की विधियाँ हैं: प्रत्यक्ष, अप्रत्यक्ष, पूरक के साथ। प्रत्यक्ष आरआईएफ विधि इस तथ्य पर आधारित है कि फ्लोरोक्रोम के साथ लेबल किए गए एंटीबॉडी के साथ प्रतिरक्षा सीरा के साथ इलाज किए गए ऊतक प्रतिजन या रोगाणु एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप की यूवी किरणों में चमकने में सक्षम हैं। इस तरह के एक ल्यूमिनसेंट सीरम के साथ इलाज किए गए स्मीयर में बैक्टीरिया, हरे रंग की सीमा के रूप में कोशिका की परिधि के साथ चमकते हैं।

अप्रत्यक्ष आरआईएफ विधि में फ्लोरोक्रोम के साथ लेबल किए गए एंटीग्लोबुलिन (एंटी-एंटीबॉडी) सीरम का उपयोग करके एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स की पहचान करना शामिल है। ऐसा करने के लिए, रोगाणुओं के निलंबन से स्मीयरों को रोगाणुरोधी खरगोश नैदानिक ​​सीरम के एंटीबॉडी के साथ इलाज किया जाता है। फिर एंटीबॉडी जो माइक्रोबियल एंटीजन से बंधे नहीं होते हैं, उन्हें धोया जाता है, और रोगाणुओं पर शेष एंटीबॉडी का पता फ़्लोरोक्रोम के साथ लेबल किए गए एंटीग्लोबुलिन (एंटी-खरगोश) सीरम के साथ स्मीयर का इलाज करके लगाया जाता है। नतीजतन, एक जटिल सूक्ष्म जीव + रोगाणुरोधी खरगोश एंटीबॉडी + फ्लोरोक्रोम के साथ लेबल किए गए एंटी-खरगोश एंटीबॉडी का निर्माण होता है। यह परिसर एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप में देखा जाता है, जैसा कि प्रत्यक्ष विधि में होता है।

तंत्र। एक कांच की स्लाइड पर, परीक्षण सामग्री से एक धब्बा तैयार किया जाता है, एक लौ पर लगाया जाता है और रोगज़नक़ प्रतिजनों के खिलाफ एंटीबॉडी युक्त प्रतिरक्षा खरगोश सीरम के साथ इलाज किया जाता है। एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनाने के लिए, तैयारी को एक आर्द्र कक्ष में रखा जाता है और 15 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है, जिसके बाद एंटीजन से बंधे एंटीबॉडी को हटाने के लिए इसे आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान से अच्छी तरह से धोया जाता है। फिर, खरगोश ग्लोब्युलिन के खिलाफ एक फ्लोरोसेंट एंटीग्लोबुलिन सीरम तैयारी के लिए लागू किया जाता है, 37 डिग्री सेल्सियस पर 15 मिनट के लिए ऊष्मायन किया जाता है, और फिर तैयारी को आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान से अच्छी तरह से धोया जाता है। प्रतिजन पर तय विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ फ्लोरोसेंट एंटीग्लोबुलिन सीरम के बंधन के परिणामस्वरूप, चमकदार एंटीजन-एंटीबॉडी परिसरों का निर्माण होता है, जो फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी द्वारा पता लगाया जाता है।

4. नर्सरी के बच्चों के बेडरूम की हवा में 75 एमटी/एम3 स्ट्रेप्टोकोकस, 12 एमटी/एम3 स्टेफिलोकोकस और 1 एमटी/एम3 तपेदिक बैक्टीरिया पाए गए। वायु का स्वच्छता-बैक्टीरियोलॉजिकल मूल्यांकन दें और इसकी स्वच्छता के लिए एक योजना की रूपरेखा तैयार करें।

परीक्षा टिकट संख्या _54

रेट्रोवायरस। एचआईवी संक्रमण (एड्स) और इसके रोगजनक।

मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस एचआईवी संक्रमण का कारण बनता है, जिसके परिणामस्वरूप अधिग्रहित प्रतिरक्षा कमी सिंड्रोम का विकास होता है।

एचआईवी संक्रमण का प्रेरक एजेंट एक लिम्फोट्रोपिक वायरस है जो लेंटिवायरस जीनस के रेट्रोविरिडे परिवार से संबंधित है।

रूपात्मक गुण: आरएनए युक्त वायरस। गोलाकार आकार के विषाणु कण खोल में ग्लाइकोप्रोटीन द्वारा प्रवेशित लिपिड की दोहरी परत होती है। लिपिड लिफाफा मेजबान कोशिका के प्लाज्मा झिल्ली से उत्पन्न होता है जिसमें वायरस पुनरुत्पादित होता है। ग्लाइकोप्रोटीन अणु में 2 सबयूनिट होते हैं जो विषाणु की सतह पर स्थित होते हैं और इसके लिपिड लिफाफे को भेदते हैं।

वायरस का मूल शंकु के आकार का होता है और इसमें कैप्सिड प्रोटीन, कई मैट्रिक्स प्रोटीन और प्रोटीज प्रोटीन होते हैं। जीनोम आरएनए के दो स्ट्रैंड बनाता है, प्रजनन की प्रक्रिया के कार्यान्वयन के लिए, एचआईवी में रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस, या रिवर्सटेज़ होता है।

वायरस जीनोम में 3 मुख्य संरचनात्मक जीन और 7 नियामक और कार्यात्मक जीन होते हैं। कार्यात्मक जीन नियामक कार्य करते हैं और प्रजनन प्रक्रियाओं के कार्यान्वयन और संक्रामक प्रक्रिया में वायरस की भागीदारी सुनिश्चित करते हैं।

वायरस मुख्य रूप से टी- और बी-लिम्फोसाइट्स, मोनोसाइटिक श्रृंखला की कुछ कोशिकाओं (मैक्रोफेज, ल्यूकोसाइट्स), तंत्रिका तंत्र की कोशिकाओं को प्रभावित करता है।

सांस्कृतिक गुण: टी-लिम्फोसाइटों और मानव मोनोसाइट्स की कोशिका संवर्धन पर (आईएल-2 की उपस्थिति में)।

एंटीजेनिक संरचना: 2 प्रकार के वायरस - एचआईवी -1 और एचआईवी -2 एचआईवी -1, 10 से अधिक जीनोटाइप (उपप्रकार) हैं: ए, बी, सी, डी, ई, एफ ..., अमीनो एसिड संरचना में भिन्न प्रोटीन।

HIV-1 को 3 समूहों में विभाजित किया गया है: M, N, O. अधिकांश आइसोलेट्स M समूह से संबंधित हैं, जिसमें 10 उपप्रकार प्रतिष्ठित हैं: A, B, C, D, F-l, F-2, G, H, I, K. प्रतिरोध: भौतिक और रासायनिक कारकों के प्रति संवेदनशील, गर्म होने पर नष्ट हो जाता है। सूखे रक्त में, सूखे अवस्था में वायरस लंबे समय तक बना रह सकता है।

रोगजनकता कारक, रोगजनन: वायरस लिम्फोसाइट से जुड़ता है, कोशिका में प्रवेश करता है और लिम्फोसाइट में प्रजनन करता है। एक लिम्फोसाइट में एचआईवी प्रजनन के परिणामस्वरूप, बाद वाले नष्ट हो जाते हैं या अपने कार्यात्मक गुणों को खो देते हैं। विभिन्न कोशिकाओं में वायरस के प्रजनन के परिणामस्वरूप, यह अंगों और ऊतकों में जमा हो जाता है, और यह रक्त, लसीका, लार, मूत्र, पसीना और मल में पाया जाता है।

एचआईवी संक्रमण में, टी -4 लिम्फोसाइटों की संख्या कम हो जाती है, बी-लिम्फोसाइट फ़ंक्शन खराब हो जाता है, प्राकृतिक हत्यारा कार्य दबा दिया जाता है और एंटीजन की प्रतिक्रिया कम हो जाती है और पूरक, लिम्फोसाइट्स और अन्य कारकों का उत्पादन होता है जो प्रतिरक्षा कार्यों (आईएल) को नियंत्रित करते हैं। बाधित, जिसके परिणामस्वरूप प्रतिरक्षा शिथिलता। सिस्टम।

क्लिनिक: प्रभावित श्वसन प्रणाली(निमोनिया, ब्रोंकाइटिस); सीएनएस (फोड़े, मेनिन्जाइटिस); गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट (दस्त), होते हैं प्राणघातक सूजन(आंतरिक अंगों के ट्यूमर)।

एचआईवी संक्रमण कई चरणों में होता है: 1) उद्भवनऔसतन 2-4 सप्ताह; 2) प्राथमिक अभिव्यक्तियों का चरण, शुरू में तीव्र बुखार, दस्त द्वारा विशेषता; चरण एक स्पर्शोन्मुख चरण और वायरस की दृढ़ता के साथ समाप्त होता है, भलाई की बहाली, हालांकि, रक्त में एचआईवी एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है, 3) माध्यमिक रोगों का चरण, श्वसन, तंत्रिका तंत्र को नुकसान से प्रकट होता है। एचआईवी संक्रमण अंतिम, चौथे टर्मिनल चरण - एड्स के साथ समाप्त होता है।

सूक्ष्मजीवविज्ञानी निदान।

वायरोलॉजिकल और सीरोलॉजिकल अध्ययनों में एचआईवी एंटीजन और एंटीबॉडी का निर्धारण करने के तरीके शामिल हैं। इसके लिए एलिसा, आईबी और पीसीआर का इस्तेमाल किया जाता है। एचआईवी -1 और एचआईवी -2 के रोगियों के सीरा में सभी वायरल प्रोटीन के प्रति एंटीबॉडी होते हैं। हालांकि, निदान की पुष्टि करने के लिए, HIV-1 में gp41, gpl20, gpl60, p24 प्रोटीन के प्रति एंटीबॉडी और HIV-2 में gp36, gpl05, gpl40 प्रोटीन के एंटीबॉडी निर्धारित किए जाते हैं। एचआईवी एंटीबॉडी संक्रमण के 2-4 सप्ताह बाद प्रकट होते हैं और एचआईवी के सभी चरणों में पता लगाने योग्य होते हैं।

रक्त, लिम्फोसाइटों में वायरस का पता लगाने की विधि। हालांकि, किसी भी सकारात्मक नमूने के साथ, परिणामों की पुष्टि के लिए एक आईबी प्रतिक्रिया रखी जाती है। पीसीआर का भी उपयोग किया जाता है, जो ऊष्मायन और प्रारंभिक नैदानिक ​​अवधि में एचआईवी संक्रमण का पता लगा सकता है, लेकिन इसकी संवेदनशीलता एलिसा की तुलना में थोड़ी कम है।

नैदानिक ​​​​और सीरोलॉजिकल निदान की पुष्टि प्रतिरक्षाविज्ञानी अध्ययनों द्वारा की जाती है यदि वे जांच किए गए रोगी में इम्युनोडेफिशिएंसी की उपस्थिति का संकेत देते हैं।

एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए नैदानिक ​​एलिसा परीक्षण प्रणाली - इसमें वाहक पर अधिशोषित वायरल एंटीजन, मानव आईजी के खिलाफ एंटीबॉडी शामिल हैं। एड्स सेरोडायग्नोसिस के लिए उपयोग किया जाता है।

उपचार: सक्रिय कोशिकाओं पर कार्य करने वाले रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस अवरोधकों का उपयोग। दवाएं थाइमिडीन डेरिवेटिव हैं - एज़िडोथाइमिडीन और फॉस्फेज़ाइड।

निवारण। विशिष्ट - नहीं।

रोगाणुओं पर भौतिक और रासायनिक कारकों का प्रभाव। उत्परिवर्तन और व्यावहारिक चिकित्सा के लिए इसका महत्व। उदाहरण। पारिस्थितिकी का मूल्य।

रासायनिक और जैविक कारकों की कार्रवाई।

रसायनों की क्रिया

रसायन सूक्ष्मजीवों के विकास को रोक सकते हैं या पूरी तरह से रोक सकते हैं। यदि एक रासायनिक पदार्थबैक्टीरिया के विकास को रोकता है, लेकिन हटाने के बाद, उनकी वृद्धि फिर से शुरू हो जाती है।

रोगाणुरोधी पदार्थ, उनकी रासायनिक संरचना और तंत्र को ध्यान में रखते हुए जीवाणुनाशक क्रियाबैक्टीरिया को निम्नलिखित समूहों में विभाजित किया जा सकता है: ऑक्सीकरण एजेंट, हैलोजन, धातु यौगिक, एसिड और क्षार, सर्फेक्टेंट, अल्कोहल, डाई, फिनोल और फॉर्मलाडेहाइड डेरिवेटिव।

आक्सीकारक। इस समूह में हाइड्रोजन पेरोक्साइड और पोटेशियम परमैंगनेट शामिल हैं।

हलोजन। क्लोरीन, आयोडीन और उनकी तैयारी: ब्लीच, क्लोरैमाइन बी, पैंटोसिड, अल्कोहल आयोडीन घोल 5%, आयोडिनॉल, आयोडोफॉर्म।

भारी धातुओं के यौगिक (सीसा, तांबा, जस्ता, चांदी, पारा के लवण; ऑर्गोमेटेलिक सिल्वर यौगिक: प्रोटारगोल, कॉलरगोल)। ये यौगिक रोगाणुरोधी और विविध दोनों को बाहर निकालने में सक्षम हैं स्थानीय कार्रवाईमैक्रोऑर्गेनिज्म ऊतक पर।

अम्ल और क्षार। एसिड और क्षार की जीवाणुनाशक क्रिया सूक्ष्मजीवों के निर्जलीकरण, पोषक माध्यम के पीएच में परिवर्तन, कोलाइडल सिस्टम के हाइड्रोलिसिस और अम्लीय या क्षारीय एल्बुमिनेट्स के गठन पर आधारित होती है।

रंगों में बैक्टीरिया के विकास को रोकने के गुण होते हैं। वे धीरे-धीरे लेकिन अधिक चयनात्मक रूप से कार्य करते हैं।

फॉर्मलडिहाइड एक रंगहीन गैस है। व्यवहार में, 40% का उपयोग किया जाता है पानी का घोलफॉर्मलडिहाइड (फॉर्मेलिन)। फॉर्मलडिहाइड गैसीय और पानी में घुलने से बैक्टीरिया के वानस्पतिक और बीजाणु रूपों पर हानिकारक प्रभाव पड़ता है।

जैविक कारकों की क्रिया

जैविक कारकों की क्रिया मुख्य रूप से रोगाणुओं के विरोध में प्रकट होती है, जब कुछ रोगाणुओं के अपशिष्ट उत्पाद दूसरों की मृत्यु का कारण बनते हैं।

एंटीबायोटिक्स (ग्रीक एंटी-अगेंस्ट, बायोस-लाइफ से) - जैविक रूप से सक्रिय पदार्थ जो कवक, बैक्टीरिया, जानवरों, पौधों के जीवन के दौरान बनते हैं और कृत्रिम रूप से बनाए जाते हैं, जो सूक्ष्मजीवों, कवक, रिकेट्सिया, बड़े वायरस, प्रोटोजोआ और को चुनिंदा रूप से दबाने और मारने में सक्षम होते हैं। व्यक्तिगत हेलमिन्थ्स।

3. गठिया, नैदानिक ​​और व्यावहारिक महत्व में जीवाणु एंजाइमों की जैविक गतिविधि की प्रतिक्रिया, अधिग्रहित प्रतिरक्षा में एंजाइमों के खिलाफ एंटीबॉडी की सुरक्षात्मक भूमिका (एंटी-हयालूरोनिडेस और एंटी-ओ-स्ट्रेप्टोलिसिन का निर्धारण)।

गठिया - सामान्य रोगसंक्रामक-एलर्जी प्रकृति, जिसमें संयोजी ऊतक प्रभावित होता है, मुख्यतः कार्डियो-वैस्कुलर सिस्टम के, साथ ही जोड़ों, आंतरिक अंग, केंद्रीय तंत्रिका प्रणाली. यह माना जाता है कि गठिया के विकास का कारण सक्रियता है रोगजनक सूक्ष्मजीव, मुख्य रूप से बीटा-हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकस समूह ए। यह वह है जो एटियलजि और रोगजनन में मुख्य भूमिका निभाता है आमवाती रोग. सबसे पहले, रोग पृष्ठभूमि के खिलाफ विकसित होता है स्ट्रेप्टोकोकल संक्रमण. दूसरे, इस समूह के सूक्ष्मजीवों के प्रति बड़ी संख्या में एंटीबॉडी रोगियों के रक्त में पाए जाते हैं। तीसरा, रोग की रोकथाम जीवाणुरोधी दवाओं के साथ सफलतापूर्वक की जाती है।

पर रूमेटाइड गठियाश्लेष झिल्ली, अज्ञात कारणों से, बड़ी मात्रा में एंजाइम ग्लूकोज-6-फॉस्फेट डिहाइड्रोजनेज का स्राव करती है, जो कोशिका झिल्ली में डाइसल्फ़ाइड बांड को भी तोड़ती है। इस मामले में, सेलुलर लाइसोसोम से प्रोटीयोलाइटिक एंजाइमों का "रिसाव" होता है, जो आस-पास की हड्डियों और उपास्थि को नुकसान पहुंचाता है। शरीर साइटोकिन्स का उत्पादन करके प्रतिक्रिया करता है, जिसमें ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर α TNF-α भी शामिल है। कोशिकाओं में प्रतिक्रियाओं के कैस्केड, जो साइटोकिन्स द्वारा ट्रिगर होते हैं, रोग के लक्षणों को और बढ़ा देते हैं। TNF-α से जुड़ी पुरानी रुमेटी सूजन अक्सर उपास्थि और जोड़ों को नुकसान पहुंचाती है जिससे शारीरिक विकलांगता होती है।