Mikrobiologiset laboratoriot ja niiden laitteet. Laitetta koskevat säännöt, turvatoimet, teollisuuden sanitaatio, epidemian vastainen järjestelmä ja henkilökohtainen hygienia työskennellessäsi terveys- ja epidemiologisten laitosten laboratorioissa (osastoilla, osastoilla)

OHJEET KÄYTÄNNÖN OPPAAN nro 1

AIHE:"Mikrobiologisten laboratorioiden tyypit. Bakteriologisen laboratorion laitteet ja laitteet. Laboratoriossa työskentelyn säännöt.

Tehtävät:

Tutustu mikrobiologisten laboratorioiden tyyppeihin

Tutkia bakteriologisen laboratorion laitteita ja laitteita

Opi työskentelysäännöt bakteriologisessa laboratoriossa

Tutkia patologisen materiaalin tyyppejä ja sääntöjä sen toimittamisesta laboratorioon

Tutustu mikrobiologisten tutkimusmenetelmien koulutustietoihin

TEHTÄVÄ 1

Tutustu mikrobiologian laboratorioiden tyyppeihin.

Bakteriologisia laboratorioita järjestetään tartuntatautisairaaloissa, klinikoissa, terveys- ja epidemiologisissa asemissa. Lääketieteellisen bakteriologisen laboratorion tehtävänä on infektiotautien diagnosointi. Lääketieteellinen henkilökunta tuo bakteriologiseen laboratorioon potilaalta tai tutkittavalta oikein otetun patologisen materiaalin /ysköstä, virtsaa, oksennusta, nielupuikkoa, verta, selkäydinnestettä, sappia, keuhkoputkien huuhtelunesteitä jne., se tutkitaan ja mikä taudinaiheuttaja on määritetty sijaitsee patologisessa materiaalissa, ts. eristää taudinaiheuttaja. sitä paitsi serologisissa laboratorioissa määrittää kehon vasteen mikro-organismien käyttöönotolle / serologinen diagnostiikka suoritetaan tarttuvat taudit/. On laboratorioita, joissa virologinen tutkimus. Erityisessä saniteetti- ja bakteriologiset laboratoriot tehdä tutkimuksia ympäristön mikrobikontaminaation tunnistamiseksi

/ vesi, maaperä, ilma / ja erilaiset ulkoisen ympäristön esineet.

Tarkoituksensa mukaan erotetaan bakteriologiset, virologiset, immunologiset ja erityisesti diagnostiikkaan suunnitellut. vaarallisia infektioita laboratoriot.

Täytä taulukko muistikirjaasi

TEHTÄVÄ #2

Tutki mikrobiologisen laboratorion laitetta.

Mikrobiologisen laboratorion tulee sijaita eristetyssä huoneessa. Laboratoriossa tulee olla useita tiloja.

Laboratorio on varustettu tulo- ja poistoilmanvaihdolla sekä palontorjuntalaitteilla.

Laboratoriotilojen tulee olla mukavia märkäpuhdistukseen ja desinfiointiin, erityisesti paneelit on maalattu kevyellä öljymaalilla, lattiat on päällystetty linoleumilla ja pöydät on päällystetty erityisellä emalilla.

Laboratorion päälaitteet ovat mikroskoopit, termostaatit, jääkaapit, sterilointilaitteet (autoklaavi, uuni, kierukka), sentrifugi- ja tislauslaitteet.

Virologisissa laboratorioissa luodaan laatikoita esilaatikoilla. Tavallisten laitteiden lisäksi ne on varustettu ultratermostaatilla, jäähdytyksellä varustetulla sentrifugilla virusten puhdistamista ja väkevöintiä varten, jääkaapilla niiden säilyttämiseksi -20º -70ºС lämpötilassa sekä laitteistolla materiaalien tyhjiökuivaukseen.

Immunologiset laboratoriot on varustettu astioilla, instrumenteilla, reagensseilla, diagnostiikalla ja allergeenilla serologisia reaktioita varten.

Mikrobiologisten laboratorioiden henkilökunnalla on henkilökohtaisia ​​suojapukuja, huiveja ja lakkeja, sidenaamareita, öljykangasesiliinoita, päällyshihoja, kumihanskoja, ruttoasuja. Mikrobiologisen tutkimuksen prosessissa on noudatettava tiukkaa hygienia- ja epidemiajärjestelmää, joka sulkee pois laboratorion sisäisen infektion. Jos testimateriaalia tai mikro-organismiviljelmää joutuu vahingossa kosketuksiin käsillä, pöydällä, aamutakissa tai kengissä, ne on desinfioitava välittömästi.

Työn päätyttyä viljelykasvien ravintoaineet asetetaan termostaattiin, museoviljelmät - turvallisiin jääkaappiin. Pöydät pyyhitään desinfiointiaineella ja kädet pestään perusteellisesti.

Tartunnan saaneet eläimet, instrumentit ja ruiskut steriloidaan avaamisen jälkeen, jätemateriaalit ja ruumiit poltetaan tai autoklavoidaan.

Laboratorion päätilat:

1. Laboratoriohuoneet - suunniteltu mikrobiologiseen tutkimukseen. Tämä on valoisa huone, joka on maalattu öljymaalilla. Se sisältää pöytäkoneet jääkaappi/se sisältää joitain ravintoaineita, diagnostisia valmisteita, verta, sappia jne./.

2. Termostaattihuone. Se sisältää termostaatteja /laitteita, joissa kasvatetaan mikro-organismeja, lämpötilan tulee olla niissä 37 0 C, se kirjataan päivittäin, sentrifugeja /käytetään tiheiden hiukkasten erottamiseen nesteestä/.

3. Materiaalihuone siinä ovat kaapit/ niissä on jalustoja, kuivia ravintoalustoja, reagensseja, laitteita / jne.

Pesualtaan lähellä tulee olla säiliö, jossa on desinfiointiliuosta käsien puhdistamiseen ja ensiapulaukku, jossa on joukko ensiapuvälineitä.

4. Tila ravintoalustan valmistusta varten - siihen valmistetaan ravinteita.

5. Pesu - tilaa astioiden pesulle ja käsittelylle.

6. Sterilointihuone - se sisältää laitteet puhtaiden astioiden sterilointiin, ravintoalustoja, autoklaaveja ja kuivauskaapin.

7. Nyrkkeily - tiukasti eristetty huone mikrobiologiselle työlle erityistä steriiliyttä vaativissa olosuhteissa. Ilman desinfiointi suoritetaan bakteereja tappavilla lampuilla. Desinfioitu ilma syötetään laatikkoon. He menevät laatikkoon eteisen kautta, jossa he vaihtavat vaatteita: laittavat kylpytakin, tossut, hatun, naamion ja menevät laatikon luo toisesta ovesta. Nyrkkeilyssä he eivät puhu ja välttävät tarpeettomia liikkeitä.

8. Ilmoittautuminen - se tallentaa vastaanotetun patologisen materiaalin ja tutkimuksen tuloksen.

9. Vivarium - tilaa koe-eläinten pitämiseen.

Johdanto

Kuten minkä tahansa muun tieteen yleinen osa, yleinen bakteriologia ei käsittele erityiskysymyksiä (esimerkiksi yksittäisten bakteerilajien tunnistamista), vaan ongelmia yleensä; sen metodologia kattaa tärkeimmät menettelyt laaja sovellus erilaisissa laboratoriotutkimuksissa. Tätä tutkimusopasta ei ole tarkoitettu minkään mikro-organismiryhmän tunnistamiseen. Tämä on seuraavien julkaisujen tehtävä - yksityis- ja terveysmikrobiologiasta. Siinä esitetyt menetelmät voivat kuitenkin olla hyödyllisiä kaikilla alueilla, joilla bakteerien kanssa on tarkoitus käsitellä, ja niitä voidaan soveltaa käytännön ongelmiin, mukaan lukien bakteerien eristäminen ja tyypistäminen.

Bakteriologiasta tuli tiede vasta ainutlaatuisten menetelmien kehittämisen jälkeen, minkä ansiosta se jatkaa vaikuttamista ja tunkeutumista sellaisille myöhemmin nouseville tieteenaloille, kuten virologia, immunologia ja molekyylibiologia. R. Kochin kehittämä puhdasviljelmien käyttötekniikka ja L. Pasteurin uranuurtamat immunologiset reaktiot ja kemiallinen analyysi eivät ole menettäneet merkitystään vieläkään.

Yleisen bakteriologian metodologia heijastuu tässä julkaisussa käyttämällä standardille tyypillistä rakennetta opetusvälineet tällä alalla. Toisin kuin yliopistoille suunnatut mikrobiologian kurssin laboratoriotyöpajat, se on kuitenkin esitetty tarkemmin joissakin osioissa ja se on vain viitteellinen. Tämä rakenne ottaa huomioon bakteriologien ja eläinlääketieteen asiantuntijoiden koulutuksen ja erikoistumisen erityispiirteet. Usein materiaali esitetään mielivaltaisesti, joten jotkut menetelmät mainitaan useita kertoja, koska halutaan osoittaa heidän suhteensa.

bakteriologinen laboratorio

Bakteriologiset laboratoriot rakenneyksiköinä on organisoitu osaksi alueellisia, piiri-, piirien välisiä eläinlääkintälaboratorioita sekä vyöhykeeläinlääkintälaboratorioiden rakenteessa. Niitä järjestetään myös terveys- ja epidemiologisen valvonnan keskuksissa, infektiosairaaloissa, yleissairaaloissa, joissakin erikoissairaaloissa (esim. tuberkuloosi-, reuma-, dermatovenereologia) ja poliklinikoissa. Bakteriologiset laboratoriot ovat osa erikoistuneita tutkimuslaitoksia. Bakteriologisia laboratorioita käytetään jatkuvasti vahvistamaan tai vahvistamaan lihan elintarvikesoveltuvuusluokitus ESS:n mukaan.

Bakteriologisten laboratorioiden tutkimuskohteet ovat:

1. Vuoto kehosta: virtsa, ulosteet, yskös, mätä sekä veri, patologinen ja ruumiinmateriaali.

2. Ulkoisen ympäristön esineet: vesi, ilma, maaperä, huuhteluaineet varastotuotteista, rehu, tuotantoeläinten teurastuksessa saadut tekniset raaka-aineet.

3. Elintarvikkeet, liha- ja lihavalmistenäytteet, maito ja maitotuotteet, joiden soveltuvuus elintarvikekäyttöön on arvioitava.

Bakteriologinen laboratoriohuone ja työpaikan laitteet

Mikrobiologisen työn spesifisyys edellyttää, että laboratoriolle varattu tila on eristetty olohuoneista, ruokakorteista ja muista ydinliiketoimintaan kuulumattomista teollisuustiloista.

Bakteriologiseen laboratorioon kuuluu: bakteriologisen tutkimuksen laboratoriotilat ja kodinhoitotilat; autoklaavi tai sterilointi jätemateriaalin ja saastuneiden astioiden puhdistamiseen; pesu, varustettu astioiden pesuun; bakteriologinen keittiö - ravintoaineiden valmistukseen, pullotukseen, sterilointiin ja varastointiin; Vivaarium koe-eläinten pitämiseen; materiaalit varareagenssien, välineiden, laitteiden ja kotitaloustarvikkeiden varastointiin.

Listatut kodinhoitohuoneet ovat itsenäisinä rakenneyksiköinä osa suuria bakteriologisia laboratorioita. Pienissä laboratorioissa bakteriologinen keittiö ja sterilointikeittiö yhdistetään yhdeksi huoneeksi; ei ole erityistä tilaa koe-eläinten pitämiselle.

Henkilöstön vaaran asteen mukaan mikrobiologisten laboratorioiden tilat on jaettu 2 vyöhykkeeseen:

I. "Tarttuva" vyöhyke - laboratorion huone tai huoneryhmä, jossa patogeenisiä biologisia tekijöitä käsitellään ja varastoidaan ja henkilöstö on pukeutunut asianmukaisesti Suojavaatetus.

II. "Puhdas" vyöhyke - tilat, joissa ei suoriteta työtä biologisen materiaalin kanssa, henkilökunta on pukeutunut henkilökohtaisiin vaatteisiin.

Laboratoriotilojen alla, joissa kaikki tuotetaan bakteriologinen tutkimus, jakaa valoisimmat ja tilavat huoneet. Näiden huoneiden seinät 170 cm:n korkeudella lattiasta on maalattu vaaleilla väreillä öljymaalilla tai peitetty laatoilla. Lattia on päällystetty reliinillä tai linoleumilla. Tämän tyyppisen viimeistelyn avulla voit käyttää desinfiointiliuoksia huoneen siivouksessa.

Jokaisessa huoneessa tulee olla pesuallas putkistolla ja hylly desinfiointiainepullolle.

Yhdessä huoneessa on lasitettu laatikko - eristetty huone, jossa on eteinen (esilaatikko) työn suorittamista varten aseptisissa olosuhteissa. Laatikossa he laittavat pöydän satoille, jakkaralle, bakterisidiset lamput on asennettu työpaikan yläpuolelle. Eteiseen on sijoitettu kaappi steriilin materiaalin säilyttämistä varten. "Tarttuva" alueen tilojen ikkunoiden ja ovien on oltava ilmatiiviitä. Olemassa oleva poistoilmanpoisto "tartunta-alueelta" on eristettävä muista ilmanvaihtojärjestelmistä ja varustettava hienoilla ilmansuodattimilla.

Laboratoriohuoneessa on laboratoriotyyppiset pöydät, kaapit ja hyllyt työssä tarvittavien laitteiden, työvälineiden, maalien ja reagenssien säilytykseen.

Bakteriologin ja laborantin työpaikan oikea organisointi on työn kannalta erittäin tärkeää. Laboratoriopöydät asennetaan ikkunoiden lähelle. Niitä asetettaessa on pyrittävä varmistamaan, että valo putoaa työntekijän eteen tai sivulle, mieluiten vasemmalle puolelle, mutta ei missään tapauksessa takaa. On toivottavaa, että analysointitiloissa, erityisesti mikroskopiassa, on ikkunat pohjoiseen tai luoteeseen, koska työhön tarvitaan jopa hajavaloa. Pöytien pinnan valaistuksen tulee olla työskentelyä varten 500 luksia. Desinfioinnin helpottamiseksi laboratoriopöytien pinta on peitetty muovilla tai verhoiltu raudalla. Jokaiselle laboratorion työntekijälle osoitetaan oma työpaikka, jonka mitat ovat 150x60 cm.

Kaikki työpaikat on varustettu päivittäiseen bakteriologiseen työhön tarvittavilla tarvikkeilla, joista on luettelo taulukossa 1.

Pöytä 1.

Bakteriologiseen työhön tarvittavat tarvikkeet

Desinfiointi

Desinfiointi on mikro-organismien tuhoamista ympäristön esineissä.

Mikrobiologisissa laboratorioissa desinfiointitoimenpiteitä käytetään erittäin laajasti. Bakteriologisten laboratorioiden työntekijät suorittavat käsien ja työpaikan ennaltaehkäisevän desinfioinnin lopettaessaan työskentelyä tartuntamateriaalilla.

Kulunut patologinen materiaali (ulosteet, virtsa, yskös, erilaiset nesteet, veri) desinfioidaan ennen kuin se heitetään viemäriin.

Patologisen materiaalin tai mikrobiviljelmän saastuttamat graduoidut ja Pasteur-pipetit, lasilastat ja metalliset instrumentit lasketaan välittömästi käytön jälkeen lasipurkkeihin, joissa on desinfiointiaine, joka sijaitsee pöydällä jokaisella työpaikalla.

Työssä käytetyt objektilasit ja peitelasit ovat myös pakollisen desinfioinnin alaisia, koska jopa kiinteässä ja värjäytyneessä siivilässä jää joskus elinkelpoisia mikro-organismeja, jotka voivat olla laboratorion sisäisen kontaminaation lähteenä. Vain niitä astioita, joissa on kasvatettu mikro-organismeja, ei käsitellä desinfiointiaineilla. Se taitetaan metallisäiliöihin tai bixeihin, suljetaan ja luovutetaan autoklaavikäyttöön.

Desinfiointiaineen valinta, sen liuoksen pitoisuus, desinfiointiaineen määrän ja desinfioitavan materiaalin välinen suhde sekä desinfiointijakson kesto määräytyvät erityisolosuhteiden mukaan ottaen huomioon ensin Kaiken kaikkiaan desinfioitavien mikrobien stabiilisuus, odotettu kontaminaatioaste, niiden sijaintimateriaalin koostumus ja konsistenssi.

Käsien desinfiointi tarttuvan materiaalin kanssa työskentelyn jälkeen ja sen joutuessa kosketuksiin ihon kanssa. Tartuntamateriaalilla työskentelyn päätteeksi kädet desinfioidaan profylaktisesti. Vanupallo tai sideharsokangas kostutetaan 1-prosenttisella kloramiiniliuoksella, ensin vasen ja sitten oikea käsi pyyhitään seuraavassa järjestyksessä: käden takaosa, kämmenpinta, sormien väliset tilat, kynsisängyt. Siten vähiten saastuneet alueet käsitellään ensin, sitten ne siirtyvät ihon eniten saastuneille alueille. Pyyhi käsiä 2 minuuttia kahdella vanupuikolla peräkkäin. Kun kädet kontaminoituvat patogeenisen mikrobin tai patologisen materiaalin viljelmällä, ihon saastuneet alueet desinfioidaan ensin. Tätä varten ne peitetään 3-5 minuutin ajan 1-prosenttiseen kloramiiniliuokseen kostutetulla puuvillavillalla, sitten puuvilla heitetään säiliöön tai ämpäriin, jossa on jätemateriaalia, ja käsiä käsitellään toisella vanupuikolla samassa. kuten ennaltaehkäisevän desinfioinnin yhteydessä. Kloramiinikäsittelyn jälkeen kädet pestään lämpimällä vedellä ja saippualla. Kun työskentelet itiöitä muodostavien bakteerien kanssa, käsiä käsitellään 1 %:lla aktivoidulla kloramiinilla. Jos tarttuvaa materiaalia joutuu käsille, desinfiointiaineen altistusaika nostetaan 5 minuuttiin.

Sterilointi

Sterilointi, toisin kuin desinfiointi, sisältää kaikkien vegetatiivisten ja itiöiden, patogeenisten ja ei-patogeenisten mikro-organismien tuhoamisen steriloidussa esineessä. Sterilointi suoritetaan eri tavoilla: höyryllä, kuivalla kuumalla ilmalla, keittämällä, suodatuksella jne. Sterilointimenetelmän valinta määräytyy steriloitavan kohteen mikroflooran laadun ja ominaisuuksien mukaan.

Laboratoriolaitteiden valmistelu ja sterilointi

Ennen sterilointia laboratoriolasit pestään ja kuivataan. Koeputket, pullot, pullot, patjat ja pullot suljetaan puuvillaharsotulpilla. Aseta jokaisen astian tulpat (paitsi koeputkia) paperikorkkiin.

Kumi-, korkki- ja lasitulpat steriloidaan erillisessä pussissa, joka on sidottu astian kaulaan. Petrimaljat steriloidaan paperiin käärittynä, 1-10 kpl. Pasteur-pipetit, 3-15 kpl. kääritty käärepaperiin. AT ylempi osa jokaiseen pipettiin laitetaan pala puuvillaa, mikä estää materiaalia pääsemästä ympäristöön. Pipettejä käärittäessä on huolehdittava siitä, ettei kapillaarien suljetut päät katkea. Käytön aikana pipetit poistetaan pakkauksesta yläpäästä.

Turvavanu asetetaan asteikolla varustettujen pipettien yläosaan Pasteur-pipettien tapaan ja kääritään paksuun paperiin, joka on leikattu valmiiksi 2-2,5 cm leveiksi ja 50-70 cm pituisiksi suikaleiksi. Liuska asetetaan pöydälle , sen vasen pää on taitettu ja kääritty pipetin kärkeen, sitten pyörittämällä pipettiä, kääri paperiteippi sen ympärille. Paperin taittumisen estämiseksi vastakkainen pää on kierretty tai liimattu. Käärityn pipetin tilavuus kirjoitetaan paperille. Jos tapauksia on, asteikolla varustetut pipetit steriloidaan niissä.

Steriloi laboratoriolasit

a) kuivaa lämpöä 180 °C:ssa ja 160 °C:ssa 1 tunti ja 150 minuuttia, vastaavasti.

b) autoklaavissa 1,5 atm:n paineessa. 60 minuutin kuluessa itiöiden mikroflooran tuhoamiseksi - 90 minuuttia 2 atm.

Ruiskujen sterilointi. Ruiskut steriloidaan purettuna: erikseen sylinteri ja mäntä 2 % natriumbikarbonaattiliuoksessa 30 minuutin ajan. Itiöt sisältävän mikroflooran kanssa työskennellessä sterilointi suoritetaan autoklaavissa 132±2°C (2 atm) 20 minuuttia, 126±2°C (1,5 atm.) - 30 minuuttia. Steriloitu ruisku kerätään, kun se on jäähtynyt, mäntä työnnetään sylinteriin, neula asetetaan sen jälkeen, kun kara on poistettu siitä. Neula, sylinteri ja mäntä otetaan pinseteillä, jotka steriloidaan yhdessä ruiskulla.

Metalliinstrumenttien sterilointi. Metalliinstrumentit (sakset, veitset, pinsetit jne.) steriloidaan 2 % natriumbikarbonaattiliuoksessa, joka estää ruostumista ja terävyyden menetystä. Veitsen ja saksien terät on suositeltavaa kääriä vanulla ennen liuokseen upottamista.

Bakteerisilmukoiden sterilointi. Platina- tai nikromilangasta valmistetut bakteerisilmukat steriloidaan alkoholi- tai kaasupolttimen liekissä. Tätä sterilointimenetelmää kutsutaan kalsinaatioksi tai liekkiksi.

Vaaka-asennossa oleva silmukka tuodaan polttimen liekin alempaan, kylmimpään osaan, jotta palanut patogeeninen materiaali ei roisku. Sen palamisen jälkeen silmukka siirretään pystyasentoon, ensin langan alaosa, sitten yläosa kuumennetaan kuumaksi ja silmukan pidike poltetaan. Sytytys kestää kokonaisuudessaan 5-7 s.

Valmistelu paperin, sideharson ja puuvillan sterilointiin ja sterilointiin. Puuvilla, sideharso, suodatinpaperi steriloidaan kuivalla lämpöuunissa 160 ° C: n lämpötilassa tunnin ajan siitä hetkestä, kun lämpötila on osoitettu lämpömittarilla tai autoklaavissa paineessa 1 atm. 30 minuutin sisällä.

Ennen sterilointia paperi ja sideharso leikataan paloiksi ja pumpuli kääritään halutun kokoisiksi palloiksi tai vanupuikoksi. Sen jälkeen kukin materiaali yksittäin, yksi tai useampi kappale, kääritään paksuun paperiin. Jos pakkaus rikkoutuu, steriloitu materiaali on steriloitava uudelleen, koska sen steriiliys rikkoutuu.

Käsineiden ja muiden kumituotteiden sterilointi. Mikrobien vegetatiivisen muodon saastuttamat kumituotteet (käsineet, putket jne.) steriloidaan keittämällä 2-prosenttisessa natriumbikarbonaattiliuoksessa tai virtaavassa höyryssä 30 minuuttia; kun se on kontaminoitunut itiöt sisältävällä mikroflooralla, autoklaavissa paineessa 1,5-2 atm. 30 tai 20 minuutin sisällä. Ennen sterilointia kumihansikkaiden sisä- ja ulkopuolelta sirotellaan talkkia, jotta ne eivät tartu kiinni. Käsineiden väliin laitetaan sideharso. Jokainen hansikaspari kääritään erikseen sideharsoon ja laitetaan pyörään tässä muodossa.

Patogeenisten mikrobiviljelmien sterilointi. Jatkotyössä tarpeettomia mikrobiviljelmiä sisältävät koeputket ja kupit asetetaan metallisäiliöön, kansi suljetaan ja luovutetaan steriloitavaksi. Patogeenisten mikrobien viljelmät, vegetatiiviset muodot, tapetaan autoklaavissa 30 minuutin ajan 1 atm:n paineessa. Sterilointisäiliöiden toimituksen autoklaaviin suorittaa erityisesti nimetty henkilö kuittia vastaan. Sterilointitila kirjataan erityiseen päiväkirjaan. Tuhottaessa patogeenisuusryhmien I ja II mikrobiviljelmiä sekä näihin ryhmiin kuuluvien taudinaiheuttajien saastuttamaa tai epäiltyä materiaalia jätemateriaalisäiliöt siirretään korkeareunaisille metallialuksille mukana tulevan henkilön läsnä ollessa. saa työskennellä tarttuvan materiaalin kanssa.

Steriloinnin tyypit

Sterilointi keittämällä. Sterilointi keittämällä suoritetaan sterilointilaitteessa. Tislattu vesi kaadetaan sterilointilaitteeseen, koska vesijohtovesi muodostaa kalkkia. (Lasiesineet upotetaan kylmään, metalliesineet kuumaan veteen lisäten natriumbikarbonaattia). Steriloituja esineitä keitetään miedolla lämmöllä 30-60 minuuttia. Steriloinnin alkamisajankohtana pidetään veden kiehumishetkeä sterilointilaitteessa. Keittämisen lopussa instrumentit otetaan steriileillä pinseteillä, jotka keitetään muiden esineiden kanssa.

Kuivakuumsterilointi. Kuivalämmöllä sterilointi suoritetaan Pasteur-uunissa. Sterilointiin valmistettu materiaali asetetaan hyllyille niin, ettei se joudu kosketuksiin seinien kanssa. Kaappi suljetaan ja sen jälkeen lämmitys laitetaan päälle. Steriloinnin kesto 150°C:ssa on 2 tuntia, 165°C:ssa - 1 tunti, 180°C:ssa - 40 minuuttia, 200°C:ssa - 10-15 minuuttia (170°C:ssa paperi- ja puuvillakierros keltainen ja korkeammassa lämpötilassa hiiltynyt). Steriloinnin alku on hetki, jolloin uunin lämpötila saavuttaa halutun korkeuden. Sterilointijakson lopussa uuni sammutetaan, mutta kaapin ovet avataan vasta täysin jäähtyneenä, koska kaappiin tuleva kylmä ilma voi aiheuttaa halkeamia kuumiin astioihin.

Höyrysterilointi paineen alaisena. Höyrysterilointi paineen alaisena suoritetaan autoklaavissa. Autoklaavi koostuu kahdesta kattilasta, jotka on asetettu toisiinsa, kotelosta ja kannesta. Ulompaa kattilaa kutsutaan vesihöyrykammioksi, sisempää sterilointikammioksi. Höyryä tuotetaan höyrykattilassa. Steriloitava materiaali asetetaan sisäkattilaan. Sterilointikattilan yläosassa on pieniä reikiä, joiden läpi höyrykammiosta tuleva höyry kulkee. Autoklaavin kansi on ruuvattu hermeettisesti koteloon. Lueteltujen pääosien lisäksi autoklaavissa on useita sen toimintaa sääteleviä osia: painemittari, vesimittarin lasi, varoventtiili, poisto-, ilma- ja kondenssivesihanat. Painemittaria käytetään sterilointikammiossa syntyvän paineen määrittämiseen. Normaali ilmanpaine (760 mm Hg. Art.) on nolla, joten tyhjäkäynnillä olevassa autoklaavissa painemittarin neula on nollassa. Painemittarin lukemien ja lämpötilan välillä on tietty suhde (taulukko 2).

Taulukko 2.

Painemittarin lukemien ja veden kiehumispisteen suhde

Mittarin asteikon punainen viiva osoittaa autoklaavissa sallitun enimmäistyöpaineen. Varoventtiili suojaa liialliselta paineen muodostumiselta. Se on asetettu ennalta määrättyyn paineeseen, eli paineeseen, jolla sterilointi suoritetaan, kun painemittarin nuoli ylittää linjan, autoklaavin venttiili avautuu automaattisesti ja vapauttaa ylimääräisen höyryn, mikä hidastaa paineen nousua. .

Autoklaavin sivuseinässä on mittalasi, joka näyttää höyrykattilan vedenpinnan. Vesimittarin lasin putkeen on kiinnitetty kaksi vaakasuoraa viivaa - alempi ja ylempi, jotka osoittavat vastaavasti sallitun alemman ja Ylempi taso vettä vesikammiossa. Ilmahana on suunniteltu poistamaan ilmaa sterilointi- ja vesihöyrykammioista steriloinnin alussa, koska ilma huonona lämmönjohtimena rikkoo sterilointimenettelyä. Autoklaavin pohjassa on lauhdutushana, joka vapauttaa sterilointikammion steriloidun materiaalin kuumennettaessa muodostuneesta kondensaatista.

Autoklaavin säännöt. Tarkasta autoklaavi ja instrumentointi ennen työn aloittamista. Autoklaaveissa, joissa on automaattinen höyrynsäätö, vesihöyrykammion sähkötyhjiömanometrin nuolet asetetaan sterilointitilan mukaan: alempi nuoli on asetettu arvoon 0,1 atm. alempi, ylempi - 0,1 atm. käyttöpaineen yläpuolella vesihöyrykammio täytetään vedellä mittalasin ylämerkkiin asti. Vedellä täytön aikana putken venttiili, jonka kautta höyry tulee kammioon, pidetään auki, jotta ilma pääsee poistumaan kattilasta. Autoklaavin sterilointikammio on täynnä steriloitavaa materiaalia. Sen jälkeen autoklaavin kansi (tai ovi) suljetaan, kiinnitetään tiukasti keskuslukolla tai pulteilla; vääristymien välttämiseksi pultit ruuvataan ristiin (halkaisijaltaan). Kytke sitten lämmityslähde päälle ( sähköä, höyry) sulkemalla venttiili putkessa, joka yhdistää höyrylähteen sterilointikammioon. Höyrystymisen alkaessa ja paineen muodostuessa vesihöyrykammioon suoritetaan tyhjennys (ilma poistetaan sterilointikattilasta). Ilmanpoistomenetelmä määräytyy autoklaavin rakenteen mukaan. Aluksi ilma tulee ulos eri osissa, sitten ilmaantuu tasainen jatkuva höyrysuihku, mikä osoittaa, että ilma on kokonaan poistunut sterilointikammiosta. Ilman poistamisen jälkeen venttiili suljetaan ja paineen asteittainen nousu alkaa sterilointikammiossa.

Steriloinnin alku on hetki, jolloin painemittari näyttää asetetun paineen. Sen jälkeen lämmitystehoa vähennetään niin, että paine autoklaavissa pysyy samalla tasolla vaaditun ajan. Sterilointiajan lopussa lämmitys lopetetaan. Sulje putkistossa oleva venttiili, joka syöttää höyryä sterilointikammioon ja avaa lauhdeputken venttiili (alaspäin) vähentääksesi höyryn painetta kammiossa. Kun painemittarin neula on laskenut nollaan, löysää hitaasti kiinnityslaitteita ja avaa autoklaavin kansi.

Steriloinnin lämpötila ja kesto määräytyvät steriloitavan materiaalin laadun ja niiden mikro-organismien ominaisuuksien mukaan, joilla se on saastunut.

Lämpötilan säätö sterilointikammiossa suoritetaan määräajoin bakteriologisilla testeillä. Biotestejä tuottavat Epidemiologian keskuslaitoksen bakteriologiset laboratoriot. Jos testit epäonnistuvat, autoklaavin tekninen kunto tarkistetaan.

Höyrysterilointi. Sterilointi nestehöyryllä suoritetaan Koch-nestehöyrylaitteessa tai autoklaavissa, jossa on auki kierretty kansi ja avoin poistohana. Koch-laite on metallinen ontto sylinteri, jossa on kaksoispohja. Ylemmän ja alemman pohjalevyn välinen tila täytetään 2/3 vedellä (steriloinnin jälkeen jäljelle jäävän veden tyhjentämiseen on hana). Laitteen kannessa on keskellä reikä lämpömittarille ja useita pieniä reikiä höyryn poistumista varten. Steriloitava materiaali ladataan löyhästi laitteen kammioon, jotta se saa mahdollisimman suuren kosketuksen höyryn kanssa. Steriloinnin alku on aika siitä hetkestä, kun vesi kiehuu ja höyry tulee sterilointikammioon. Nestehöyrylaitteessa steriloidaan pääasiassa ravinneväliaineita, joiden ominaisuudet muuttuvat yli 100°C lämpötiloissa. Sterilointi virtaavalla höyryllä on toistettava, koska yksi lämmitys 100 ° C: n lämpötilassa ei anna täydellistä desinfiointia. Tätä menetelmää kutsutaan fraktiosterilointiksi: steriloitua materiaalia käsitellään virtaavalla höyryllä 30 minuuttia päivittäin 3 päivän ajan. Sterilointien välissä materiaalia pidetään huoneenlämmössä, jotta itiöt itävät vegetatiivisiin muotoihin, jotka kuolevat myöhemmän kuumennuksen aikana.

Tyndalisaatio. Tyndalisointi on Tyndallin ehdottama fraktiosterilointi käyttämällä alle 100 °C:n lämpötiloja. Steriloitavan materiaalin kuumennus suoritetaan termostaatilla varustetussa vesihauteessa tunnin ajan 60-65°C:n lämpötilassa 5 vuorokauden ajan tai 70-80°C:ssa 3 vuorokauden ajan. Kuumennusten välillä prosessoitua materiaalia pidetään 25°C:n lämpötilassa, jotta itiöt itävät vegetatiivisiin muotoihin, jotka kuolevat myöhemmissä kuumennuksissa. Tyndallisaatiota käytetään proteiinia sisältävien ravintoaineiden kuivaamiseen.

Mekaaninen sterilointi bakteeri-ultrasuodattimilla. Bakteerisuodattimia käytetään nesteen vapauttamiseen siinä olevista bakteereista sekä bakteerien erottamiseen viruksista, faageista ja eksotoksiineista. Bakteerisuodattimet eivät pidättele viruksia, joten ultrasuodatusta ei voida pitää sterilisaationa sanan hyväksytyssä merkityksessä. Ultrasuodattimien valmistuksessa käytetään hienojakoisia materiaaleja (kaoliini, asbesti, nitroselluloosa jne.), jotka voivat vangita bakteereja.

Asbestisuodattimet (Seitz-suodattimet) ovat 3-5 mm paksuja ja halkaisijaltaan 35 ja 140 mm asbestilevyjä pienten ja suurten nestemäärien suodattamiseen. Asbestisuodattimia valmistetaan maassamme kahta laatua: "F" (suodatus), jotka pidättävät suspendoituneet hiukkaset, mutta kulkevat bakteereja, ja "SF" (steriloiva), tiheämpi, pidättävä bakteeri. Ennen käyttöä asbestisuodattimet asennetaan suodatinlaitteisiin ja steriloidaan yhdessä niiden kanssa autoklaavissa. Asbestisuodattimia käytetään kerran. Kalvo-ultrasuodattimet on valmistettu nitroselluloosasta ja ne ovat valkoisia kiekkoja, joiden halkaisija on 35 mm ja paksuus 0,1 mm.

Bakteerisuodattimet eroavat huokoskoon suhteen ja on merkitty sarjanumeroilla (taulukko 3).

Taulukko 3

Bakteerisuodattimet

Kalvosuodattimet steriloidaan keittämällä välittömästi ennen käyttöä. Suodattimet asetetaan tislattuun veteen, joka on lämmitetty 50-60°C lämpötilaan niiden kiertymisen estämiseksi, keitetään miedolla lämmöllä 30 minuuttia vaihtaen vettä 2-3 kertaa. Steriloidut suodattimet poistetaan sterilointilaitteesta flamboiduilla ja jäähdytetyillä pinseteillä, joissa on sileät kärjet vaurioiden välttämiseksi.

Nesteiden suodattamiseksi bakteerisuodattimet asennetaan erityisiin suodatinlaitteisiin, erityisesti Seitz-suodattimeen.

Se koostuu kahdesta osasta: ylempi, sylinterin tai suppilon muotoinen osa, ja laitteen alaosa, jossa on metalliverkosta tai puhtaasta keraamisesta levystä tehty ns. suodatinpöytä, jossa kalvo tai asbestisuodatin. on sijoitettu. Laitteen tukiosa on suppilon muotoinen, jonka kapeneva osa sijaitsee Bunsen-pullon kaulan kumitulpassa. Toimivassa kunnossa laitteen yläosa kiinnitetään ruuveilla alempaan. Ennen suodatuksen aloittamista asennuksen eri osien liitokset täytetään parafiinilla tiiviyden luomiseksi. Pullon poistoputki on yhdistetty paksuseinäisellä kumiputkella vesisuihku-, öljy- tai polkupyöräpumppuun. Sen jälkeen suodatettu neste kaadetaan laitteen sylinteriin tai suppiloon ja pumppu käynnistetään, jolloin vastaanottoastiaan syntyy tyhjiö. Syntyneen paine-eron seurauksena suodatettu neste kulkee suodattimen huokosten läpi vastaanottimeen. Mikro-organismit jäävät suodattimen pinnalle.

Koivujen valmistus

Mikro-organismien tutkimiseksi värillisessä muodossa lasilevylle tehdään sively, kuivataan, kiinnitetään ja värjätään.

Testimateriaali levitetään ohuena kerroksena hyvin rasvattoman lasilevyn pinnalle.

Silmät valmistetaan mikrobiviljelmistä, patologisesta materiaalista (yskös, mätä, virtsa, veri jne.) ja ruumiiden elimistä.

Tutkittavan materiaalin luonne määräytyy näpäytysten valmistustekniikan mukaan.

Näytöjen valmistus mikrobiviljelmistä nestemäisellä ravintoaineella ja nestemäisestä patologisesta materiaalista (virtsa, aivo-selkäydinneste jne.). Pieni pisara testinestettä levitetään bakteerisilmukalla lasilevylle ja silmukat jaetaan pyöreällä liikkeellä yhtenäiseksi kerrokseksi ympyrän muodossa, jonka halkaisija on penniäkään.

Verikokeen valmistus. Pisara verta levitetään lasilevylle lähemmäksi sen yhtä päätä. Toinen - kiillotettu - lasi, jonka tulisi olla objektilasia kapeampi, asetetaan ensimmäisen päälle 45° kulmassa ja tuodaan veripisaralle, kunnes se koskettaa sitä. Kun veri leviää pitkin kiillotettua reunaa, lasia liu'utetaan oikealta vasemmalle, jolloin veri jakautuu tasaisesti ohuena kerroksena koko lasin pinnalle. Vedon paksuus riippuu lasien välisestä kulmasta: mitä terävämpi kulma, sitä ohuempi veto. Oikein valmistettu sively on vaaleanpunainen väri ja sama paksuus kauttaaltaan.

Paksun pisaran valmistus. Lasilevyn keskelle laitetaan veripisara Pasteur-pipetillä tai lasi suoraan esiin työntyvän veripisaran päälle. Lasille levitetty veri levitetään bakteerisilmukalla siten, että tuloksena olevan sivelynäytteen halkaisija vastaa pennikokoisen kolikon kokoa. Lasi jätetään vaakasuoraan asentoon, kunnes veri kuivuu. "Paksun pisaran" veri jakautuu epätasaisesti muodostaen epätasaisen reunan.

Suihkeen valmistus viskoosista materiaalista (yskös, mätä). Lasilevylle lähempänä kapeaa reunaa kertynyt yskös tai mätä peitetään toisella lasilevyllä. Lasit painetaan hieman toisiaan vasten.

Sen jälkeen lasien vapaat päät vangitaan molempien käsien 1 ja 2 sormella ja levitetään vastakkaisiin suuntiin niin, että siirrettäessä molemmat lasit asettuvat tiukasti toisiaan vasten. Levyt saadaan tasaisesti jakautuneesta materiaalista, joka vie suuren alueen.

Näytteen valmistaminen viljelmistä, joissa on tiheä ravintoaine. Pisara vettä levitetään puhtaan, hyvin rasvattoman lasilevyn keskelle, siihen viedään bakteerisilmukka, jossa on pieni määrä tutkittavaa mikrobiviljelmää, niin että nestepisara muuttuu hieman sameaksi. Tämän jälkeen silmukan ylimääräinen mikrobimateriaali poltetaan liekissä ja sively valmistetaan yllä olevan menetelmän mukaisesti.

Näytöjen valmistus elimistä ja kudoksista. Desinfiointia varten elimen pinta poltetaan lämmitetyillä pinsettien oksilla, tähän kohtaan tehdään viilto ja leikataan syvyydestä terävällä saksilla pieni pala kudosta, joka asetetaan kahden lasilevyn väliin. . Jatka sitten samalla tavalla kuin valmistettaessa sivelyä mätä ja ysköstä. Jos elimen kudos on tiheä, viillon syvyydestä tehdään kaapiminen skalpellilla. Kaapimalla saatu materiaali levitetään ohuena kerroksena lasin pinnalle skalpellilla tai bakteerisilmukalla.

Kudoksen elementtien ja siinä olevien mikro-organismien suhteellisen sijainnin tutkimiseksi tehdään sivelynäytteitä. Tätä varten elimen keskeltä leikattu pieni pala kudosta vangitaan pinseteillä ja levitetään peräkkäin useita kertoja leikatulla pinnalla lasilevylle, jolloin saadaan sarja sivelyjälkiä.

Levyjen kuivaus ja kiinnitys. Lasilevylle valmistettu sively kuivataan ilmassa ja kiinnitetään täydellisen kuivumisen jälkeen. Kiinnittämisen yhteydessä sively kiinnittyy lasilevyn pintaan, ja siksi valmisteen myöhemmän värjäyksen aikana mikrobisoluja ei huuhdo pois. Lisäksi tapetut mikrobisolut värjäytyvät paremmin kuin elävät.

On olemassa fyysinen kiinnitysmenetelmä, joka perustuu iskuon korkea lämpötila mikrobisolussa ja kemiallisia menetelmiä, joihin liittyy proteiinien hyytymistä aiheuttavien aineiden käyttö. On mahdotonta kiinnittää liekin päälle I-II patogeenisuusryhmien patogeenejä sisältäviä sivelynäytteitä.

Fyysinen tapa korjata. Valmisteen sisältävä lasilevy otetaan pinseteillä tai I ja II sormella oikea käsi kylkiluiden takana vedolla ylöspäin ja tasaisella liikkeellä ne suoritetaan 2-3 kertaa polttimen liekin yläosan yli. Koko kiinnitysprosessi saa kestää enintään 2 sekuntia. Kiinnityksen luotettavuus tarkistetaan seuraavalla yksinkertaisella tekniikalla: tahraton lasilevyn pinta levitetään vasemman käden takapinnalle. Kun sively on kiinnitetty kunnolla, lasin tulee olla kuuma, mutta se ei saa aiheuttaa palovammaa.

Kemiallinen kiinnitys. Käytetään myös tahrojen korjaamiseen kemialliset aineet ja taulukossa 4 esitetyt yhdisteet.

Taulukko 4

Aineet kemialliseen kiinnitykseen

Objektilasi, jossa on kuivattu sively, upotetaan kiinnitysainetta sisältävään pulloon ja kuivataan sitten ilmassa.

Väritysvedot

Smears värjäystekniikka. Tahrojen värjäämiseen käytetään maaliliuoksia tai väripaperia, jota ehdotti A.I. Sininen. Valmistuksen helppous, helppokäyttöisyys sekä mahdollisuus säilyttää väripaperia määräämättömän pitkään, olivat perusta niiden laajalle käytölle erilaisissa värjäysmenetelmissä.

Väritysvedot värityspaperilla. Kuivattuun ja kiinteään valmisteeseen laitetaan muutama tippa vettä, laitetaan 2x2 cm kokoisia värillisiä papereita, joiden tulee pysyä kosteana koko värjäysajan ajan ja istua tiukasti lasin pintaa vasten. Kuivattaessa paperia kostutetaan lisäksi vedellä. Smear-värjäyksen kesto määräytyy värjäysmenetelmän mukaan. Värjäyksen lopussa paperi poistetaan varovasti pinseteillä ja sively pestään vesijohtovedellä ja kuivataan ilmassa tai suodatinpaperissa.

Tahrojen värjäys väriaineliuoksilla. Kuivattuun ja kiinteään valmisteeseen levitetään pipetillä väriainetta sellainen määrä, että se peittää koko sivelypinnan. Värjättäessä sivelyä tiivistetyillä väriaineliuoksilla (Ziehl-karbolinen fuksiini, karbolinen gentian tai kristallivioletti), värjäys suoritetaan suodatinpaperilla, joka pidättää värihiukkaset: suodatinpaperinauha asetetaan kiinteälle sivelylle ja väriliuos kaadetaan se.

Mikroskooppista tutkimusta varten valmistetut, kuivatut ja kiinnitetyt sivelynäytteet värjätään. Väritys on yksinkertaista ja monimutkaista. Yksinkertainen värjäys koostuu minkä tahansa maalin levittämisestä tahraan tietyn ajan. Useimmiten yksinkertaiseen värjäykseen käytetään alkoholi-vesi (1:10) Pfeiffer fuksiinia, Lefflerin metyleenisinistä ja safraniinia. Eosiinia happamana väriaineena käytetään vain solujen sytoplasman värjäykseen ja taustan sävytykseen. Hapan fuksiini ei sovellu bakteerien värjäämiseen.

BAKTERIOLOGINEN LABORATORIO- tieteellinen ja käytännön laitos, joka suorittaa bakteriologisia, immunologisia ja muita mikrobiologisia tutkimuksia. Mikrobiologian yleisen erilaistumisen ja bakteriologian yhtenä sen haaran mukaisesti on olemassa bakteriologisia laboratorioita, joilla on erilaisia ​​tehtäviä ja tehtäviä. Sairaaloiden kliiniset ja diagnostiset bakteriologiset laboratoriot tekevät tartuntataudin diagnoosin vahvistamiseksi tai selkeyttämiseksi tarvittavaa tutkimusta ja hoidon tehokkuutta.

Sairaalan bakteriologisten laboratorioiden erikoistuminen määräytyy sairaalan profiilin mukaan (akuutit infektiotaudit, lasten infektiotaudit, sukupuolitaudit, tuberkuloosi jne.). Terveys-epidemiologisten asemien bakteriologiset laboratoriot, kuten kliiniset laboratoriot, harjoittavat diagnostista työtä, palvelevat sairaaloita, joilla ei ole omia laboratorioita, suorittavat väestön ennaltaehkäiseviä tutkimuksia sekä elintarvikkeiden ja veden terveys-bakteriologista tutkimusta.

Lääketieteellisten laboratorioiden lisäksi käytössä on laaja eläinlääketieteellisten bakteriologisten laboratorioiden verkosto, jotka suorittavat eläinten tartuntatautien diagnostisia ja ennaltaehkäiseviä tutkimuksia (katso Eläinlääkintälaboratorio). Erittäin erikoistuneita ovat valvontatoimintoja suorittavat bakteriologiset laboratoriot, kuten vesilaitoksen bakteriologiset laboratoriot, rokotteita, seerumeita ja muita bakteerivalmisteita valmistavien yritysten valvontalaboratoriot. Desinfiointitiloissa järjestetään erityisiä bakteriologisia laboratorioita. Heidän tehtävänsä on desinfioinnin bakteriologinen laadunvalvonta. Lääketieteellisen ja eläinlääketieteellisen profiilin bakteriologisten laboratorioiden ohella on erikoistuneita bakteriologisia laboratorioita, jotka palvelevat tarpeita Ruokateollisuus(viininvalmistus, leivonta, panimo ja muut yritykset), maatalous jne. Toisin kuin luetellut bakteriologiset laboratoriot, jotka ratkaisevat käytännön ongelmia, asiaankuuluvien tutkimuslaitosten rakenteeseen kuuluu eri profiilien bakteriologisia laboratorioita, jotka on suunniteltu ratkaisemaan erilaisia ​​​​tutkimusongelmia. Bakteriologiset laboratoriot voivat olla kiinteitä ja liikkuvia. Jälkimmäisiä käytetään sotilasyksiköiden sanitaariseen ja epidemian torjuntaan sekä retkikunnallisiin kenttäolosuhteisiin (katso Laboratorio, sotilaskenttäolosuhteissa). Mobiililaitteiden lisäksi joukkoilla on myös kiinteät laboratoriot. Bakteriologisissa laboratorioissa tehtävän tutkimuksen erityispiirteet määrää laboratorioiden rakenteen ja työskentelytavan niissä.

Bakteriologisille laboratorioille tärkein ja sen työn erityispiirteistä johtuva vaatimus on sellaisten olosuhteiden luominen, jotka varmistavat tutkimuksen suorittamisen steriileimmissä olosuhteissa ja takaavat henkilöstön ja muiden mahdollisilta tartunnalta. Bakteriologisen laboratorion rakenne sisältää: itse laboratorion ja sen lisäksi useita alaosastoja. Käsittele niitä: sredovovarnya, pesu, valmistelu, sterilointi ja vivarium (katso). Nämä alaosastot ovat itsenäisinä rakenneyksiköinä osa suuria bakteriologisia laboratorioita. Pienissä bakteriologisissa laboratorioissa ei ole vivaariumeja ja erityistä valmisteluhuonetta, ja väliaine- ja sterilointihuoneet voidaan yhdistää yhdeksi huoneeksi.

Laite ja varusteet

Riisi. 5. Lasilastat. Kuva 6. Platinalangasta valmistettu lasta.

Bakteriologisten laboratorioiden tilojen tulee olla riittävän valoisia ja tilavia. Seinät on maalattava öljymaalilla, eikä lattiassa saa olla halkeamia. Laboratorion ikkunoiden tulee olla suunnattu pohjoiseen tai luoteeseen. Etelään suunnattuna ikkunat on ripustettu valkoisilla verhoilla. Bakteriologisessa laboratoriossa tulee olla pesuallas tai pesuallas, jonka yläpuolelle laitetaan hyllylle pullo käsien desinfiointiliuoksella. Bakteriologin työpöytä sijoitetaan mahdollisuuksien mukaan 1 m etäisyydelle ikkunasta ja peitetään linoleumilla tai lasilla. Kaasupoltin asetetaan pöydälle (kaasupolttimen puuttuessa alkoholipoltin). Työpaikan pakollisia varusteita ovat pipettipurkki desinfiointiliuoksella (3 % karbolihappoliuos), uudelleensuljettava posliini- tai lasiastia vanulle, bakteerisilmukan pidike, sarja bakteeristandardeja, koeputkitelineet, emaloidut kyvetit, pinsetit, sakset ja skalpelli, puhtaat lasilevyt reikillä ja ilman, sekä peitinlasit. Yleensä käytetään dioja, joiden koko on 26 x 76 mm ja paksuus 1 - 1,2 mm, peitelasit 18 x 18 tai 20 x 20 mm. Bakteriologinen laboratorio tulee varustaa metallialustalla petrimaljoille, galvanoiduille kauhoille tai säiliöille tartunnan saaneiden astioiden tai laitteiden kaatamiseen. Mikroskoopit säilytetään kotelossa tai lasikannen alla. Työpöytä ei saa olla täynnä tarpeettomia esineitä. Yleensä bakteriologisessa laboratoriossa on lisäksi pieni lisäpöytä kiinteiden valmisteiden värjäystä varten. Tällaiselle pöydälle sijoitetaan: joukko tarvittavia väriaineita ja reagensseja lohkossa, jossa on pipetejä ja kumipurkkeja (kuva 1), emaloitu kyvetti tai kiteytyslaite jalustalla valmisteita varten, lankapinsetit tai Cornet-pinsetit (kuva 2) kiinnityslasit, suodatinpaperiarkit nesteen poistamiseksi pestyistä valmisteista, aluslevy (kuva 3) tai vesipullo. Bakteriologinen laboratorio on varustettu erilaisilla tutkimukseen tarvittavilla välineillä. Tavallisten kemiallisten välineiden (sylinterit, pullot, dekantterilasit, mittapipetit jne.) lisäksi tarvitaan bakteriologisiin ja immunologisiin analyyseihin tarkoitettuja erikoisvälineitä: 1) lasisia petrimaljoja, joilla kasvatetaan bakteereita tiheällä alustalla ja saadaan eristettyjä bakteeripesäkkeitä; 2) bakteerimatot (kuvio 4) - litteät pullot (kooltaan 22 x 17 x 5 cm), joita käytetään suuren bakteerimäärän kasvattamiseen; 3) Roux-putket supistimella bakteerien kasvattamiseksi perunaparvissa; 4) Wasserman-koeputket, joiden pituus on 90 mm ja sisähalkaisija 9-10 mm komplementin kiinnitys- ja agglutinaatioreaktion aikaansaamiseksi; 5) 90 mm pitkät ja halkaisijaltaan 3-5 mm saostusputket saostusreaktion aikaansaamiseksi; 6) bakteerikoeputket, joita käytetään bakteerien kasvattamiseen kiinteillä ja nestemäisillä ravintoaineilla; 7) Pasteur-pipetit, joita käytetään nestemäisten materiaalien siirrostukseen, nesteiden laimentamiseen tippamenetelmällä, väriaineiden levittämiseen jne. ; 8) Mohrin pipetit tai pipetit, joiden keskiosassa on pallomainen laajennus tartunnan saaneen nestemäisen materiaalin inokulaatiota varten, sekä automaattiset pipetit tai pipetit kumipäärynöillä, lukuun ottamatta materiaalin imua suun kautta. Viljelmien viljelyyn nestemäisissä ravintoalustassa, ravintoalustojen, reagenssien jne. varastoinnissa ja pullotuksessa käytetään tavallisia laboratoriolaseja. Bakteriologisessa laboratoriossa käytettävät lasitavarat on ensin liuotettava, jota varten ne yleensä keitetään 1-2 % suolahappoliuoksessa. Bakteriologisten astioiden, joissa kasvatetaan mikrobeja, desinfiointi tulee suorittaa vain korkean lämpötilan avulla ilman mitään desinfiointiaineet, koska jälkimmäisen läsnäolo, jopa jäämien muodossa, voi edelleen estää mikrobien kehittymistä. Mikro-organismien siirrostus bakteriologisessa laboratoriossa suoritetaan käyttämällä bakteriologisia silmukoita, lasi- tai platinalastat (kuvat 5 ja 6). Bakteerien viljely tapahtuu ilmatermostaatissa (katso) ja suurissa bakteriologisissa laboratorioissa - erityisissä termostaattihuoneissa.

Jos tarvitset tarkkaa lämpötilan säätöä ja suhteellisen lyhytaikaista bakteeriviljelyä tai immunologisia reaktioita asetettaessa, on kätevää käyttää vesiultratermostaatteja. Jokaisessa bakteriologisessa laboratoriossa, jossa he tutkivat anaerobeja, on oltava anaerobinen ilmapallo (katso), eksikkaattorit ja tyhjiöpumput ilman poistamiseksi. Jälkimmäisiä käytetään myös suodatuksessa. Parhaiden aseptisten olosuhteiden saavuttamiseksi viljelmien kylvössä, eristämisessä tai jatkoviljelyssä bakteriologiset laboratoriot on varustettu erityisillä lasitetuilla laatikoilla esilaatikoilla. Laatikko sisältää kaasupolttimen, astian desinfiointiliuoksella ja mahdollisuuksien mukaan bakteereja tappavan uvio-lampun. Jos kiinteää laatikkoa ei ole, voit käyttää kannettavaa pöytälaatikkoa, kun teet töitä, jotka vaativat suurta aseptisuutta (katso Laatikot, mikrobiologiset).

Riisi. 7. Automaattinen pesäkkeiden laskuri television ohjauslaitteella: 1 - petrimalja kasvaneilla pesäkkeillä; 2 - elektroninen tulostaulu, jossa numerot osoittavat pesäkkeiden lukumäärän petrimaljassa; 3 - TV-ruutu, jolla voi katsella suurennettua kuvaa petrimaljassa kasvaneista pesäkkeistä.

Bakteeriviljelmät, lääke- ja diagnostiset seerumit, faageja ja muita biologisia substraatteja (seerumi, peptoniliuokset jne.) säilytetään jääkaapissa. Bakteeriviljelmät on tarkoitus säilyttää suljetuissa koeputkissa tai ampulleissa, joita varten bakteriologisissa laboratorioissa tulee olla juotospoltin tai tavallinen puhalluspoltin. Minkä tahansa bakteriologisen laboratorion pakollinen lisävaruste on mikroskooppi (katso). Useimmissa tutkimuksissa käytetään MBI-3-mikroskooppia ja valaisimia. Tutkimusbakteriologiset laboratoriot on varustettu myös vaihekontrasti-, luminesenssi- ja elektronimikroskoopit. Petrimaljoilla kasvaneiden bakteeripesäkkeiden kvantifiointiin käytetään eri järjestelmien laskureita. Yksi tällainen laskuri on automaattinen laskuri, jossa on skannauslaite ja television ohjauslaite, joka voi laskea jopa 500 kuppia tunnissa (kuva 7). Bakteriologisten laboratorioiden laitteiston tärkeitä elementtejä ovat ravistelulaitteet, joita käytetään tapauksissa, joissa on tarpeen varmistaa materiaalin sekoittaminen ja ravistelu tietyn ajan (veren defibrinaatio, materiaalin homogenointi jne.). Tiheiden hiukkasten (mikrobisolut, kudossolut, tutkitun materiaalin suspensio) sedimentointiin, jotka ovat nestekäytössä, sentrifugit (katso). Useimmissa tutkimuksissa käytetään useimmiten sentrifugeja, jotka pyörivät nopeudella 3000 - 3500 rpm. Sähkösentrifugien puuttuessa käytetään manuaalisia sentrifugeja.

Bakteriologisten laboratorioiden toiminta riippuu suurelta osin perusvaatimuksen noudattamisesta - työskennellä aseptisissa olosuhteissa steriileillä esineillä (työkalut, ravintoaineet, astiat). Siksi bakteriologisten laboratorioiden laitteissa sterilointilaitteistolla on merkittävä paikka (katso). Jokaisessa bakteriologisessa laboratoriossa on autoklaavi (katso), Kochin laite, Pasteurin uuni (katso Pasteurin uuni), laite heran koagulaatiota varten. Keittämällä sterilointiin käytetään tavanomaisia ​​sterilointilaitteita (katso), lämmitetään sähköverkosta tai muulla tavalla.

Käytä bakteerisuodattimia lämpötilan vaikutuksesta muuttuvien nestemäisten substraattien sterilointiin (katso). Kostuneiden esineiden (astiat, työkalut) kuivaus höyry- tai painesteriloinnin jälkeen suoritetaan kuivauskaapeissa (katso). Yleisimmin käytettyjen ravintoalustojen valmistukseen tarvittavat bakteriologisten laboratorioiden laitteet sisältävät ilmoitettujen laitteiden lisäksi väliaineiden kaatolaitteet, reagenssisarjat ja välineet tiettyjen kemiallisten analyysien suorittamiseen (amiinitypen, tryptofaanin, kloridien määritys) jne.), sekä välineet ja reagenssit väliaineen pH:n määrittämiseen; yleisilmaisin, indikaattorit ja Michaelis-vertailija tai potentiometri.

Työ eläinten kanssa bakteriologisissa laboratorioissa suoritetaan erityisessä huoneessa - vivariumissa. Kokeet eläimillä eivät ole sallittuja varsinaisissa bakteriologisissa laboratorioissa. Eläinten kanssa tehtävää perustyötä varten (verenotto, biologisten näytteiden ottaminen, diagnostiset reaktiot jne.) sinulla on oltava: vaaka hiirten, sikojen ja kanien punnitsemiseen, koneet tai laitteet niiden kiinnittämiseen (kuva 8), sarja ruiskut, numerot eläinten merkitsemiseen (tai väriaineet), karvanpoistolaitteet.

Bakteriologisen työn spesifisyys määrittää erityisen korkeat vaatimukset bakteriologisten laboratorioiden tilojen puhtaudelle. Erityisen tärkeää on ilman puhtaus, pölyn puuttuminen siinä. Bakteriologisten laboratorioiden tilat kannattaa siivota työpäivän lopussa tai muutama tunti ennen töiden alkamista, koska siivouksen aikana ilmaan noussut pöly lisää mikrobien pitoisuutta siinä ja vaikeuttaa työn sterilointia. . Tilojen siivouksen jälkeen ennen työtä on suositeltavaa altistaa ne säteilylle uvio bakterisidisilla lampuilla 0,5-1 tunnin ajan. Laboratorion sisäisen infektion ja tartunnan leviämismahdollisuuden estämiseksi bakteriologisessa laboratoriossa työskennellessä on noudatettava seuraavia perussääntöjä: 1) kaikkien laboratoriossa olevien tulee pukeutua takkiin; 2) liiallinen puhuminen ja kävely ei ole sallittua; 3) jokaisen työntekijän tulee käyttää vain hänelle osoitettua työpaikkaa; 4) syöminen ja tupakointi on kielletty bakteriologisessa laboratoriossa; 5) tarttuvan materiaalin kanssa työskenneltäessä on käytettävä työkaluja (pinsetit, neulat, koukut) äläkä missään tapauksessa koske siihen käsilläsi; kaikki inventaario, joka on ollut kosketuksissa tarttuvaa materiaalia, on steriloitava tai tuhottava; 6) nestemäisen materiaalin imussa on suositeltavaa käyttää kumilamppuja; pipetit on suljettava puuvillatulpilla; 7) tartunnan saaneiden nesteiden siirto astiasta astiaan suoritetaan desinfiointinesteellä täytetyn tarjottimen tai kiteyttimen päällä; 8) kaikki kylvöyn, uudelleenkylvöyn, viljelmien eristämiseen ja infektoituneesta materiaalista valmistettujen valmisteiden valmistukseen liittyvät työt suoritetaan polttimella polttamalla koeputkien, silmukoiden, lastat jne. reunoja; 9) koeputket, pullot, pullot jne., joissa infektoitunutta materiaalia työnnetään, merkitään välittömästi materiaalin laadulla, viljelmän nimellä ja numerolla sekä päivämäärällä; 10) jos tarttuvaa materiaalia on päässyt ympäröiviin esineisiin, on välittömästi suoritettava perusteellinen desinfiointi: kaada tämä paikka desinfiointiliuoksella ja polta se sitten, jos mahdollista, vanupuikolla polttavalla alkoholilla; 11) työn aikana tartunnan saaneet esineet ja materiaalit rekisteröidään, kerätään säiliöön tai ämpäriin, suljetaan, sinetöidään ja steriloidaan samana päivänä; 12) viljelmät säilytetään tarvittaessa agarkolonneissa öljyn alla suljetuissa etiketeillä varustetuissa putkissa; 13) kaikkien viljelmien sekä työn aikana tartunnan saaneiden eläinten rekisteröinti ja kirjanpito pidetään erityismuotoisessa päiväkirjassa.

kuva osoitteesta lentachel.ru

Vain sata vuotta sitten infektio aikana tieteellinen tutkimus pidettiin lähes väistämättömänä. Monet tutkijat asettivat ruumiinsa kuolemanvaaralle tutkimalla mikrobeja ja bakteereja, joiden luonne oli vähän tiedossa. Nykyään suurin osa meitä ympäröivistä vaarallisista mikro-organismeista on kuvattu ja tutkittu, ja lisäksi erityisiä lääketieteelliset laitteet bakteriologisille laboratorioille, joiden käyttö 99 %:n todennäköisyydellä suojaa tutkijoita kaikilta työperäisiltä riskeiltä.

Kaikki esineet, joilla bakteriologisen laboratorion työntekijät työskentelevät, ovat kyllästyneet patogeeninen mikrofloora. Terveellisen ympäristön ylläpitämiseksi huoneessa, suoran kosketuksen välttämiseksi saastuneiden materiaalien kanssa, käytetään huonekaluja, vaatteita ja astioita, joilla on tehostettu suoja- ja antimikrobisia ominaisuuksia.

Hermeettisesti suljetut lasi- ja metallikaapit ja -laatikot, kätevät laboratoriopöydät desinfiointiin, sterilointiin ja autoklaavivarusteisiin sekä lukittava jääkaappi ovat esineitä, jotka varmistavat tartunnan saaneita näytteitä tutkivien ihmisten turvallisuuden.

Kaikki näytteiden säilytykseen käytettävät välineet: pullot, dekantterilasit, on suljettu hermeettisesti, jotta vältetään bakteerien leviäminen laboratorioilmaan.

Säiliöiden valmistukseen käytetään erityistä rikkoutumatonta lasia tai lujaa muovia. kaksinkertainen seinä, erityinen kestävä muoto pohja, kansien, tarjottimien ja kyvettien kumielementit luovat parhaat olosuhteet eristää vaaralliset naapurit, kuten meningokokit, streptokokit, stafylokokit, basillit ja klostridit.

Ennen tutkimuksen aloittamista henkilökunta pukeutuu erikoisvaatteisiin: suojapuku, naamari, suojalasit. Erittäin vaarallisten aineiden kanssa työskentelyyn käytetään kumitettuja esiliinoja tai erityisiä vettä hylkivällä kyllästetyillä takkeilla.

Oikea-aikainen ilmankäsittely ultraviolettisäteilyttäjillä ja bakteereja tappavilla lampuilla, todistettujen pesumuutosten käyttö, kaikkien työntekijöiden täydellinen suojavaatetus on yleisesti hyväksytty standardi, josta poikkeaminen on hallinnollista ja vakavien seurausten tapauksessa rikosoikeudellista. rangaistavaa.

Integroidut laitteet ja kaikkien varotoimenpiteiden toteuttaminen auttavat säilyttämään työntekijöiden terveyden, vähentämään työperäistä sairastuvuutta ja varmistamaan korkean tutkimuksen tehokkuuden: on havaittu, että luotettavien, hyväksi havaittujen suojavarusteiden käyttö vähentää ahdistusta, edistää nopeampaa ja tehokkaampaa toimintaa.

Työskentely tartuntatautien taudinaiheuttajien kanssa edellyttää, että laboratoriotilat sijaitsevat erillisessä rakennuksessa tai eristetään sairaalaosastoista, ruokalohkoista. Diagnostisissa laboratorioissa tulee olla kaksi sisäänkäyntiä: yksi työntekijöille ja toinen aineiston toimittamiseen tutkimusta varten. Materiaalin vastaanottaminen siirtoikkunan kautta on sallittua. Laboratoriotilat on jaettu "tartunta-" ja "puhdas" vyöhykkeisiin ja sijaitsevat analyysin aikana.

Laboratorion "puhdas" alue sisältää:

1. Tilaa päällysvaatteille.
2. Tila valmistelutyötä varten (valmisteluhuone, pesuhuone ravintoalustojen valmistukseen ja pullotukseen jne.)
3. Sterilointi.
4. Huone, jossa on jääkaappi viljelyalustojen ja diagnostisten valmisteiden säilyttämistä varten.
5. Tilaa lepoon ja syömiseen.
6. Dokumentaatiohuone.
7. Kodinhoitohuoneet.
8. WC.

"Tarttuvaan" vyöhykkeeseen sijoitetaan:

1. Tila tutkimukseen vastaanotetun aineiston vastaanottamista ja rekisteröintiä varten.

3. Huoneet bakteriologiselle tutkimukselle.

4. Huoneet serologisia tutkimuksia varten.

5. Tila luminesenssimikroskopialle.

6. Tila zooentomologiselle työlle.

7. Termostaattihuone ja autoklaavi.

Tilat, joissa työskennellään elävien organismien kanssa, on varustettu bakteereja tappavilla lampuilla.

Lääketieteellisen mikrobiologisen laboratorion tehtävä - tartuntatautien diagnosointi. Tätä varten taudinaiheuttaja eristetään ja elimistön immuunivaste mikro-organismien käyttöönoton yhteydessä määritetään (serologinen diagnostiikka). Lisäksi suorita patogeenisten (patogeenisten) mikro-organismien kantajien tunnistaminen. On laboratorioita, joissa suoritetaan virologisia tutkimuksia. Erityisissä terveys- ja bakteriologisissa laboratorioissa tehdään tutkimuksia ulkoisen ympäristön ja erilaisten esineiden mikrobikontaminaation asteen tunnistamiseksi.

laboratoriohuone suunniteltu mikrobiologiseen tutkimukseen. Sen tulee olla tilava ja valoisa. Seinät on maalattu vaalealla öljymaalilla, lattia on päällystetty linoleumilla, laboratoriopöydät on päällystetty muovilla tai lasilla, mikä on kätevä märkäpuhdistukseen ja desinfiointiin. Laboratoriohuoneessa on työpöydät lääkärille ja laborantille, paikka värjäysvalmisteille, termostaatti, jääkaappi, sentrifugi, mikroskooppi, kaapit, pesuallas kuumalla ja kylmällä vedellä, kaasupolttimet kaasun puuttuessa, ne toimivat alkoholipolttimien kanssa).

Laboratoriotilojen lukumäärä määräytyy laboratorion työn määrän mukaan. Suurissa laboratorioissa työskentelyä varten on varattu erilliset huoneet erilaisia ​​tyyppejä taudinaiheuttajia.

Pöytätaso asennetaan ikkunan viereen siten, että valo putoaa sivulta tai suoraan. Pöydällä asetetaan poltin, bakteriologiset silmukat, desinfiointiliuoksen purkit ja vanu.

Ennen työn aloittamista kaikki tutkimukseen tarvittava asetetaan pöydälle. Poltin asennetaan etäisyydelle, joka on yhtä suuri kuin työntekijän kyynärvarsi, eli asentoon, joka sulkee pois tarpeettomat liikkeet työn aikana. Polttimen liekin koko ja oikea hehku säädetään ennen työn aloittamista.

Rutiinitutkimuksen aikana termostaatissa lämpötilan tulee olla 37°C. Suurissa laboratorioissa voidaan varustaa erityinen lämpöhuone. Lämpötila tallennetaan päivittäin.

Riisi. 1 Kuiva uuni

Joitakin ravintoaineita, diagnostisia valmisteita, verta, sappia jne. säilytetään jääkaapissa.

Sentrifugia käytetään erottamaan kiinteitä hiukkasia nesteestä (esimerkiksi punasolut seerumista).

Hyllyt, astiat, kuivat ravintoaineet, reagenssit jne. säilytetään kaapeissa.

Pesualtaan lähellä tulee olla säiliö, jossa on desinfiointiliuosta käsien puhdistamiseen ja ensiapulaukku, jossa on joukko ensiapuvälineitä.

Nyrkkeily on tiukasti eristetty huone mikrobiologiselle työlle erityistä steriiliyttä vaativissa olosuhteissa. Ilman lannoitus suoritetaan bakterisidisten lamppujen avulla. Tietyn lämpötilan ja kosteuden desinfioidun ilman syöttö laatikkoon tulo- ja poistoilmanvaihdon kautta paras tapa tarjoamalla työhön tarvittavat olosuhteet. Yleensä nyrkkeilyssä työskentelee kaksi henkilöä. He menevät laatikkoon eteisen kautta, jossa he vaihtavat vaatteet (viitta, tossut, lippalakki, naamio) ja menevät laatikkoon toisen oven kautta.

Nyrkkeilyssä he eivät puhu ja välttävät tarpeettomia liikkeitä.

Viljelyalustan valmistustilan tulee olla pesu- ja sterilointihuoneen lähellä. Tässä huoneessa tulee olla pesuallas kuumalla ja kylmällä vedellä, tislaaja, liesi (kaasu- tai sähkö), kaapit tai telineet kuivien ravintoaineiden, kemikaalien ja steriilien astioiden säilyttämiseen.

pesu- huone astioiden pesua ja käsittelyä varten, jossa tulisi olla pesuallas (kylmällä ja kuumalla vedellä) ja liesi. Pesuhuone on varustettu pöydillä, telineillä, varustettu astioilla astioiden pesuun: pesuaineet, räpyt, rievut.

Sterilointihuoneessa on laitteet puhtaiden astioiden, ravintoaineiden ja jätemateriaalien dekontaminointiin: autoklaavit, kuivauskaappi jne.

Jos on erillinen valmistustila, sitä käytetään ruoanlaittoon, astioiden pakkaamiseen ja muihin aputöihin.

He vastaanottavat ja rekisteröivät tutkimukseen vastaanotetun aineiston kirjaamoon tai sitä korvaavaan tilaan sekä antavat mikrobiologisen tutkimuksen johtopäätökset.

Vivarium- koe-eläinten pitotila, joka on käytettävissä vain suurissa laboratorioissa.