Mikä on kalatesti rintasyövän varalta? Mitä se näyttää? Kalaanalyysi rintasyövässä Kalamenetelmä ja sen soveltaminen lääketieteessä

Kaikissa tapauksissa poikkeuksetta muodostuminen ja kasvu liittyy HER2-tyypin geenin aktiivisuuteen. Hän on vastuussa siitä, kuinka paljon proteiinia myönnetään naisen keholle rintakudoksen kehittämiseen. Kun ensimmäiset terveet solut muuttuvat pahanlaatuisiksi, geenireseptorit saavat tiedon, että solumateriaalin lisäjakoa tarvitaan.

Geeni käynnistää ohjelman lisäkudoksen rakentamiseksi rinnan sisään, vaikka todellisuudessa kasvain käyttää tätä solumateriaalia sen kasvuun ja kehitykseen. Joten karsinooma itse asiassa pettää kehoa ja pakottaa sen ruokkimaan syöpää omien resurssiensa kustannuksella.

Rintasyövän kala-analyysin tehtävänä on nimenomaan tunnistaa HER2-geenin toimintahäiriö ja ryhtyä asianmukaisiin vastatoimiin riittävän lääketieteellisen hoidon määräämiseksi.

Jos kalatestiä ei tehdä ajoissa rintasyövän varalta, vaikka hoitoprosessissa käytettäisiin tiettyjä lääkkeitä, tämä voi johtaa siihen, että kasvain jatkaa aggressiivista kehitystä, joka kattaa kaikki uudet rintakudokset. Nämä ovat ns. väärin määrätyn hoidon seurauksia, koska HER2-geenin toiminnasta ei ole objektiivista tietoa.

Kalaanalyysin läpiviennissä lääkäri lisää potilaan vereen erityisiä aineita, jotka sisältävät väriaineita, jotka voivat visualisoida kuvan kromosomihäiriöistä. Näin lääkäri pystyy visuaalisesti näkemään ja tulevaisuudessa opiskelemaan geneettisiä poikkeavuuksia naisen genomissa, joka johti rintasyövän kehittymiseen.

Jos HER2-geenin toiminnassa havaitaan poikkeavuuksia, määrätään asianmukainen hoito. Jos ei, niin lääkäri määrittää muilla testeillä erilaisen syyn rintasyövän kehittymiseen.

Toinen kalaanalyysin tärkeä etu on, että potilas saa parissa päivässä kattavan raportin geneettisestä taipumuksesta tietyn syövän kehittymiseen. Tämän lääketieteellisen testin avulla on mahdollista diagnosoida samanaikaisesti paitsi maitorauhasen, myös kaikkien vatsan elinten patologia.

Informatiivinen video

Prenataalisen diagnoosin invasiivisten menetelmien avulla voidaan paitsi katsoa tulevaisuuteen ja ennustaa luotettavasti, odottaako syntymätön vauva edelleen kohdunsisäisiin epämuodostumisiin liittyviä sairauksia, myös selvittää synnynnäisten sairauksien luonne ja syyt.

Kaikki tieto on kuitenkin arvokasta vain silloin, kun se on oikea-aikaista. Sikiön kehitystilan osalta testitulosten saamisen nopeus on ratkaisevan tärkeä.

Siksi FISH-menetelmällä, jonka avulla on mahdollista arvioida alkion yleisimpien kehityshäiriöiden esiintyminen mahdollisimman lyhyessä ajassa, on suuri kysyntä geneettisessä diagnostiikassa.

FISH on lyhenne, joka tulkitsee kromosomipoikkeavuuksien havaitsemistekniikan olemuksen - fluoresenssi in situ -hybridisaatio - fluoresoiva hybridisaatio "kotiympäristössä".

Tämä tekniikka, jota ehdottivat viime vuosisadan 70-luvun lopulla J. Goll ja M.-L. Pardew perustuu mahdollisuuteen palauttaa nukleiinihappofragmenttien (DNA tai RNA) sekvenssi niiden denaturoinnin jälkeen.

Kirjoittajat ovat kehittäneet menetelmän, jolla keinotekoisesti luotujen leimattujen DNA-koettimien (koettimien) ja analyysiin otetun sytogeneettisen materiaalin in situ -hybridisaatiolla voidaan tunnistaa kiinnostuksen kohteena olevien kromosomien kvantitatiivisia ja kvalitatiivisia poikkeamia.

FISH-menetelmä sai nimensä viime vuosisadan lopulla, kun fluoresoivia väriaineita käytettiin menestyksekkäästi DNA-koettimien värjäykseen, ja siitä lähtien sitä on parannettu ja monipuolistettu voimakkaasti.

Nykyaikaiset FISH-analyysimenetelmät pyrkivät tarjoamaan mahdollisuuden saada täydellisin tieto kerätyn geneettisen materiaalin analysointiin yhdellä hybridisaatiomenettelyllä.

Tosiasia on, että vain rajoitettu määrä saman sytogeneettisen materiaalin kromosomeja voidaan arvioida kerran hybridisaation jälkeen. Kyky uudelleenhybridisoida DNA-ketjuja heikkenee ajoittain.

Siksi päälle Tämä hetki geneettisessä diagnostiikassa in situ -hybridisaatiota käytetään useimmiten vastaamaan nopeasti kysymyksiin yleisimmästä aneuploidiasta kromosomeissa 21, 13, 18 sekä sukupuolikromosomeissa X, Y.

Mikä tahansa kudos- tai solunäyte soveltuu FISH-analyysiin.

Prenataalisessa diagnoosissa nämä voivat olla verinäytteitä, siemensyöksyä tai.

Tulosten saamisen nopeus varmistetaan sillä, että analyysiin otetusta materiaalista saatuja soluja ei tarvitse viljellä ravintoalustassa, jolloin ne jakautuvat tarvittavaan määrään, kuten klassisessa karyotyypitysmenetelmässä.

Valittu materiaali valmistetaan erityisesti tiivistetyn puhtaan solususpension saamiseksi. Seuraavaksi suoritetaan DNA-koettimen ja koenäytteen natiivi-DNA:n denaturaatioprosessi yksijuosteiseen tilaan ja hybridisaatioprosessi, jonka aikana värjättyjä DNA-koettimia inkuboidaan näytteen DNA:n kanssa.

Siten halutut (värjäytyneet) kromosomit solussa visualisoidaan, niiden lukumäärä, geneettisten rakenteiden rakenne jne. arvioidaan. Erityisen fluoresoivan mikroskoopin okulaarin avulla voit tarkastella valoisia DNA-ketjuja.

Tällä hetkellä FISH-menetelmää käytetään laajalti diagnostisiin tarkoituksiin geneettisten sairauksien, kromosomipoikkeamien havaitsemiseksi lisääntymislääketieteessä, onkologiassa, hematologiassa, biologisessa dosimetriassa jne.

Miten sikiön FISH-diagnoosia käytetään?

Lisääntymislääketieteen alalla FISH-menetelmä yhtenä molekyylisyton menetelmistä geneettinen diagnoosi, käytetään kaikissa vaiheissa.

• pari.

Tulevien vanhempien karyotyypin määrittämiseksi se suoritetaan kerran, koska ihmisen genomi on muuttumaton koko elämän ajan.

Parin karyotyypitys ennen lapsen syntymistä auttaa tunnistamaan, ovatko vanhemmat perinnöllisten geneettisten sairauksien kantajia, myös piilossa. Sekä tulevien äitien ja isien genomin yleinen tila, joka voi vaikuttaa vauvan hedelmöittymiseen ja raskauden kantamiseen.

Tällöin FISH-diagnostiikka toimii usein lisätutkimuksena klassiseen karyotyypitykseen, kun testimateriaalista (vanhempien laskimoverestä) havaitaan kromosomipatologioita, jos epäillään mosaiikkia.

FISH-menetelmällä tehtävä lisätutkimus vahvistaa tai kumoaa luotettavasti epäillyn poikkeaman esiintymisen tulevan vanhemman soluissa.

• Ejakulaatin tutkimus.

Se on tarkoitettu lisääntymisvaikeuksiin parilla "miestekijän" vuoksi. Siittiöiden analyysi FISH-menetelmällä antaa sinun arvioida epänormaalien siittiöiden tason kromosomijoukon suhteen sekä määrittää, onko mies sukupuoleen liittyvien geneettisten sairauksien kantaja.

Jos pariskunta myöhemmin turvautuu hedelmöittymiseen IVF:n avulla, siemensyöksyn FISH-analyysin avulla voit valita korkealaatuisimman siittiön munasoluhedelmöitykseen.

• IVF:n kanssa.

Implantaatiota edeltävään geneettiseen diagnoosiin (PGD). Vanhempien karyotyyppitutkimusten tulosten perusteella määritetään mahdolliset kromosomi- ja geneettiset poikkeavuudet, jotka voivat siirtyä alkioon.

FISH-diagnostiikan kykyjen ansiosta syntyneiden alkioiden geneettisen terveyden tutkimus voidaan suorittaa muutamassa tunnissa ennen siirtoa kohdun onteloon, jotta voidaan varmistaa raskauden alkaminen tunnetulla terveellä sikiöllä.

Lisäksi PGD:n mahdollisuudet mahdollistavat alkioiden sukupuolen määrittämisen ja sitä kautta "tilauksen" tarvittaessa syntymättömän lapsen sukupuolen.

• Raskauden aikana.

Prenataalisessa diagnoosissa: FISH-analyysi sikiösoluista, jotka on saatu korionivilluksen biopsialla, lapsivesitutkimuksella tai kordosenteesin avulla lääkärikeskukset yleensä tarjotaan klassisen sikiösolujen geneettisen tutkimuksen (karyotyypityksen) lisäksi.

Tämä menetelmä on välttämätön, kun on tarpeen saada nopeasti vastaus sikiön yleisimmistä kromosomivioista: kromosomien 21, 18, 13 trisomiasta, kromosomien X ja Y poikkeavuuksista, joskus myös aneuploidioista kromosomissa 14 (tai 17), 15, 16.

FISH-analyysin edut

Geneettisen analyysin suorittaminen FISH-menetelmällä, vaikka se on edelleen apumenetelmä kromosomipatologioiden diagnosoinnissa, sen toteuttamisen tarkoituksenmukaisuus määrittää kuitenkin kiistattomat edut:

• testattuja kromosomeja koskevien tulosten saamisen nopeus - muutaman tunnin sisällä - enintään 72.

Tämä voi olla tärkeää, jos raskauden kohtalo riippuu geneetikkojen diagnoosista;

• FISH-menetelmän korkea herkkyys ja luotettavuus – onnistunut analyysi on mahdollista mitättömän pienellä biomateriaalimäärällä – yksi solu riittää, tulosten virhe on enintään 0,5 %.

Tämä voi olla tärkeää, kun solujen lukumäärä alkuperäisessä näytteessä on rajoitettu, esimerkiksi kun niiden jakautuminen on huono.

• FISH-diagnostiikan mahdollisuus missä tahansa raskauden vaiheessa (7. viikosta alkaen) ja mistä tahansa biologisesta näytteestä: korionipalat, lapsivesi, sikiön veri jne.

Mistä saan FISH-diagnoosin?

Moskovassa FISH-menetelmää sikiön kromosomipoikkeavuuksien prenataaliseen diagnosointiin käytetään seuraavissa lääketieteellisissä keskuksissa:

Pääsääntöisesti klinikat tarjoavat FISH-diagnostiikkapalvelun osana täydellistä sikiön karyotyypitystä invasiivisella interventiolla lisämaksusta. Ja pääsääntöisesti tulevat vanhemmat suostuvat maksamaan ylimääräistä, koska FISH-menetelmän ansiosta saat parissa päivässä selville tärkeimmän lapsestasi

FISH-tekniikka, Fluorescent in situ -hybridisaatio, kehitettiin 1980-luvun puolivälissä, ja sitä käytetään havaitsemaan spesifisten DNA-sekvenssien läsnäolo tai puuttuminen kromosomeissa sekä DNA:n alfasatelliitti, joka sijaitsee kromosomin 6 sentromeerissä, CEP6( 6p11.1-q11. yksi).

Tämä on muuttanut merkittävästi diagnoosia. onkologiset sairaudet melanosyyttisen alkuperän esiintyminen kasvainantigeenien havaitsemisen yhteydessä. Pahanlaatuisuuden taustaa vasten määritetään mutaatio kolmessa antigeenissä: CDK2NA (9p21), CDK4 (12q14) ja CMM1 (1p). Tältä osin tavoitteen mahdollisuus erotusdiagnoosi, joka perustuu melanosyyttisten ihokasvainten geneettisten ominaisuuksien määrittämiseen, on erittäin tärkeä melanooman ja sen esiasteiden varhaisessa diagnosoinnissa.Tumassa, jossa on normaali tutkittava geenisarja ja kromosomi 6, kaksi RREB1-geeniä värjäytyi punaiseksi, kaksi MYB-geenit värjäytyivät keltaiseksi, kaksi CCND1-geeniä vihreällä korostettuina ja kromosomin 6 kaksi sentromeeriä sinisellä. Diagnostisiin tarkoituksiin käytetään fluoresoivia näytteitä.

Reaktion tulosten arviointi: lasketaan punaisten, keltaisten, vihreiden ja sinisten signaalien lukumäärä kunkin näytteen 30 ytimessä, tunnistetaan neljä parametria geneettisten häiriöiden eri muunnelmista, joissa näyte on geneettisesti yhdenmukainen melanooman kanssa. Esimerkiksi näyte vastaa melanoomaa, jos CCND1-geenin keskimääräinen lukumäärä ydintä kohti on ≥2,5. Muiden geenien kopiomäärä arvioidaan samalla periaatteella. Lääkettä pidetään FISH-positiivisena, jos vähintään yksi neljästä ehdosta täyttyy. Näytteitä, joissa kaikki neljä parametria ovat raja-arvojen alapuolella, pidetään FISH-negatiivisina.

Kromosomien spesifisten DNA-sekvenssien määrittäminen suoritetaan biopsianäytteistä tai kirurgisesta materiaalista. Käytännön toteutuksessa FISH-reaktio on seuraava: melanosyyttien ytimissä DNA:ta sisältävä testimateriaali prosessoidaan sen molekyylin osittaiseksi tuhoamiseksi kaksijuosteisen rakenteen rikkomiseksi ja siten helpottaen pääsyä halutulle geenialueelle. Näytteet luokitellaan DNA-molekyyliin kiinnittymispaikan mukaan. Materiaali FISH-reaktioon hoitokäytäntö ovat parafiinikudosleikkeitä, sivelyjä ja tulosteita.

FISH-reaktion avulla voit löytää muutoksia, jotka ovat tapahtuneet DNA-molekyylissä geenin kopioiden määrän lisääntymisen, geenin katoamisen, kromosomien lukumäärän muutoksen ja kvalitatiivisten muutosten - geenin liikkeen - seurauksena. lokuksia sekä samassa kromosomissa että kahden kromosomin välillä.

FISH-reaktiolla saatujen tietojen käsittelemiseksi ja kolmen tutkitun ryhmän geenien kopiomäärän välisen suhteen tutkimiseksi käytetään Spearman-korrelaatiokerrointa.

Melanoomalle on ominaista kopiomäärän lisääntyminen verrattaessa nevus- ja dysplastiseen nevusiin.

Yksinkertaisessa nevusissa dysplastiseen nevusiin verrattuna on vähemmän kopiomäärän poikkeavuuksia (eli enemmän normaaleja kopioita).

Päätössääntöjen rakentamiseen, jotta voidaan ennustaa, kuuluuko näyte tiettyyn luokkaan (yksinkertaisten ja dysplastisten nevien erotusdiagnoosi), käytetään "päätöspuiden" matemaattista laitteistoa. Tämä lähestymistapa on osoittautunut käytännössä hyväksi, ja tämän menetelmän soveltamisen tulokset (toisin kuin monet muut menetelmät, kuten neuroverkot) voidaan tulkita selkeästi rakentamaan päätössääntöjä yksinkertaisten, dysplastisten nevi- ja melanooman erottamiseksi. Alkutiedot kaikissa tapauksissa olivat neljän geenin kopiomäärät.

Differentiaalidiagnostiikan päätössäännön rakentamistehtävä on jaettu useisiin vaiheisiin. Ensimmäisessä vaiheessa melanooma ja nevus erotetaan toisistaan ​​ottamatta huomioon nevus-tyyppiä. Seuraavassa vaiheessa rakennetaan päätössääntö, joka erottaa yksinkertaiset ja dysplastiset nevit. Lopuksi, viimeisessä vaiheessa on mahdollista rakentaa "päätöspuu" dysplastisen nevus-dysplasian asteen määrittämiseksi.

Tällainen nevin luokittelun tehtävän jakaminen alitehtäviin mahdollistaa ennusteiden suuren tarkkuuden jokaisessa vaiheessa. Päätöspuun rakentamisen syöttötiedot ovat tietoja neljän geenin kopiomäärästä potilailla, joilla on diagnosoitu melanooma ja potilailla, joilla on diagnosoitu ei-melanooma (potilaat, joilla on erityyppisiä nevus - yksinkertaisia ​​ja dysplastisia). Jokaiselle potilaalle on saatavilla geenikopionumerot 30 solulle.

Siten diagnoosin ennustamisen tehtävän jakaminen useisiin vaiheisiin antaa meille mahdollisuuden rakentaa erittäin tarkkoja päätössääntöjä paitsi melanooman ja nevusin erottamiseksi, myös nevus-tyypin määrittämiseksi ja dysplasian asteen ennustamiseksi dysplastiselle nevusille. Rakennetut "päätöspuut" ovat selkeä tapa ennustaa diagnoosi geenikopioiden perusteella, ja niitä voidaan helposti käyttää kliinisessä käytännössä hyvänlaatuisten, esipahanlaatuisten ja pahanlaatuisten melanosyyttisten ihokasvaimien erottamiseen. Ehdotettu erotusdiagnoosin lisämenetelmä on erityisen tärkeä jättimäisten synnynnäisten pigmentoituneiden ja dysplastisten nevin poistamisessa potilailla. lapsuus, koska kun tällaiset potilaat menevät hoitolaitoksiin, diagnostisten virheiden prosenttiosuus on suuri. Kuvatun menetelmän käytön tulokset ovat erittäin tehokkaita, sitä on suositeltavaa käyttää pigmentoituneiden ihokasvaimien diagnosoinnissa, erityisesti potilailla, joilla on FAMM-oireyhtymä.

HER-2-kasvaintilan määritys FISH-menetelmällä- kasvaimen kehittymiselle alttiutta koskeva tutkimus ja oikea-aikaisen, riittävän hoidon valinta rintasyöpään (BC) tai mahasyöpään (GC).

HER-2 (HER-2/neu)- Ihmisen epidermaalinen kasvutekijäreseptori-2 on proteiini, joka voi vaikuttaa syöpäsolujen kasvuun. Sen luo erityinen geeni, nimeltään HER-2/neu-geeni. HER-2 on ihmisen orvaskeden kasvutekijäksi kutsutun spesifisen kasvutekijän reseptori, jota esiintyy luonnollisesti ihmisillä. Kun ihmisen epidermaalinen kasvutekijä kiinnittyy rintasyöpäsolujen HER-2-reseptoreihin, se voi stimuloida näiden solujen kasvua ja jakautumista. Terveessä kudoksessa HER-2 välittää signaaleja, jotka säätelevät solujen lisääntymistä ja eloonjäämistä, mutta HER-2:n liiallinen ilmentyminen voi johtaa pahanlaatuiseen solutransformaatioon.

HER-2:n hyperekspressio joissakin rintasyövän alatyypeissä johtaa lisääntyneeseen proliferaatioon ja angiogeneesiin, apoptoosin säätelyhäiriöön (geneettisesti ohjelmoitu solujen itsetuho). On osoitettu, että tämän reseptorin yli-ilmentymiseen kasvainkudoksessa rintasyövässä liittyy taudin aggressiivisempi eteneminen, kasvaimen lisääntynyt metastaattinen potentiaali ja epäsuotuisampi ennuste. HER-2:n yli-ilmentymisen ja rintasyövän huonon ennusteen välisen yhteyden havaitseminen on johtanut sellaisten hoitomenetelmien etsimiseen, jotka tähtäävät spesifisesti estämään HER-2/neu-onkogeeni (kohdennettu anti-HER2-hoito).

Rintasyöpä (BC)- rinnan rauhaskudoksen pahanlaatuinen kasvain. RZhM on ensimmäinen paikka kaikista naisten pahanlaatuisista sairauksista.

Riippuen kasvaimen biologisten markkerien läsnäolosta - hormonireseptorien (estrogeenin ja/tai progesteronin) ilmentyminen, HER-2:n ilmentyminen - hormonireseptoripositiivinen, HER-2-positiivinen ja kolminkertaisesti negatiivinen rintasyöpä.

HER-2/neu-positiivisille (HER-2+) rintasyöpätyypeille on tunnusomaista HER-2/neu-proteiinin korkea ekspressio.
HER=2/neu-negatiivisille (HER-2-) rintasyöpätyypeille on tunnusomaista HER-2/neu-proteiinin alhainen ilmentyminen tai puuttuminen.
On arvioitu, että joka viides rintasyöpää sairastava nainen on HER-2-positiivinen. Useimmat rintasyövät ovat hormoniriippuvaisia: estrogeenit ja progesteroni vaikuttavat niihin stimuloivasti (proliferatiivinen ja neoplastinen). HER-2-positiivisessa rintasyövässä kasvainsolujen pinnalla on ylimäärä HER-2-reseptoreita. Tätä ilmiötä kutsutaan "positiiviseksi HER-2-statukseksi", ja se diagnosoidaan 15-20 prosentilla rintasyöpää sairastavista naisista.

HÄNÄ-2- ihmisen epidermaalisen kasvutekijän reseptorityyppi 2, joka esiintyy kudoksissa ja osallistuu normaalisti solujen jakautumisen ja erilaistumisen säätelyyn. Sen ylimäärä kasvainsolujen pinnalla (hyperekspressio) määrää kasvaimen nopean hallitsemattoman kasvun, suuren etäpesäkkeiden riskin ja joidenkin hoitomuotojen alhaisen tehokkuuden. HER-2-positiivinen rintasyöpä on erityisen aggressiivinen sairauden muoto, joten tarkka määritelmä HER-2-status on avainasemassa hoitotaktiikoiden valinnassa.

mahasyöpä (SC)- pahanlaatuinen kasvain, joka on peräisin mahalaukun limakalvon epiteelistä.

Mahasyöpä on onkologisen sairastuvuuden rakenteessa neljännellä sijalla ja onkologisen kuolleisuuden rakenteessa toisella sijalla maailmassa. Miehillä mahasyövän ilmaantuvuus on 2 kertaa suurempi kuin naisilla. Venäjä kuuluu alueisiin, joilla mahasyövän ilmaantuvuus ja siihen kuolleisuus on korkea. Gastroesofageaalisen sairauden diagnoosi alkuvaiheessa vaikeaa taudin pitkän oireettoman kulun vuoksi. Usein mahasyöpä havaitaan myöhäisissä vaiheissa, jolloin 5 vuoden eloonjäämisaste ei ylitä 5-10 % ja kemoterapia on ainoa hoitomuoto.

Pääasiallinen mahasyövän hoitomenetelmä on kirurginen. Useimmilla potilailla diagnoosihetkellä kuitenkin määritetään laajalle levinnyt kasvainprosessi, mikä tekee mahdottomaksi suorittaa radikaalia toimintaa ja vaatii systeemistä lääkehoitoa. Kemoterapian suorittaminen lisää tilastollisesti merkitsevästi metastaattista mahasyöpää sairastavien potilaiden kokonaiseloonjäämistä ja parantaa heidän elämänlaatuaan.

HER-2-onkogeeni (erbB-2) tunnistettiin alun perin rintakasvaimissa. Tämän geenin monistuminen ja yli-ilmentyminen on suhteellisen spesifinen tapahtuma rintakarsinoomille, eikä sitä käytännössä tapahdu muun lokalisoinnin kasvaimissa. Mahasyöpä näyttää olevan yksi harvoista poikkeuksista: HER-2-aktivaatio havaitaan noin 10-15 %:ssa tapauksista. pahanlaatuiset kasvaimet ja korreloi taudin aggressiivisen kulun kanssa.

HER-2:n yli-ilmentyminen on huono ennustetekijä. Erilaisten tutkimusten mukaan HER-2-geenin monistuminen mahasyöpäpotilailla korreloi alhaisen kokonaiseloonjäämisasteen kanssa.

FISH-menetelmää käytetään HER-2-tilan arvioimiseen GC:ssä ja BC:ssä.

KALASTAA- tutkimuksen avulla voit määrittää kromosomien laadulliset ja kvantitatiiviset muutokset pahanlaatuisten verisairauksien ja kiinteiden kasvainten diagnosoimiseksi.

FISH-tutkimuksia käytetään nykyään laajalti kaikkialla maailmassa.

FISH-menetelmä (fluoresoiva hybridisaatio in situ) - tutkimus HER-2/neu-geenien lukumäärästä syöpäsoluissa.

Käyttöaiheet:

• rintasyöpä - ennustetta ja hoidon valintaa varten;
• mahasyöpä - ennusteen ja hoidon valintaa varten.

Histologinen protokolla ja immunohistokemiallinen protokolla, IHC-lasi vaaditaan.

Tulosten tulkinta
FISH-testin tulokset ilmaistaan ​​seuraavasti:

1. Positiivinen (lisääntynyt, HER-2-geeni on monistunut):

• HER-2-positiivinen rintasyöpä;

• HER-2 negatiivinen rintasyöpä.

Nykyaikainen sytogeneettisen analyysin menetelmä, jonka avulla voidaan määrittää kromosomien kvalitatiiviset ja kvantitatiiviset muutokset (mukaan lukien translokaatiot ja mikrodeleetiot) ja jota käytetään pahanlaatuisten verisairauksien ja kiinteiden kasvainten erotusdiagnoosissa.

Venäjän synonyymit

Fluoresoiva in situ -hybridisaatio

FISH-analyysi

Englannin synonyymit

Fluoresenssi in situ hybridisaatio

Tutkimusmenetelmä

Fluoresoiva in situ -hybridisaatio.

Mitä biomateriaalia voidaan käyttää tutkimukseen?

Kudosnäyte, kudosnäyte parafiinilohkossa.

Kuinka valmistautua tutkimukseen oikein?

Ei vaadi valmistelua.

Yleistä tietoa tutkimuksesta

Fluoresoiva in situ -hybridisaatio (FISH) sisään- situ hybridisaatio) on yksi suurimmista nykyaikaisia ​​menetelmiä kromosomipoikkeavuuksien diagnosointi. Se perustuu DNA-koettimien käyttöön, jotka on leimattu fluoresoivalla leimalla. DNA-koettimet ovat erityisesti syntetisoituja DNA-fragmentteja, joiden sekvenssi on komplementaarinen tutkittujen poikkeavien kromosomien DNA-sekvenssin kanssa. DNA-näytteet eroavat siis koostumukseltaan: erilaisia, spesifisiä DNA-näytteitä käytetään erilaisten kromosomipoikkeavuuksien määrittämiseen. DNA-koettimet vaihtelevat myös kooltaan: jotkut voivat olla suunnattuja koko kromosomiin, toiset tiettyyn lokukseen.

Jos testinäytteessä on poikkeavia kromosomeja, ne sitoutuvat hybridisaatioprosessin aikana DNA-koettimeen, joka fluoresoivalla mikroskoopilla tarkasteltuna määritetään fluoresoivaksi signaaliksi (FISH-testin positiivinen tulos). Poikkeavien kromosomien puuttuessa sitoutumattomat DNA-näytteet "pestään pois" reaktion aikana, mikä fluoresoivalla mikroskoopilla tarkasteltuna määritellään fluoresoivan signaalin puuttumiseksi (negatiivinen FISH-testitulos). Menetelmä mahdollistaa fluoresoivan signaalin läsnäolon lisäksi myös sen intensiteetin ja lokalisoinnin arvioinnin. FISH-testi ei siis ole vain kvalitatiivinen, vaan myös kvantitatiivinen menetelmä.

FISH-testillä on useita etuja muihin sytogeneettisiin menetelmiin verrattuna. Ensinnäkin FISH-tutkimusta voidaan soveltaa sekä metafaasi- että interfaasitumiin eli jakautumattomiin soluihin. Tämä on FISH:n tärkein etu verrattuna klassisiin karyotyypitysmenetelmiin (esim. kromosomien Romanowsky-Giemsa-värjäys), joita käytetään vain metafaasiytimiin. Tämä tekee FISH-tutkimuksesta tarkemman menetelmän kromosomipoikkeavuuksien havaitsemiseksi kudoksissa, joilla on alhainen proliferatiivinen aktiivisuus, mukaan lukien kiinteät kasvaimet.

Koska FISH-testissä käytetään faasien välisten ytimien stabiilia DNA:ta, tutkimuksessa voidaan käyttää monenlaisia ​​biomateriaaleja - hienokulma-aspiraatiobiopsia-aspiraatteja, sivelynäytteitä, luuytimen aspiraatteja, biopsianäytteitä ja ennen kaikkea säilyneitä kudosfragmentteja, kuten histologisia lohkoja. Siten esimerkiksi FISH-testi voidaan onnistuneesti suorittaa toistetuille valmisteille, jotka on saatu rintabiopsianäytteen histologisesta lohkosta, kun varmistetaan "rintojen adenokarsinooman" diagnoosi ja tarve määrittää kasvaimen HER2/neu-status. On syytä korostaa, että FISH-tutkimusta suositellaan tällä hetkellä varmistustestiksi, kun tuumorin immunohistokemiallisen tutkimuksen tulos on epämääräinen HER2/neu-kasvainmarkkerin (IHC 2+) suhteen.

Toinen FISH:n etu on sen kyky havaita mikrodeleetioita, joita ei havaita klassisella karyotyypiyksellä tai PCR:llä. Tämä on erityisen tärkeää tapauksissa, joissa epäillään DiGeorgen oireyhtymää ja velokardiofasiaalista oireyhtymää.

FISH-testiä käytetään laajalti pahanlaatuisten sairauksien erotusdiagnoosissa, ensisijaisesti onkohematologiassa. liittyvät kromosomiepänormaalit kliininen kuva ja immunohistokemiallisten tutkimusten tiedot ovat perustana lymfo- ja myeloproliferatiivisten sairauksien luokittelulle, hoitotaktiikkojen määrittämiselle ja ennusteelle. Klassisia esimerkkejä ovat krooninen myelooinen leukemia - t (9;22), akuutti promyelosyyttinen leukemia– t (15;17), krooninen lymfaattinen leukemia- trisomia 12 ja muut. Kiinteiden kasvainten osalta yleisimmin käytetty FISH-tutkimus on rintasyövän diagnosoinnissa, Virtsarakko, paksusuoli, neuroblastooma, retinoblastooma ja muut.

FISH-tutkimusta voidaan käyttää myös prenataalisessa ja preimplantaatiodiagnoosissa.

FISH-testi suoritetaan usein yhdessä muiden molekyyli- ja sytogeneettisten diagnostisten menetelmien kanssa. Tämän tutkimuksen tulos arvioidaan yhdessä muiden laboratorio- ja instrumenttitietojen tulosten kanssa.

Mihin tutkimusta käytetään?

• Pahanlaatuisten sairauksien (veri ja kiinteät elimet) erotusdiagnostiikkaan.

Milloin tutkimus on suunniteltu?

• Jos epäilet pahanlaatuista verisairautta tai kiinteitä kasvaimia, hoidon taktiikka ja ennuste riippuu kasvainkloonin kromosomikoostumuksesta.

Mitä tulokset tarkoittavat?

Positiivinen tulos:

• Poikkeavien kromosomien esiintyminen testinäytteessä.

Negatiivinen tulos:

• Poikkeavien kromosomien puuttuminen testinäytteestä.

Mikä voi vaikuttaa tulokseen?

• Poikkeavien kromosomien lukumäärä.

• Kliinisen materiaalin immunohistokemiallinen tutkimus (käyttäen yhtä vasta-ainetta)
• Kliinisen materiaalin immunohistokemiallinen tutkimus (käyttäen neljää tai useampaa vasta-ainetta)
• HER2-kasvaintilan määritys FISH:lla
• HER2-kasvaintilan määritys CISH-menetelmällä

Kuka tilaa tutkimuksen?

Onkologi, lastenlääkäri, synnytyslääkäri-gynekologi, geneetikko.

Kirjallisuus

• Wan TS, Ma ES. Molekyylisytogenetiikka: välttämätön työkalu syövän diagnosoinnissa. Anticancer Res. 2005 heinä-elokuu;25(4):2979-83.
• Kolialexi A, Tsangaris GT, Kitsiou S, Kanavakis E, Mavrou A. Sytogeneettisten ja molekyylisten sytogeneettisten tutkimusten vaikutus hematologisiin maligniteeteihin. Chang Gung Med J. 2012 maalis-huhtikuu;35(2):96-110.
• Mühlmann M. Molekulaarinen sytogenetiikka metafaasi- ja interfaasisoluissa syövän ja geneettisen tutkimuksen, diagnoosin ja ennustamisen kannalta. Käyttö kudosleikkeissä ja solususpensioissa. Genet Mol Res. 2002 Jun 30;1(2):117-27.